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2013年 第28卷 第9期    刊出日期：2013-09-15

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H7N9禽流感的实验室检测专题

H7N9禽流感诊治策略新探:来自医学检验实验室的重要线索

胡芸文,袁正宏

2013, 28(9):  737-748.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.001

摘要 ( 316 )   HTML   PDF (739KB) ( 589 )  

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2013年3月31日，中国国家卫生和计划生育委员会向世界卫生组织（WHO）通报了3例人感染H7N9禽流感病例。截止7月4日，全球已报道的人感染H7N9禽流感确诊病例133例，其中43例死亡。感染病例以男性为主，男女比例为2.4∶1，病例的年龄分布特征不同于2009年甲型H1N1流感，以老年人多见，平均年龄达61岁左右。引起此次疫情的人感染H7N9禽流感病毒是一种全新的基因重配的禽源性流感病毒［Avian Influenza A（H7N9）Virus 2013］

新型禽流感:H7N9

孙 阳, 沈银忠, 林 萍, 刘 莉, 陈 军, 汤 阳, 邵家胜, 齐唐凯, 卢洪洲

2013, 28(9):  739-744.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.002

摘要 ( 424 )   HTML   PDF (708KB) ( 1214 )  

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2013年2月底和3月初，上海复旦大学附属第五人民医院呼吸科发现3例不明原因重症肺炎患者。来自复旦大学附属公共卫生临床中心等的会诊专家第一时间高度怀疑新流感病毒感染的可能性，患者的标本被迅速送到公共卫生临床中心及复旦大学上海医学院进行病原学筛查，未检出新型冠状病毒、SARS冠状病毒和人高致病性禽流感病毒（H5N1）。随即又采用多种策略扩增基因片段并进行序列分析。根据获得的核酸序列和反复的验证，提示此病原体可能是一种以H7N9新型禽流感病毒为基因骨架，同时含有多种流感基因片段的重配毒株，研究取得突破性进展。3月22日将患者的临床标本送往中国疾病预防控制中心(CDC)检测，实验结果得到中国CDC的复核和确认。现将该新型禽流感病毒H7N9的流行病学特征、实验室检测和病原学研究综述如下。

H7N9禽流感患者外周血常规和C反应蛋白的变化及其临床意义

李昕,沈震,张蓓,卢美娟,胡香南,胡绿荫,张军

2013, 28(9):  745-748.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.003

摘要 ( 355 )   HTML   PDF (695KB) ( 531 )  

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目的 探讨H7N9禽流感患者外周血常规和C反应蛋白(CRP)的变化,为临床诊断、治疗及病情监测提供依据。方法 选取18例H7N9禽流感患者(H7N9组),以2009年的20例甲型H1N1流感患者(H1N1组)及20名健康体检者(正常对照组)作为对照。根据患者康复情况将H7N9组再分为轻症组12例、重症组6例。分析各组血常规,同时测定H7N9组外周血CRP水平。结果 与正常对照组比较,H7N9组患病初期白细胞(WBC)总数无明显变化,淋巴细胞(Lym)计数明显降低(P<0.05),同时伴有血小板(PLT)和嗜酸性粒细胞(Eos)下降(P<0.05);重症组中性粒细胞(Neu)计数明显增高(P<0.05),轻症组和重症组之间各项指标均无差异(P>0.05)。与H1N1组比较,H7N9组入院时的血象特点相似,但Lym计数下降更为明显(P<0.05)。与治疗前比较,轻症组治疗后PLT、Lym及Eos计数明显上升(P<0.05)。H7N9组入院时CRP明显升高,重症较轻症组升高更为明显(P<0.05)。轻症组治疗后CRP明显下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 外周血CRP水平对区分H7N9禽流感患者轻、重症及判断预后有一定的提示作用。H7N9禽流感患者外周血常规的变化与甲型H1N1流感存在相似之处,特点并不明显,应充分结合多方面信息以明确诊断和判断预后,以防出现严重的疫情后果。

H7N9禽流感患者生化指标的变化及其临床意义

陈智瑾,李海聪,方欢英,周毅,张军

2013, 28(9):  749-754.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.004

摘要 ( 331 )   HTML   PDF (710KB) ( 434 )  

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目的 探讨H7N9禽流感(2013年)患者治疗前、后生化指标的变化情况及其临床意义。方法 分别检测17例H7N9禽流感患者[12例治愈(H7N9治愈组)、5例死亡(H7N9死亡组)]的心肌指标[包括心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(MYO)和氨基末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)]、肝功能指标[天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)和总胆汁酸(TBA)]、肾功能指标[肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)]共12项生化指标的水平,对比患者治疗前、后各项指标的变化。分别以50例甲型H1N1流感患者(2009年)作为疾病对照组(H1N1组)、12名健康体检者作为正常对照组,并进行比较。结果 与正常对照组比较,H7N9治愈组和H1N1组治疗前均表现为CK-MB、MYO和NT-proBNP水平升高(P<0.05),cTnT正常(P>0.05);AST、ALT和GGT水平升高(P<0.05),ALP和TP水平下降(P<0.05);Cr 和BUN均无异常(P>0.05)。与H1N1组比较,H7N9治愈组除血清ALT、ALP、GGT和TP升高/降低程度不一致外,其余指标差异均无统计学意义(P均>0.05)。H7N9死亡组CK-MB和NT-proBNP水平高于H7N9治愈组,且出现TBA和Cr升高(P<0.05)。与治疗前比较,H7N9治愈组治疗后CK-MB、MYO、NT-proBNP、AST和TBA水平降低,ALP、TP水平升高(P<0.05)。与正常对照组比较,H7N9治愈组治疗后除AST、ALT和GGT水平仍有差异外,其余指标差异均无统计学意义(P>0.05);而H7N9死亡组治疗后除TP以外其余指标均有差异(P<0.05)。结论 H7N9禽流感患者生化指标的检测对于该疾病的辅助诊断、病情判断及预后提示具有一定的意义;但其变化与2009年甲型H1N1流感类似。

