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2014年 第29卷 第1期    刊出日期：2014-01-20

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乙型肝炎病毒感染者细胞免疫的临床监测专题

重视乙型肝炎病毒感染者细胞免疫的临床研究

朱晴晖

2014, 29(1):  1-3.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.001

摘要 ( 291 )   HTML   PDF (706KB) ( 640 )  

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乙型肝炎病毒(HBV)感染者的细胞免疫功能是其识别并清除病毒(急性自限性感染)抑或表现为免疫耐受(慢性持续感染)的关键因素, 与疾病的预后和转归密切相关, 从而决定了HBV感染者细胞免疫的临床监测的必要性。本文评价了“乙型肝炎病毒感染者细胞免疫的临床监测”专题刊登的综述和论文的特点。基础免疫学研究的发展将给临床免疫学研究提供更广的领域。期待临床和实验室对HBV感染者细胞免疫临床研究的重视。

T淋巴细胞和NK细胞在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

梁艳, 王皓, 仲人前

2014, 29(1):  4-9.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.002

摘要 ( 294 )   HTML   PDF (727KB) ( 718 )  

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慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是严重危害我国人民健康的重大传染病, 而造成慢性化的免疫学机制一直是相关研究的热点。我们主要围绕T淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞在慢性HBV感染中作用的最新研究进展进行综述, 以进一步加深细胞免疫在HBV感染中作用的认识, 为慢性HBV感染的诊治提供新的思路。

慢性乙型肝炎患者外周血抗原特异性CD8⁺T细胞功能的初步分析

蔡刚, 吴蓓颖, 范臻佳, 沈茜

2014, 29(1):  10-14.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.003

摘要 ( 260 )   HTML   PDF (1060KB) ( 754 )  

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目的 评价慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血抗原特异性CD8⁺T细胞的功能及与临床相关指标的关系。方法 采用主要组织相容性复合物(MHC)-抗原肽四聚体标记技术检测CHB患者外周血乙型肝炎病毒(HBV)抗原特异性CD8⁺T细胞, 并对其细胞因子分泌能力进行检测, 分析其与临床生化和病毒学指标的关系。结果 35例人类白细胞相关抗原(HLA)-A基因型为A02或A24的患者中有9例患者至少检出1种被四聚体识别的HBV抗原特异性CD8⁺ T细胞, 其白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的分泌能力明显低于其自身的外周血总CD8⁺ T细胞。检出抗原特异性CD8⁺T细胞患者的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平明显高于阴性患者, 而HBV DNA水平低于阴性患者。结果 CHB患者外周血抗原特异性CD8⁺T细胞存在明显的功能缺陷, 可能因病毒抗原持续刺激造成功能耗竭, 但外周血出现抗原特异性CD8⁺T细胞仍表明患者体内出现较强抗病毒免疫反应。

慢性乙型肝炎患者外周血Th17细胞比例和IL-17表达水平的临床意义

丁庆莉, 唐古生, 贺铮雯, 沈茜, 秦阳华

2014, 29(1):  15-20.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.004

摘要 ( 184 )   HTML   PDF (891KB) ( 723 )  

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目的 分析临床不同疾病程度慢性乙型肝炎(CHB)患者和正常对照者外周血辅助性T细胞17(Th17)的比例和其效应分子白细胞介素17(IL-17)水平的变化与疾病严重程度、乙型肝炎病毒(HBV) DNA载量、肝脏损伤标志物等的关系, 以进一步证实Th17细胞在CHB患者疾病进程中的作用。方法 应用流式细胞术、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等检测93例CHB患者(其中轻度21例、中度37例、重度35例)和28名正常对照者外周血Th17细胞比例、血清IL-17水平, 纯化CD4⁺T细胞经功能性抗CD3、抗CD28抗体刺激后IL-17和维甲酸相关孤儿核受体C(RORC)mRNA表达水平, 纯化CD4⁺T细胞刺激后培养液中IL-17水平。比较和分析上述检测数据在各组间的统计学差异及与HBV DNA载量、肝脏损伤标志物等的关系。结果 与正常对照组相比, CHB组外周血Th17细胞比例明显升高, 且随着疾病的加重, Th17细胞的比例也随之上升。CHB重度组Th17细胞比例、IL-17和RORC mRNA表达水平显著高于中度组、轻度组和正常对照组(P<0.05), 各组间血清IL-17水平差异无统计学意义(P>0.05);CHB组纯化CD4⁺T细胞刺激后培养液中IL-17水平显著高于正常对照组(P<0.05);CHB重度组培养液IL-17水平明显高于中度组和轻度组(P<0.05)。CHB组外周血Th17细胞比例与血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平呈明显正相关(P<0.01), 而与血清HBV DNA载量无相关性。结果 CHB患者体内增高的Th17细胞可能是造成肝脏炎症、肝细胞损伤的主要原因之一, 并与CHB的重症化密切相关。