实时荧光RT-PCR在人感染H7N9禽流感病毒检测中的应用

华哲云,褚维,宋黎黎,王宇,高淑娜,劳宝法

2013, 28(9):  755-757.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.005

摘要 ( 474 )   HTML   PDF (718KB) ( 522 )  

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目的 评估实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测H7N9禽流感病毒的应用效果,为人感染H7N9禽流感监测和防控提供可靠的实验室检测数据。方法 采集各级医疗单位人感染H7N9禽流感监测及可疑病例标本137例,同时使用4种实时荧光RT-PCR试剂分别检测上呼吸道标本和下呼吸道标本中H7N9禽流感病毒核酸。结果 H7N9禽流感病毒核酸阳性率为3.65%(5/137);H7N9禽流感病毒核酸阳性标本中上呼吸道标本检出率为60%(3/5),下呼吸道标本检出率为100%(3/3)。4种试剂符合率为100%。结论 实时荧光RT-PCR能有效检出H7N9禽流感病毒核酸,检测下呼吸道标本有助于提高阳性检出率。

H7N9禽流感患者外周血T淋巴细胞亚群的分析及意义

毛会军,陈戴红,张敏,王刚,邱建萍

2013, 28(9):  758-761.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.006

摘要 ( 422 )   HTML   PDF (690KB) ( 510 )  

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目的 探讨H7N9禽流感患者外周血T淋巴细胞亚群的变化情况。方法 将18例H7N9禽流感患者(感染组)根据治疗预后分为治愈组13例和死亡组5例,以门诊健康献血者20名作为正常对照组。采用特异性引物聚合酶链反应(PCR)检测H7N9禽流感病毒,并用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群的变化。结果 感染组CD3⁺、CD8⁺和CD4⁺T细胞绝对数及CD4⁺/CD8⁺比值均低于正常对照组(P<0.05)。治愈组CD3⁺、CD8⁺及CD4⁺T细胞绝对数均低于正常对照组(P<0.05)。与治疗前比较,治愈组治疗后CD3⁺、CD8⁺及CD4⁺T细胞绝对数明显升高(P<0.05);但CD3⁺、CD4⁺T细胞绝对数及CD4⁺/CD8⁺比值仍低于正常对照组(P<0.05)。死亡组治疗前、后CD3⁺、CD8⁺及CD4⁺T细胞绝对数均低于治愈组和正常对照组(P均<0.05);且治疗前、后各项指标之间差异均无统计学意义(P>0.05)。治愈组CD3⁺、CD8⁺及CD4⁺T细胞绝对数均高于死亡组(P<0.05)。结论 H7N9禽流感患者存在比较严重的T淋巴细胞亚群失衡,死亡患者免疫失衡更为严重。T淋巴细胞亚群失衡可能与H7N9禽流感的发病有关。

临床应用研究.论著

基于STA-Compact检测系统的儿童和青少年APTT和PT参考区间调查

郑建新,郑昭璟,杨慧,李怀远,傅启华

2013, 28(9):  762-764.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.007

摘要 ( 342 )   HTML   PDF (681KB) ( 496 )  

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目的 通过回顾性分析研究儿童活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶原时间(PT)参考区间。方法 收集STA-Compact检测系统检测的术前凝血功能检查资料,通过对住院病史的查阅,将有出血史和血液疾病史及有心肺和肝肾疾病史的患儿资料排除在外,以接受择期非感染手术的1 d～18岁儿童为主要研究对象,检查前2周未服用抗凝及抗血小板药物,共4 166例儿童样本符合要求,纳入分析。将所有儿童按年龄分为≤30 d组、31 d～1岁组、2～6岁组、7～14岁组和15～18岁组。应用SPSS17.0 软件对儿童APTT和PT参考区间进行统计分析。结果 各组APTT和PT值均无性别差异。≤30 d组与31 d～1岁组、2～6岁组与7～14岁组APTT结果以及2～6岁组与7～14岁组PT结果差异无统计学意义(P>0.05),其余各组间结果差异均有统计学意义(P=0.000)。结论 通过回顾性资料分析,建立了基于STA-Compact检测系统的新生儿和儿童的APTT和PT参考区间。

急性脑梗死患者阿司匹林抵抗危险因素分析

邓琳,邱丽君,顾青,王根发

2013, 28(9):  765-769.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.008

摘要 ( 393 )   HTML   PDF (820KB) ( 606 )  

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目的 探讨急性脑梗死患者阿司匹林抵抗(AR)现象及其影响因素。方法 收集330例急性脑梗死患者,根据血栓弹力图测定花生四烯酸(AA)诱导途径的血小板抑制率。血小板抑制率≤20%即判定为AR,抑制率在20%～50%之间则判定为阿司匹林半抵抗(ASR),抑制率>50%即为阿司匹林敏感(AS)。根据上述标准将患者进行分组,研究AR的发生率,并分析各组间各项临床特征的差异,采用Logistic回归分析影响AR与ASR的危险因素。结果 330例急性脑梗死患者中AR发生率为33.9％,ASR发生率为19.7％。与AS组相比,AR+ASR组中高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平明显升高(P<0.05)。≥65岁患者中,高风险患者AR+ASR发生率显著升高(P<0.05)。Logistic回归分析表明血小板计数[OR=0.996,95％可信区间(CI):0.991～0.999,P=0.041]和hs-CRP(OR=0.972,95％CI:0.959～0.996,P=0.014)是发生AR与ASR的危险因素。结论 急性脑梗死患者AR的发生率较可能与血小板数量和患者炎症状态有关。

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa基因多态性与血小板输注疗效的关系

顾萍,王静,张帆,姚如恩,傅启华

2013, 28(9):  770-774.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.009

摘要 ( 363 )   HTML   PDF (891KB) ( 487 )  

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目的 通过对98例患者血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa基因多态性及血小板抗体的检测,探讨其与血小板输注疗效的关系。方法 采用聚合酶链反应(PCR)扩增结合测序的方法检测患者GPⅡb/Ⅲa基因中5个外显子的9个多态性位点,采用固相凝集法检测患者血小板抗体。 结果 98例患者中只检测到GP Ⅱb基因的第26外显子存在T18809G变异,导致Ile843Ser多态性,产生HPA-3aa/ab/bb血型的3种基因型。此3种基因型均与血小板抗体产生相关,造成血小板输注无效。98例患者的血小板抗体阳性率为52.0%,1 468袋血小板输注总有效率为77.8%,其中 65袋配合性血小板输注的有效率为83.1%。3种基因型之间均无明显差异。结论 血小板特异性及相关性抗体的存在是造成血小板输注无效的主要免疫性因素,GP Ⅱb基因上的HPA-3多态性与血小板输注无效有关。

16S rRNA甲基化酶基因在产ESBLs肠杆菌科细菌中的分布

高辉,王杨,黄云昆,朱雯梅,王佳,姚瑶

2013, 28(9):  775-779.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.010

摘要 ( 452 )   HTML   PDF (1810KB) ( 608 )  

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目的 了解临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的革兰阴性肠杆菌科细菌中16S rRNA甲基化酶基因的分布情况。方法 对临床分离的70株革兰阴性肠杆菌科细菌用VITEK-32型全自动微生物分析系统进行细菌鉴定,用纸片扩散法检测ESBLs,并用聚合酶链反应(PCR)检测armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD和npmA 6种16S rRNA甲基化酶基因,对检测的阳性产物进行测序,并通过GenBank比对DNA序列。结果 70株产ESBLs革兰阴性肠杆菌中,9株16S rRNA甲基化酶基因阳性,其中5株检出armA基因,4株检出rmtB基因,2株同时检出armA和rmtB基因,rmtA、rmtC、rmtD、npmA 4种基因扩增均为阴性。结论 不同地区医院16S rRNA甲基化酶基因的分布情况各不相同。

耐氟康唑光滑念珠菌耐药机制研究

张炜,应春妹

2013, 28(9):  780-783.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.011

摘要 ( 322 )   HTML   PDF (799KB) ( 550 )  

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目的 探讨ERG11、CDR1和CDR2基因差异表达在耐氟康唑光滑念珠菌耐药性形成中的作用。 方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(PCR)对临床分离的耐氟康唑药物株、剂量依赖性敏感株和敏感株共22株光滑念珠菌的ERG11、CDR1和CDR2基因表达的mRNA进行相对定量,以2^-△△Ct表示试验组目的基因的表达相对于对照组的变化倍数。所有数据采用R(2.15.2)软件进行统计学分析。结果 耐药株及剂量依赖性敏感株CDR1、CDR2以及ERG11基因的mRNA表达量均高于敏感株(P<0.05),且随着对氟康唑耐药程度增加而增加。结论 CDR1、CDR2及ERG11基因表达上调是光滑念珠菌临床分离株对氟康唑耐药的主要分子机制。

多重耐药菌医院感染状况分析

李继霞,公衍文

2013, 28(9):  784-788.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.012

摘要 ( 334 )   HTML   PDF (782KB) ( 740 )  