HBV感染者外周血Th17细胞和Treg细胞的检测及意义

胡月明, 马莉, 李虹

2014, 29(1):  21-25.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.005

摘要 ( 284 )   HTML   PDF (771KB) ( 809 )  

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目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血中辅助性T细胞17(Th17)细胞和调节性T细胞(Treg)的比例变化及其与HBV感染后肝脏损伤的关系。方法 采用流式细胞术检测34例乙型肝炎病毒携带者(ASC)、50例慢性乙型肝炎(CHB)患者、32例肝细胞癌(HCC)伴活动性肝炎(简称HCC)患者及30名健康对照者(正常对照组)外周全血Th17细胞和Treg细胞, 同时采用西门子1650全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)。结果 与正常对照组的Th17细胞比例(1.13%±0.37%)比较, ASC组略有升高(1.30%±0.28%), 但差异无统计学意义(P>0.05);CHB组(2.06%±1.15%)和HCC组(5.89%±3.31%)均明显升高(P<0.01), 且HCC组高于CHB组(P<0.05)。Th17细胞比例与ALT、AST呈正相关[相关系数(r)分别为0.682、0.637, P均＜0.01]。与正常对照组CD4⁺CD25⁺CD127^lowTreg细胞(7.18%±2.28%)比较, ASC组(7.72%±2.05%)略有升高, 但差异无统计学意义(P>0.05);CHB组(9.01%±2.92%)和HCC组(10.86%±1.77%)均明显升高(P<0.01), 且HCC组高于CHB组(P<0.05)。Treg细胞与ALT、AST均呈正相关[r值分别为0.452(P<0.01)、0.307(P<0.05)]。外周血Th17细胞比例与Treg细胞比例呈正相关(r=0.327, P<0.01)。正常对照组Th17/Treg最低, 为0.17±0.16, ASC组略有上升(0.18±0.13), 但差异无统计学意义(P>0.05);CHB组(0.23±0.19)和HCC组(0.52±0.54)明显升高(P<0.05、P<0.01)。结果 HBV感染后随着疾病的发生、发展, 外周血Th17细胞和Treg细胞的比例增加。由于Th17细胞和Treg细胞构成的平衡被打破, 趋向Th17细胞所介导的炎症反应, 引起肝细胞损伤。

HBV相关慢加急性肝衰竭患者血清细胞因子水平与疾病预后的关系研究

罗光成, 黄云丽, 闫惠平, 冯霞, 林芳, 凡瞿明, 张国元

2014, 29(1):  26-30.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.006

摘要 ( 264 )   HTML   PDF (706KB) ( 481 )  

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目的 观察乙型肝炎病毒(HBV)相关慢加急性肝衰竭(ACLF)患者血清细胞因子水平的变化, 探讨细胞因子在疾病预后中的作用。方法 收集HBV相关ACLF患者24例(治愈者13例, 死亡者11例)、慢性乙型肝炎(CHB)患者30例和正常对照者15名, 采用 Luminex 液相芯片技术检测血清白细胞介素IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)、γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子水平, 并结合临床指标进行相关分析。结果 ACLF组IL-6、IL-8和TNF-α水平高于CHB组和对照组(P<0.01), CHB组亦高于对照组(P<0.05);ACLF死亡组IL-6、TNF-α水平和终末期肝病模型(MELD)评分明显高于治愈组(P<0.05);TNF-α、IL-6与凝血酶原活动度(PTA)之间呈明显负相关(r=－0.712, P<0.001;r=－0.521, P=0.009);TNF-α、IL-6与MELD评分之间呈明显正相关(r=0.491, P<0.015;r=0.379, P=0.048)。细胞因子与HBV DNA和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)之间无明显相关性。结果 HBV相关ACLF患者血清中多种细胞因子明显升高, 其中IL-6和TNF-α水平随疾病严重程度的增加而增加, 检测其血清细胞因子水平有助于疾病严重程度和预后转归的判断。

临床应用研究·论著

上海地区成人网织红细胞参数参考区间调查

金硕, 戴珉, 张军, 杨滟, 沈薇, 应春妹, 范竹萍

2014, 29(1):  31-33.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.007

摘要 ( 432 )   HTML   PDF (630KB) ( 478 )  

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目的 调查上海地区成人网织红细胞绝对值(RET#)和百分比(RET%)及分群值的参考区间。方法 采用XE-2100全自动血液分析仪检测2 000名体检者(男1 116名, 女884名)网织红细胞及其相关参数。采集所有对象乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K₂)抗凝静脉全血2 mL, 2 h内完成检测。数据使用SPSS11.0软件进行统计分析。结果 RET%的参考区间:男 (0.61~1.87)%, 女 (0.60~1.81)%;RET#的参考区间:男 (0.030~0.096)×10¹²/L, 女(0.025~0.082)×10¹²/L;低荧光网织红细胞比率(LFR)、中荧光网织红细胞比率(MFR)、高荧光网织红细胞比率(HFR)的参考区间男性分别为(80.8~97.1)%、(2.8~18.1)%、(0.0~2.3)%;女性分别为(82.3~97.9)%、(2.0~15.9)%、(0.0~1.8)%。不同年龄组间RET#和RET%差异无统计学意义(P=0.138和P=0.061), 分群参数差异有统计学意义(P<0.01)。结果 建立了上海地区成人仪器法检测网织红细胞相关参数的参考区间, 提高了网织红细胞检测的临床利用价值。

凝血因子Ⅴ、Ⅷ和组织因子与2型糖尿病合并冠心病的关系

王晓, 朱均权

2014, 29(1):  34-37.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.008

摘要 ( 196 )   HTML   PDF (648KB) ( 556 )  

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目的 探讨凝血因子Ⅴ活性(FⅤ:C)、凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)和组织因子(TF)在2型糖尿病(T2DM)合并冠心病(HD)诊断中的应用价值。方法 测定85例T2DM合并CHD患者[T2DM合并CHD组, 根据CHD不同类型再分为T2DM合并急性心肌梗死(AMI)组(19例)、T2DM合并陈旧性心肌梗死(OMI)组(23例)、T2DM合并不稳定型心绞痛(UAP)组(25例)、T2DM合并稳定型心绞痛(SAP)组(18例)]、29例无合并症的单纯T2DM患者(单纯T2DM组)和24名健康对照者(正常对照组)FⅤ:C、FⅧ:C、血浆TF和血管性血友病因子(VWF)活性及血小板聚集率(PAR), 并分析FⅤ:C、FⅧ:C、TF与VWF、PAR的相关性。结果 T2DM合并CHD组和单纯T2DM组FⅤ:C、FⅧ:C和TF水平均明显高于正常对照组(P<0.001), 且T2DM合并CHD组明显高于单纯T2DM组(P<0.01)。T2DM合并CHD组中, T2DM合并AMI组和T2DM合并UAP组FⅤ:C、FⅧ:C和TF水平均明显高于单纯T2DM组(P<0.001), 且T2DM合并AMI组明显高于T2DM合并UAP组(P<0.01);T2DM合并OMI组和T2DM合并SAP组TF水平明显高于单纯T2DM组(P<0.01), 但FⅤ:C和FⅧ:C水平3组之间差异无统计学意义(P>0.05)。FⅤ:C、FⅧ:C、TF与VWF、PAR均呈明显正相关(P<0.01)。结果 FⅤ:C和FⅧ:C及TF水平可作为T2DM患者并发CHD的诊断指标。TF对判断T2DM合并CHD患者病情的进展有重要价值。

安图医院尿路感染患者中段尿中分离出的粪肠球菌和屎肠球菌的耐药性分析

鲍彩丽, 范倩燕, 吴迪, 汤园园, 谈秋雯, 张雪莲

2014, 29(1):  38-41.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.009

摘要 ( 259 )   HTML   PDF (684KB) ( 608 )  