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目的 了解多重耐药菌的临床分布,为减少临床多重耐药菌的发生提供依据。方法 分离济南军区总医院2006年1月至2011年12月住院患者送检的各类标本,经VITEK-32或VITEK-2 COMPACT 60(2007年11月以后)微生物鉴定系统鉴定并用纸片扩散法进行药物敏感性试验,数据采用WHO-NET 5.4软件统计分析。结果 2006年1月至2011年12月多重耐药菌医院感染呈逐年递增趋势, 产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌感染率最高,泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-AB)和广泛耐药铜绿假单胞菌(XDR-PA)感染率上升明显;多重耐药菌主要分布在保健科、神经外科、重症医学科、普外科、血液科等患有基础疾病并长期使用抗菌药物的老年患者、重大外科手术等危重症患者,以及免疫能力低下或免疫抑制的患者;仍以呼吸道感染最多见。结论 多重耐药菌医院感染逐年增多,应加强耐药监测,建立适合我国具体情况的感染控制措施,减低医院感染率。

载脂蛋白E基因三种分型检测方法临床效能对比评价

熊燏,钱士匀

2013, 28(9):  789-792.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.013

摘要 ( 344 )   HTML   PDF (852KB) ( 604 )  

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目的 对3种载脂蛋白E(apo E)基因型分析的方法:多重特异性扩增突变系统快速分型法(Multi-ARMS PCR)、聚合酶链反应-限制性核酸内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)、聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)进行评价,试图对apo E基因分型的方法进行对比评价。方法 对518名健康调查者分别采用Multi-ARMS PCR、PCR-RFLP、PCR-SSCP等方法进行apo E基因型的分析,并最后对所有标本采用核酸测序的方法进行分型确证。结果 在核酸序列分析结果一致性比较上,3种apo E基因分型的方法有所不同(Multi-ARMS PCR Kappa值为0.964、PCR-RFLP为0.991、PCR-SSCP为0.913;Kappa越接近1,提示一致性越好)。结论 PCR-RFLP在3种apo E基因型分析方法中最可靠。

血清GPDA在上消化道出血中的变化分析

张桂,汤泽生,赖宝艺,石庆新

2013, 28(9):  793-795.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.014

摘要 ( 238 )   HTML   PDF (683KB) ( 421 )  

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目的 探讨血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)与上消化道出血(UGIB)的关系。方法 测定33例UGIB患者(UGIB 组)和33例健康体检者(正常对照组)血清GPDA和血尿素(Urea)浓度,UGIB 组按性别和年龄(＜60岁、≥60岁)分别分组并进行统计学分析。结果 UGIB组和正常对照组血清GPDA及Urea浓度差异有统计学意义(P=0.000)。UGIB组血清GPDA和Urea浓度不同年龄之间差异有统计学意义(P<0.01),但不同性别之间差异无统计学意义 (P>0.05)。UGIB组GPDA和Urea呈明显负相关[相关系数(r)＝－0.585,P<0.01]。受试者工作特征(ROC)曲线显示GPDA和Urea的曲线下面积(AUC)分别为0.893和0.769。当GPDA和Urea的Cut-off值分别为69.20 U/L、8.25 mmol/L时,其灵敏度分别为97.0%、63.6%,特异性分别为69.7%、97.0%。结论 血清GPDA在UGIB时明显降低,可能在其病程中有重要作用。

阜阳市2011年手足口病实验室检测结果分析

高勇,韩明锋,李秀勇,陈晓枫,唐振华

2013, 28(9):  796-800.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.015

摘要 ( 206 )   HTML   PDF (726KB) ( 516 )  

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目的 对手足口病患儿的实验室检测结果进行分析,了解阜阳市手足口病患儿肠道病毒的感染状况及实验室常规检验项目的检测结果,为临床诊断治疗及预防控制提供参考。方法 收集497例(重症型102例、普通型395例)手足口病住院患儿的咽试子和疱疹液样本,应用实时荧光聚合酶链反应 (RT-PCR)法检测肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)以及柯萨奇病毒A组16型(CA16) 特异性RNA。同时检测白细胞(WBC)、C反应蛋白(CRP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB) 、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)及血糖(Glu)并进行分析。 结果 497例手足口病患儿中EV、EV71、CA16感染的阳性例数(阳性率)分别为339例(68.21%)、286例(57.55%)、22例(4.43%)。102例重症手足口病患儿中EV71阳性率最高[95例(93.14%)];男、女性患儿间EV、EV71、CA16阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。3岁以下患儿为高风险年龄组,497例手足口病患儿中有398例(80.08%)≤3岁。102例重症型患儿有96例(94.12%)≤3岁;其中EV71阳性率最高,为94.79%(91/96)。重症手足口病患儿中WBC增高80例(78.43%)、CRP增高81例(79.41%)、Glu增高52例(50.98%)、AST增高64例(62.75%);普通型患儿WBC增高70例(17.72%)、CRP增高87例(22.03%)、Glu增高26例(6.58%)、AST增高78例(19.75%);重症型阳性率明显高于普通型(P<0.01)。CK-MB、LDH水平在手足口病普通型及重症型患儿中均增高,且阳性率明显高于其他常规检验项目。结论 手足口病患儿感染的肠道病毒主要为EV71病毒,而且是引起重症型病例的主要病原体,3岁以下婴幼儿应加强监测。对重症型病例应做到早期识别,减少重症和死亡的发生。