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目的 分析安图医院尿路感染患者中段尿中分离出的粪肠球菌和屎肠球菌的耐药性及耐药基因, 为临床用药提供参考。方法 选取尿路感染患者中段尿中分离出的粪肠球菌(23株)和屎肠球菌(18株), 采用API进行菌种鉴定, 纸片扩散法进行体外药物敏感性试验, 并采用聚合酶链反应(PCR)对其耐药基因进行检测。结果 23 株粪肠球菌中tetM、ermB、aac(6′)/aph(2′)、ant(6)-Ⅰ和aph(3′)-Ⅲ基因阳性检出率分别为65.2%、82.6%、100.0%、100.0%和100.0%;18株屎肠球菌中tetM、ermB、aac(6′)/aph(2′)、ant(6)-Ⅰ和aph(3′)-Ⅲ基因阳性检出率分别为55.5%、55.5%、100.0%、94.4%和100.0%。粪肠球菌对青霉素、四环素、环丙沙星、左氧氟沙星、红霉素的耐药率>50.0%, 屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、红霉素的耐药率为100.0%。结果 临床分离的肠球菌属耐药相关基因携带率很高, 肠球菌属对多种抗菌药物耐药率较高。

2010年广州市甲型H1N1流感病毒分离株NA基因变异分析

许沙沙, 常彦敏, 徐霖, 冯发深, 何霞, 王铸, 张定梅, 曹开源

2014, 29(1):  42-48.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.010

摘要 ( 256 )   HTML   PDF (2160KB) ( 621 )  

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目的 比较2010年从广州市分离到的甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)基因与2009年中国大陆甲型H1N1流感病毒NA基因的变异情况, 为甲型H1N1流感的监测和防控提供参考资料。方法 收集2010年广州市有发热和呼吸道症状患者的咽拭子标本, 用甲型H1N1流感病毒特异性引物进行聚合酶链反应(PCR)检测, 扩增分离到的甲型H1N1流感病毒NA基因片段, 测序后与2009年的H1N1毒株进行比对和进化分析, 并用生物信息学方法对耐药位点和糖基化位点进行分析。结果 共收集1 194份咽拭子标本, 检测到甲型流感病毒阳性327份, 其中H1N1流感病毒6株, 与2009年分离的甲型H1N1流感病毒相比, 有16个位点发生了有义突变, 3个位点和NA活性相关, 其中222位氨基酸的变异位于NA活性位点上。结果 成功扩增了2010年广州市6株甲型H1N1流感病毒株NA基因并测序, 未发现H275Y耐药位点的变异。3毒株在NA活性位点222位、228位和425位等氨基酸位点处发生了变异, 需继续加强监测。

经验交流

非糖尿病患者HbA_1c浓度与冠心病发病率的关系

沈馨, 吴京, 曲新凯, 娄加陶

2014, 29(1):  49-49.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.011

摘要 ( 240 )   HTML   PDF (1160KB) ( 391 )  

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糖化血红蛋白（HbA_1c）是非酶促糖基化产物（non enzymatic glycosylation，AGEs）之一，其重要性已经得到广泛关注。有研究显示即使在非糖尿病（DM）患者中，HbA_1c也与冠状动脉疾病和颈动脉内膜增厚的发生率相关。因此，HbA_1c可以预测非DM患者心血管疾病的发生^[1-2]。但也有学者发现HbA_1c与非DM患者心血管病变无关^[3]。目前，非DM患者HbA_1c对心血管疾病风险的预测价值引起了越来越多的关注。为此，我们探讨了非DM患者不同HbA_1c浓度与冠心病（CHD）发病率的关系。

临床应用研究·论著

江西地区汉族人群Diego和Dombrock血型基因频率调查

肖莉, 尤榕

2014, 29(1):  50-52.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.012

摘要 ( 196 )   HTML   PDF (637KB) ( 434 )  

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目的 调查200名江西地区汉族随机献血者的Diego(Di)和Dombrock(Do) 2个稀有血型系统, 取得相应基因频率资料, 为临床输血提供相应资料。方法 采集200名江西地区汉族随机献血者, 应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法检测Di和Do 2个血型系统。结果 200名随机献血者中Di血型查出2种基因表现型, 分别为Di^a-b+196例、Di^a+b+4例, Di^a+b-及Di^a-b-未检出;Di^a基因频率为0.01, Di^b基因频率为0.99。Do血型查出3种基因表现型, 分别为Do^a+b-2例, Do^a+b+16例, Do^a-b+182例;Do^a基因频率为0.05, Do^b基因频率为0.95。结果 本地区Di血型系统的表现型多数为Di^a-b+、少数为Di^a+b+, Di^a+b-及Di^a-b-未见;Do血型系统的表现型多数为Do^a-b+、少数为Do^a+b+和Do^a+b-。