广州市番禺区儿童全血5种微量元素检测结果分析

肖钘,何金花,黎毓光,高慧,胡淑芬

2013, 28(9):  801-804.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.016

摘要 ( 365 )   HTML   PDF (687KB) ( 592 )  

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目的　探讨广州市番禺地区儿童铜、钙、镁、锌、铁5种微量元素的分布和变化规律，为番禺地区儿童微量元素的合理补充和研究分析提供参考依据。方法　使用原子吸收光谱仪对3 476名儿童全血铜、钙、镁、锌、铁5种微量元素进行检测。将受检儿童按年龄分为5组：婴儿组（1～12个月，743例）、幼儿组（＞1～2岁，916例）、学龄前组（3～6岁，988例）、学龄期组（7～11岁，579例）、青春发育期组（12～18岁，250例）。每组按性别分成男、女2组。对不同性别、不同年龄段儿童５种微量元素含量进行分析。结果　铜和镁2种微量元素的异常率较低，总缺乏率分别为1.5%和0.26%，总超标率分别为0.08%和0.06%；锌、铁2种微量元素的缺乏比较常见，总缺乏率分别为21.0%和19.7%；随着年龄的增长其缺乏率呈明显下降趋势；锌和铁的超标率分别为1.8%和0%；钙的总缺乏率为6.7%，随着年龄的增长其缺乏率呈明显上升趋势，其总超标率为1.9%；镁、铁含量在学龄前期和青春发育期不同性别间的差异有统计学意义（t值分别为2.563、2.172、2.822、4.537，P值均＜0.01），其他元素含量在相同年龄段不同性别间差异均无统计学意义（P均＞0.05）；锌和铁含量随年龄的增长呈上升趋势，而铜和钙含量呈下降趋势，镁的含量比较稳定。结论　广州市番禺地区儿童全血锌、铁、钙的异常率较高，铜和镁的分布趋于合理，应加强对合理补充锌、铁、钙的保健指导和研究探讨。

2型糖尿病患者铁蛋白浓度与胰岛素抵抗的相关性研究

须静,胡晓波

2013, 28(9):  805-808.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.017

摘要 ( 174 )   HTML   PDF (693KB) ( 606 )  

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目的 探讨不同年龄汉族人群中血清铁蛋白(SF)和2型糖尿病(T2DM)的关系。方法 分别对100例T2DM患者(T2DM组)、100例高铁蛋白非T2DM患者(高SF组)及100名健康体检人群(正常对照组)进行空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、SF和糖化血红蛋白(HbA_1c)及血细胞参数[血红蛋白(Hb)、血细胞压积(Hct)、红细胞平均体积(MCV)和红细胞平均血红蛋白量(MCH)]检测,并对结果进行相关分析。结果 T2DM组SF、FBG、HbA_1c、FINS、稳态模型评估胰岛素抵抗(HOMR-IR)水平明显高于正常对照组(P<0.05),SF与FBG、HbA_1c、FINS、HOMR-IR呈明显正相关(r值分别为0.140、0.171、0.189、0.316,P值分别为0.003、0.023、0.004、0.001)。 T2DM组Hb、FBG、HbA_1C、FINS、HOMA-IR 明显高于高SF组(P<0.05),高SF组SF、MCV明显高于正常对照组(P<0.05)。结论 T2DM患者可能存在铁超负荷,导致SF水平升高,且与胰岛素抵抗有一定的相关性。

血清MMP-13及TGF-β1检测在慢性肝病中的临床价值

范永熙,万芙荣

2013, 28(9):  809-810.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.018

摘要 ( 245 )   HTML   PDF (672KB) ( 476 )  

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目的 探讨各类慢性肝病患者血清基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及转化生长因子-β1(TGF-β1)水平的变化及其临床价值。方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测50例慢性肝炎患者、50例肝硬化患者、60例肝癌患者及50名健康体检者(正常对照组)血清MMP-13和TGF-β1水平。结果 慢性肝炎组、肝硬化组、肝癌组及正常对照组MMP-13水平分别为287.05±29.80、328.04±62.03、329.02±70.04、(279.03±32.80)ng/L;TGF-β1水平分别为0.99±0.11、0.96±0.12、2.22±1.08、(0.65±0.09)μg/L;慢性肝炎组、肝硬化组、肝癌组血清MMP-13及TGF-β1水平均高于正常对照组。肝癌组及肝硬化组血清MMP-13水平明显高于慢性肝炎组(P<0.01)。肝癌组血清TGF-β1水平明显高于肝硬化组和慢性肝炎组(P<0.01);而慢性肝炎组、肝硬化组和正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 慢性肝病发展过程中MMP-13及TGF-β1有过度表达,动态分析其水平对慢性肝病的辅助诊断和病情监测有一定意义。

慢性乙型肝炎患者外周血CD4⁺CD25⁺ Foxp3⁺调节性T细胞变化水平及其与抗病毒疗效的关系

卿克勤,杨朝国,刘蓉

2013, 28(9):  811-814.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.019

摘要 ( 169 )   HTML   PDF (696KB) ( 651 )  