不育患者精浆中性α-1, 4-糖苷酶活性与精液参数及精子透明质酸酶活性的关系

马晓萍, 高晓勤, 杨燕平, 杨喆

2014, 29(1):  53-56.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.013

摘要 ( 232 )   HTML   PDF (674KB) ( 354 )  

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目的 探讨精浆中性α-1, 4-糖苷酶(α-1, 4-G)活性与精液参数及透明质酸酶(HYD)活性(HYD阳性反应率及HYD活性强度)之间的关系。方法 收集52例24～40岁不育患者及12名正常对照者(正常生育组)精液。采用以精子质量分析仪对每份标本进行临床精液常规检查及计算机辅助精液分析;运用酶法测定精浆中性α-1, 4-G活性;采用改良固定底物膜法分别检测精子顶体内HYD阳性反应率及HYD活性强度。根据中性α-1, 4-G活性检测结果将不育患者分为中性α-1, 4-G活性正常组(简称酶活性正常组, 39例)和中性α-1, 4-G活性异常组(简称酶活性异常组, 13例)。结果 精浆中性α-1, 4-G活性与精子密度、精子活动率、HYD活性(HYD阳性反应率、HYD活性强度)呈正相关(r值分别为0.816、0.890、0.872和0.847, P均＜0.01);与畸形精子率呈负相关(r=－0.579, P<0.01)。不育各组中精子密度、精子活动率和HYD活性(HYD阳性反应率及HYD活性强度)均明显低于正常生育组(P<0.01);酶活性异常组的畸形精子率高于酶活性正常组(P<0.01)。结果 精浆中性α-1, 4-G活性对精子密度、精子活动率、畸形精子率和HYD活性(HYD阳性反应率、HYD活性强度)均有明显影响。

BNP、cTnI检测对非糖尿病急性心肌梗死合并应急性高血糖临床价值的探讨

陈冬莲, 曾凡鹏, 杜志林, 罗卫平, 梁妙芝, 杨莹

2014, 29(1):  57-60.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.014

摘要 ( 187 )   HTML   PDF (736KB) ( 686 )  

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目的 探讨B型钠尿肽(BNP)及心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平在非糖尿病急性心肌梗死(AMI)合并应激性高血糖患者近期预后评估中的作用。方法 将122例AMI患者按空腹血糖水平分为非糖尿病AMI合并应激性高血糖组(简称试验组, 68例)和AMI未合并应激性高血糖组(简称对照组, 54例), 检测发病后24 h的BNP及cTnI水平。所有入选患者入院后2周行心功能测定, 并对超声心动图参数进行分析, 同时行24 h动态心电图检测, 记录患者入院时心率及心律失常发生率, 并观察住院2周内心力衰竭、心源性休克的发生率, 并对结果进行回顾性分析。结果 试验组发病后24 h的cTnI、BNP水平及心率分别为(10.41±6.83)μg/L、(1 713.6±687.03)ng/L、(86±12)次/min, 均高于对照组[(5.41±2.86)μg/L、(495.61±464.39)ng/L、(77±11)次/min](P<0.05、P<0.01)。BNP与cTnI呈正相关(r²=0.753, r=0.868, P<0.01)。试验组恶性心律失常、心力衰竭、心源性休克的发生率与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。试验组左心室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)结果分别为48.83%±5.01%、24.88%±6.53%, 均明显低于对照组(54.82%±5.29%、30.86%±5.89%)(P<0.01)。结果 BNP及cTnI的水平可以判断非糖尿病AMI合并应激性高血糖患者病情危重程度, 对近期预后可做出评估。BNP和cTnI可作为判断非糖尿病AMI合并应激性高血糖患者危险性的指标。

血清乳腺珠蛋白与乳腺癌的相关性及临床意义探讨

杨超, 康炜, 李建华, 尤涛, 王永锋

2014, 29(1):  61-64.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.015

摘要 ( 189 )   HTML   PDF (709KB) ( 580 )  