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目的 了解慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺调节性T细胞(Treg)水平及其在乙型肝炎病毒(HBV)感染中的作用。方法 采用流式细胞仪检测86例CHB患者、30名急性乙型肝炎(AHB)患者和30例健康体检者外周血CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg频率,分析HBV DNA载量与CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg频率的关系及治疗后不同疗效的CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg频率,并对轻度、中度和重度CHB患者的CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg频率进行比较。结果 CHB组外周血CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg占CD4^＋T细胞的百分比为2.56%±1.12%,明显高于AHB组(1.39%±0.68%)和正常对照组(1.45%±0.76%)(P＜0.05),而AHB组与正常对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05)。轻度、中度和重度活动性CHB各组之间外周血CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg频率差异均无统计学意义(P＞0.05)。CHB组、AHB组外周血ALT水平分别为285.6±168.3、(780.9±432.6)U/L,均明显高于正常对照组[(23.2±6.7)U/L](P＜0.05),CHB组低于AHB组(P＜0.05)。CHB患者外周血CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg频率与ALT水平无相关性(r＝0.11,P＞0.05)。CHB组、AHB组和正常对照组外周血HBV DNA分别为(5.2±1.8)log₁₀拷贝/mL、(7.2±1.8)log₁₀拷贝/mL和阴性,AHB组明显高于CHB组(P＜0.05)。CHB患者外周血CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg频率与HBV DNA的对数呈正相关(r＝0.30,P＜0.05)。经抗病毒治疗后,疗效明显的CHB患者外周血CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg频率下降,明显低于疗效不明显组(P＜0.05)。结论 CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg升高可能是HBV感染慢性化的重要因素之一,调节CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg的数量和功能可能为治疗CHB提供一个新途径。

HBV前C区1896突变株感染慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的分析及意义

毛会军,邱建萍,林锋,王刚,张敏,陈戴红

2013, 28(9):  815-819.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.020

摘要 ( 251 )   HTML   PDF (705KB) ( 626 )  

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目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区1896变异与感染宿主外周血T淋巴细胞亚群之间的关系。方法 将196例乙型肝炎患者分为慢性乙型肝炎(CHB)组(146例)和乙型肝炎肝硬化(LC)组(50例),前者又分为含野生株CHB组(CHBⅠ组,80例)和前C区1896变异株CHB组(CHBⅡ组,66例);后者又分为含野生株LC组(LCⅠ组,19例)和前C区1896变异株LC组(LCⅡ组,31例)。采用特异性引物聚合酶链反应(PCR)检测196例乙型肝炎患者HBV前C区1896变异,并用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群的变化。以20名健康献血者作为正常对照组。结果 196例乙型肝炎患者中HBV 前C区1896变异检出率为49.5%;LC组中HBV前C区1896变异检出率为62.0%,高于CHB组(45.2%)。CHB 组CD4⁺T细胞绝对数明显低于正常对照组(P<0.01);LC组CD3⁺T细胞绝对数及百分率、CD8⁺T细胞绝对数、CD4⁺T细胞绝对数及百分率均明显低于正常对照组(P<0.01)。CHBⅡ组CD3⁺T细胞绝对数、CD4⁺T细胞绝对数均明显低于CHBⅠ组(P<0.05)。LCⅡ组CD3⁺T细胞绝对数、CD4⁺T细胞绝对数均明显低于CHBⅡ组(P<0.01)。结论 HBV前C区1896突变株感染的CHB患者较CHB野生株感染患者存在更为严重的T淋巴细胞亚群失衡,这种紊乱可能参与了HBV DNA前C区1896突变株感染导致的乙型肝炎慢性化过程。

技术研究与评价.论著

高压液相色谱检测糖尿病患者尿白蛋白的应用

史梅,史伟峰,李燕梅

2013, 28(9):  820-823.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.021

摘要 ( 222 )   HTML   PDF (752KB) ( 536 )  

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目的 探讨高效液相色谱法(HPLC)测定糖尿病(DM)患者尿白蛋白的应用。方法 收集85例DM患者及40名健康体检者(正常对照组)尿液,分别用HPLC和免疫比浊法检测尿白蛋白,并将检测结果使用回归和Bland-Altman进行一致性分析。结果 HPLC线性方程为Y=2.948 2X+38.601,r²=0.994 4;标准品和样本的保留时间(RT) 均为2.42 min;尿白蛋白浓度为40.1和152.6 mg/L的样本其批内和批间变异系数(CV)分别为4.1%、4.8%和5.6%、6.5%;最低检测限为2 mg/L。DM组尿白蛋白HPLC结果为21.0(3.4～678.9)mg/L,高于免疫比浊法[8.2(2.0～442.2)mg/L](P<0.01),但偏高的倍数不一致(1.3～6.1倍);但正常对照组2种方法测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。将2种方法的测定结果用回归分析和Bland-Altman进行一致性分析,显示2种方法的一致性较差。85例DM患者中用HPLC和免疫比浊法检测达到微量蛋白尿诊断标准[尿白蛋白排泄率(AER)＞30 mg/24 h]的阳性例数分别为48例(56.5%)和27例(31.8%)。结论 HPLC能检测尿中的包括免疫性和非免疫性的总的尿白蛋白,与免疫比浊法相比更能早期检出尿白蛋白。