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目的 探讨血清人乳腺珠蛋白(hMAM)水平与乳腺癌早期诊断和癌微转移的相关性及其临床意义。方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测68例乳腺癌患者、40例其他癌症患者(前列腺癌、胃癌、卵巢癌、直肠癌各10例)、35例良性乳腺疾病患者以及40名体检正常女性(正常对照组)血清hMAM水平并做比较。将68例乳腺癌患者按临床TNM分期、是否存在雌激素受体(ER)表达、是否有腋窝淋巴结转移以及是否绝经分别分组并做比较。通过受试者工作特征(ROC)曲线确定乳腺癌血清hMAM的Cut-off值。结果 血清hMAM的ROC曲线下面积为0.825, 即诊断乳腺癌的可信度为82.5%[95%可信区间(CI):72.6%～92.4%];当hMAM的Cut-off值为8.43 ng/mL时, 敏感性和特异性分别为76.5%、82.9%。乳腺癌组血清hMAM水平及阳性率明显高于良性乳腺疾病组、其他癌症组和正常对照组(P<0.05), 而良性乳腺疾病组、其他癌症组和正常对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。Ⅲ和Ⅳ期乳腺癌患者的血清hMAM阳性率(55%、75%)明显高于Ⅰ和Ⅱ期患者(25%、40%, P<0.05), 但hMAM水平无差异(P>0.05)。有腋窝淋巴结转移的乳腺癌患者血清hMAM阳性率(88%)明显高于无转移的患者(30%, P<0.05), 但hMAM水平无差异(P>0.05)。不管乳腺癌患者血清中是否存在ER、原癌基因C-erb-2表达及是否绝经, 其hMAM水平及阳性率均无差异(P>0.05)。结果 hMAM的表达与乳腺癌临床分期和是否有腋窝淋巴结转移相关;检测乳腺癌高危人群血清hMAM水平有助于提高乳腺癌的早期诊断和癌微转移的早期发现。

技术研究与评价·论著

改良亚胺培南-EDTA纸片增效试验检测铜绿假单胞菌产金属酶表型

严育忠, 范惠清, 郑文龙, 杨焕章, 陆燕春, 石毅

2014, 29(1):  65-68.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.016

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目的 评估改良亚胺培南-乙二胺四乙酸(EDTA)纸片增效试验在检测铜绿假单胞菌(PA)产金属酶表型中的应用价值。方法 收集95株耐碳青霉烯类药物PA, 采用琼脂稀释法测定所有菌株对亚胺培南和美罗培南的最低抑菌浓度(MIC)值, 聚合酶链反应(PCR)和DNA测序鉴定金属酶基因型, 亚胺培南-EDTA纸片增效试验常规法和改良法检测金属酶表型。结果 95株耐碳青霉烯类药物PA对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为100.0%和71.6%;常规法敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别是100.0%、96.6%、72.7%和100.0%, 而改良法均为100.0%。结果 改良亚胺培南-EDTA纸片增效试验可能是一种检测PA产金属酶表型的有效方法。

基础研究·论著

RP-HPLC-荧光法测定大鼠海马组织中5种氨基酸类神经递质

白钰, 张莉, 马晓丽, 孔彬, 李新霞, 李新宇

2014, 29(1):  69-72.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.017

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目的 采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)-荧光检测技术建立一种用于测定脑海马组织中5种氨基酸[天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、天冬酰胺(Aspa)、谷胺酰胺(Gln)、甘氨酸(Gly)]类神经递质的方法。方法 采用甲醇∶水＝1∶1提取大鼠脑海马组织中多种氨基酸类神经递质。用6-氨基喹啉基-N-羟基-琥珀酰亚胺氨基甲酸酯(AQC)柱前衍生RP-HPLC-荧光法测定海马组织中Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly含量。结果 5种氨基酸类神经递质在15 min内完全分离, 分离效果良好;在0.5～100.0 μg/μL范围有较好的线性关系, 相关系数(r)≥0.999 90;Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly的检出限分别为0.05、0.068、0.037、0.05、0.02 μg/μL。精密度[相对标准偏差(RSD)]为0.4%～2.5%, 加样回收率为70.27％～128.20％, RSD均＜5%;8只正常大鼠海马组织中Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly含量分别为38.98±9.66、126.42±34.06、216.00±0.75、90.44±33.75、(12.95±4.42)μg/g。结果 RP-HPLC-荧光法快速、准确、灵敏度高, 适用于脑组织中氨基酸类神经递质含量的测定。

临床应用研究·论著

三种血吸虫诊断试剂联合检测对血吸虫病的诊断价值

杨慧, 蔡爱玲, 彭芝梅

2014, 29(1):  73-75.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.018

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目的 探讨血吸虫循环抗原、血吸虫抗体及血吸虫虫卵抗体联合检测对血吸虫病诊断的价值。方法 使用血吸虫循环抗原测定试剂盒[酶联免疫吸附试验(ELISA)]、血吸虫抗体(IgG)检测试剂盒[胶体染料法(DDIA)]和血吸虫虫卵抗体检测试剂盒[胶体金免疫渗滤斑点法(DIGFA)]3种试剂对295例慢性血吸虫病患者、53例晚期血吸虫病患者和100名健康体检者进行检测和分析。结果 ELISA + DDIA联合检测可使敏感性提高到80.3%, DDIA+DIGFA联合检测可使敏感性提高到93.9%, ELISA +DDIA+ DIGFA联合检测可使敏感性提高到99.3%, 明显优于单项检测。结果 3种试剂联合检测对提高血吸虫病的检出率具有重要的价值。

综述与讲座

晚期糖基化终产物与冠心病发病机制的研究进展

刘军锋, 孔美娟, 贾克刚

2014, 29(1):  76-80.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.019

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晚期糖基化终产物(AGEs)密切参与了血管平滑肌细胞(VSMCs)分化与增殖以及冠心病等心血管疾病的病理生理过程。AGEs能通过单核细胞趋化蛋白(ERK)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路来诱导VSMCs的自噬作用, 可依赖骨髓基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/趋化因子受体CXCR4轴信号通路促进心肌微血管内皮细胞(CMECs)的增生。AGEs-2和AGEs-3上调了单核细胞AGEs受体(RAGE)的表达。AGEs能抑制内皮祖细胞(EPCs)的增殖、迁移和黏附功能并诱导EPCs凋亡;能增加平滑肌细胞结缔组织因子(CTGF)mRNA和蛋白质的表达, 刺激心肌成纤维细胞增殖并分泌转化生长因子-β1(TGF-β1), 同时诱导Smad2及Smad4的表达。羧甲基赖氨酸(CML)/RAGE轴通过主动脉平滑肌成骨细胞的分化, 诱导巨噬细胞凋亡, 从而使AGEs在糖尿病动脉粥样硬化中发挥重要作用。可溶性RAGE(sRAGE)可作为RAGE配体的诱饵来防止动脉粥样硬化, 其灵敏度和阴性预测值在判定冠状动脉介入治疗(PCI)术后再狭窄方面均高于AGEs/ sRAGE比值。ALT-711是一种AGEs的裂解剂, 能明显抑制AGEs介导的活性氧(ROS)产生、细胞外信号调节激酶磷酸化及环氧合酶-2的表达;色素上皮衍生因子(PEDF)能抑制AGEs诱导的血小板CD40配体(CD40L)表达, 从而有可能成为预防冠心病的一个治疗靶点。他汀类药物亦能抑制AGEs诱导主动脉平滑肌细胞的增殖及ROS的产生。通过以上诸多因素的研究, 可揭示冠心病的某些发病机制, 为相应干预药物的研究及调整临床治疗策略提供依据和方向。

自上而下方法评定测量不确定度的简介

陈龙梅, 王惠民, 居漪

2014, 29(1):  81-85.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.020

摘要 ( 382 )   HTML   PDF (656KB) ( 696 )  

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测量不确定度是保证测量结果完整性的重要参数, 自上而下方法是从不精密度和偏移两个方面评定医学实验室不确定度的首选方法。自1995年该方法提出后, 不确定度的评定对象和计算方法在不断地发展和完善, 目前不精密度评定对象包括重复测量数据和室内质量控制数据, 偏移的评定对象可包含有证参考物质、参考测量程序、回收实验和室间质量评价数据, 我们将对不同评定对象的计算方法进行详述。

影响尿液储存稳定性的常见因素

罗伊, 王从容

2014, 29(1):  86-90.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.021

摘要 ( 417 )   HTML   PDF (659KB) ( 728 )  