聚乙二醇沉淀法与凝胶色谱层析法检测巨泌乳素的相关性研究

王霞,刘金玲,高硕

2013, 28(9):  824-827.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.022

摘要 ( 214 )   HTML   PDF (693KB) ( 605 )  

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目的 探讨聚乙二醇(PEG)沉淀法检测巨泌乳素(MPRL)方法的可行性。方法 将26例高泌乳素血症(HPRL)患者按临床表现和影像学资料分为真性HPRL组(简称真泌组)11例及MPRL血症组(简称巨泌组)15例。采用凝胶色谱层析(GFC)法分离泌乳素(PRL)各组分,检测各组分PRL浓度,同时将所有标本进行PEG沉淀,检测处理后单体PRL浓度,并与GFC法单体PRL检测结果进行相关性分析。结果 巨泌组与真泌组的PRL层析谱不同,真泌组以单体PRL为主,而巨泌组以巨PRL为主。真泌组与巨泌组血清处理前总PRL浓度差异无统计学意义(P>0.05),而处理后真泌组明显高于巨泌组(P<0.05)。PEG沉淀法与GFC法检测真泌组与巨泌组单体PRL浓度差异无统计学意义(P>0.05),且相关性良好[相关系数(r)＝0.844,P<0.05]。结论 PEG沉淀法检测MPRL结果与GFC法有良好的相关性,且经济、简便、易行,可作为临床常规筛查方法。

两种方法检测HBsAg定量结果的临床互认研究

盛欢,胡晓波,许洁

2013, 28(9):  828-834.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.023

摘要 ( 256 )   HTML   PDF (843KB) ( 663 )  

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目的 评估罗氏和雅培公司乙型肝炎表面抗原(HBsAg)定量检测临床应用可行性。方法 收集423例血清和血浆标本,用雅培公司ARCHITECT HBsAg试剂和罗氏公司HBsAg quantitative Elecsys试剂进行比较检测,采用统计学方法分析两者之间的关系,并对2种试剂进行性能评估。结果 定量试剂的分析内和分析间变异系数(CV)较小。同一患者血清和血浆HBsAg结果相关性较好(r＝0.988,P<0.05),罗氏与雅培试剂在检测HBsAg结果的相关性较好(r=0.965,P<0.05)。2种试剂对脂血、黄疸、溶血等可疑干扰物抗干扰能力相同。2种试剂的检测限均为0.05 IU/mL。2种试剂通过稀释,都可报告常见的高值HBsAg检测结果。2种试剂回收率性能一致。结论 2种HBsAg定量检测试剂在检测结果方面符合性较高,具有良好的相关性,其HBsAg检测结果可以互认。

斑点免疫金渗滤法定量测定血清淀粉样蛋白A方法的建立及性能评估

陈长强,杨晶,顾志冬,万颖蕾,毛客自,冯晓静,徐建新,樊绮诗

2013, 28(9):  835-840.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.024

摘要 ( 252 )   HTML   PDF (847KB) ( 634 )  

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目的 建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)定量测定血清淀粉样蛋白A(SAA)并评估其分析性能。方法 选用2株商品化抗SAA单克隆抗体,分别结合于硝酸纤维素膜和胶体金,制备免疫金渗滤试剂板条(SAA-DOT)以定量检测SAA。按照EP文件,评估SAA-DOT的分析性能(检测限、精密度、准确性、线性范围等)。结果 SAA-DOT最低检测限为5 mg/L;10和100 mg/L的批内变异系数(CV)分别为9.07%和10.21%,天间CV分别为11.33%和11.53%;线性范围为5～230 mg/L;SAA-DOT的测定结果与商品化乳胶增强速率散射比浊法(LERN)试剂具有良好的相关性(r=0.995,P<0.05)。表观健康者血清SAA浓度中位数为5.7 mg/L,95%可信区间为0~9.6 mg/L。结论 基于DIGFA的SAA-DOT简便、快速,能在5 min内完成检测,各项分析性能指标达到国家食品药品监督管理局(SFDA)对体外诊断试剂的要求,可用于临床患者血清标本的检测。

基础研究.论著

血管活性肠肽对缺血再灌注损伤大鼠脑内GFAP的影响

刘旭

2013, 28(9):  841-844.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.025

摘要 ( 178 )   HTML   PDF (736KB) ( 496 )  

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目的 通过活体实验研究血管活性肠肽(VIP)对脑缺血再灌注后胶质纤维酸性蛋白(GFAP)动态变化的影响及星型胶质细胞活化增殖的情况,探讨VIP的神经保护作用。方法 大鼠注射VIP后,用线栓法制作大鼠大脑中动脉再灌注(MCAO)模型。通过神经学评价对MCAO大鼠进行判定和筛选;应用免疫组化技术检测脑缺血区GFAP表达。结果 VIP注射后与对照组相比GFAP表达显著增加(P<0.05),在相同缺血区的星形胶质细胞反应上调增强。结论 VIP脑内注射可明显增强GFAP的表达,降低再灌注损伤程度;提示VIP可能具有体外神经保护作用。

Apollon反义核酸促进肝癌HepG₂细胞凋亡机制的探讨

黎毓光,何金花,王莉,谢杏仪,陈顺仪,陈武嘉,黄国贤

2013, 28(9):  845-850.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.027

摘要 ( 229 )   HTML   PDF (1552KB) ( 600 )  