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尿液获取简便, 能被无创性收集并能提供大量生理上变化发展进程的信息。尿液中存在许多潜在生物标记物, 包括代谢物质、细胞、蛋白、核酸等。许多因素对尿液中的生物标记物产生一定的影响, 诸如存储温度、存储时间、酸碱度、反复冻融等。而外在因素对尿液储存稳定性的影响仍存在争议。随着组学技术的发展, 利用尿液开展代谢组和蛋白质组学分析也日益增多, 进一步拓宽了外在因素影响尿液存储稳定性的研究。现就外界因素对尿液检测指标的影响情况及环境因素对尿液代谢组和蛋白质组学分析的影响情况做了综述。

经验交流

重症监护病房鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌的耐药性监测

袁红萍, 周文俊, 高卫亚, 张霞军, 朱奋勇

2014, 29(1):  91-92.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.022

摘要 ( 269 )   HTML   PDF (606KB) ( 445 )  

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鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌是临床常见条件致病菌，目前已成为医院感染的重要致病菌，尤以高龄、婴幼儿、严重疾病及器官衰竭、重大创伤、免疫防御功能低下的重症患者多见。为了了解本地区重症监护病房(ICU)鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌的感染情况，以指导临床用药，我们统计了3年间2种细菌在ICU中的分布情况。

单胎及双胎妊娠对血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C水平的影响

官燕飞, 彭建明, 叶贵诚, 刘树沅

2014, 29(1):  93-94.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.023

摘要 ( 167 )   HTML   PDF (619KB) ( 401 )  

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半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)是细胞外最强的半胱氨酸蛋白酶抑制剂，也可能对其他蛋白酶存在抑制作用。由于其相对分子质量较小，生成恒定，在肾小球滤过后在近曲小管完全吸收后分解^{[1]。Cys C血清水平不受年龄、性别、饮食、炎症以及血脂水平的影响，是一种比血清肌酐(Cr)更为灵敏的反映肾小球滤过率的实验室指标[2-3]。目前Cys C已广泛用于各种高血压、糖尿病、系统性红斑狼疮等患者肾损伤的早期诊断。但Cys C在孕妇中的应用却受到许多因素干扰。妊娠是一个非常复杂的生理过程。孕妇的肾功能会产生明显变化。随着妊娠的进行，孕妇外周血容量显著增加，肾小球滤过率也显著增加，孕早期及孕中期血清Cys C浓度常低于未孕妇女，但孕晚期常高于未孕妇女[4-5]；孕妇患妊娠高血压综合征[7]以及先兆子痫[8]时会更高。目前一般认为是由于妊娠所致肾功能损伤所致。有研究显示孕妇血清Cys C水平与菊粉清除率没有相关性[9]。近年研究发现越来越多的非肾性因素影响血清Cys C水平，如肿瘤[10]、激素[11]等。为了更好的利用Cys C这个指标，我们拟比较双胎与单胎妊娠血清Cys C及Cr水平，探讨妊娠时非肾性因素对血清Cys C的影响。}

5 326例机关工作人员血糖、血脂和尿酸结果分析

谢颖, 王云芳, 沈春燕, 张晓霞, 倪建美, 王正良

2014, 29(1):  95-96.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.01.024

摘要 ( 193 )   HTML   PDF (635KB) ( 542 )  

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近年来心血管疾病的发病率和死亡率呈上升趋势, 已成为当前危害人类健康的主要疾病之一。大量流行病学和临床研究结果显示, 血脂、血糖及尿酸(UA)水平的升高与许多老年人常见疾病如冠心病、高血压、血脂异常、糖尿病(DM)及代谢综合征等关系密切。UA是体内嘌呤代谢的最终产物。近年来随着生活水平提高, 高血脂、高嘌呤饮食导致高血脂、高血糖及高UA血症患病率有明显增高, 而且以中老年人偏多, 并随年龄的增长呈逐渐上升的趋势。由此引发的多种疾病, 如脑卒中、痛风、DM等, 给人民健康带来了严重危害。通过检测血脂、血糖及UA浓度筛查高血脂、高血糖及高UA血症, 及早干预, 对预防上述疾病的发生有重要意义。因此, 我们检测了本地区政府机关工作人员的血糖、血脂及UA水平。