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目的 研究凋亡抑制蛋白(IAP)家族成员Apollon 反义核酸(ASO)对人肝癌HepG₂细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法 将化学合成的Apollon ASO经脂质体包裹后作用于肝癌HepG₂细胞48 h,采用WST-8法检测不同浓度的Apollon ASO对肝癌细胞增殖抑制作用,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(PCR)检测细胞Apollon mRNA 的表达水平; 流式细胞术检测细胞早期凋亡率; Hochest33258染色观察HepG₂细胞凋亡形态;线粒体膜电位检测细胞凋亡;比色法测定半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3、Caspase-9)活性的改变;蛋白质免疫印记技术检测细胞色素C蛋白的表达水平。结果 Apollon ASO转染HepG₂细胞48 h能明显抑制细胞增殖,并呈浓度依赖关系。Apollon ASO 能促进HepG₂细胞凋亡。不同浓度的Apollon ASO能显著下调Apollon mRNA的表达水平,同时Caspase-3、Caspase-9的活性明显增加,细胞色素C蛋白表达水平也增加。经荧光显微镜观察,ASO 组可见核高强度荧光的细胞,并见凋亡小体。结论 Apollon ASO可下调 Apollon mRNA表达水平,抑制HepG₂细胞增殖,其诱导细胞早期凋亡可能通过线粒体介导的途径。

临床应用研究.论著

西宁市健康成人部分血清特定蛋白项目参考区间调查

王立萍,阿祥仁,李晓娜,彭海

2013, 28(9):  851-853.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.028

摘要 ( 182 )   HTML   PDF (670KB) ( 448 )  

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目的 探讨西宁市健康成人血清特定蛋白参数参考区间。方法 在中度高原地区西宁市(海拔2 260 m)选择体检合格的716名成年人。采用美国贝克曼IMMAGE 800特定蛋白分析系统及配套试剂进行血清特定蛋白9项指标含量检测。结果 西宁市血清特定蛋白9项参数参考区间分别为免疫球蛋白G(IgG):7.92～17.09 g/L、免疫球蛋白A(IgA):0.70～3.85 g/L、免疫球蛋白M(IgM):0.41～2.60 g/L、补体C3:0.67～1.42 g/L、补体C4:0.10～0.35 g/L、抗链球菌溶血素(ASO):0～100.9 KIU/L、类风湿因子(RF):0～23.7 KIU/L、C反应蛋白(CRP):0～8.0 mg/L、触珠蛋白(HPT):0.12～1.89 g/L。结论 西宁市健康成年人IgG、RF参考区间较全国临床检验操作规程和厂商提供的参考区间偏高,而IgM、C3、C4、HPT的参考区间偏低;且西宁市成年人IgG、IgA、IgM、C3、C4、ASO、RF、CRP及 HPT无明显的性别及年龄差异。

实验室管理.论著

一种新的室间质量评价靶值的建立与不确定度的稳健统计方法

康凤凤,王治国

2013, 28(9):  854-855.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.029

摘要 ( 286 )   HTML   PDF (670KB) ( 661 )  

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室间质量评价(external quality assessment,EQA)是一种很重要的实验室质量控制方法,其结果可以以多种形式出现,并构成各种统计分布。数据分析的统计方法应与数据类型及其统计分布特性相适应。对参加者的结果评价一般包括4方面内容:确定靶值(或指定值)、计算能力统计量、评价能力、在某些情况下需预先确定被测量样品的均匀性和稳定性。室间质量评价的靶值确定方法有多种,按不确定度增加的顺序包括^[1]:(1)已知值,其结果由特定样品配制(制备、稀释等)时确定;(2)有证参考值,由定义法确定;(3)参考值,与一个可追溯到国家或国际标准的参考标准物质/标准样品或标准进行分析、测量或比对监测物品所确定的值;(4)由各专家实验室获得的公议值;(5)从参加实验室获得的公议值。目前卫生部临床检验中心组织的全国临床实验室室间质量评价计划采用将参加者的公议值作为分析物的靶值,评价参加者的检测能力。该方法要求将极端结果的影响降至最低,可通过在计算之前剔除离群值或稳健统计方法实现^[2]。

综述与讲座

细菌中LuxS/AI-2密度感应系统分子机制研究进展

杨瑞宁,操敏,李先富,牛雷

2013, 28(9):  856-861.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.029

摘要 ( 126 )   HTML   PDF (804KB) ( 642 )  

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近年来的研究证明,细菌之间存在信息交流,许多细菌都能合成并释放一种称为自诱导物质(autoinducer,AI)的信号分子。胞外的AI浓度能随细菌密度的增加而增加。当达到临界浓度时,AI能结合并激活细胞内受体, 启动菌体中相关基因的表达,从而调控细菌的生理行为,产生毒力因子等,使细胞的活动具有组织性,成为类似于多细胞生物的群体性活动。由于这一现象是细菌密度依赖的方式,因此称为密度感应(quorum sensing,QS)。

经验交流

碳青霉稀类耐药肺炎克雷伯菌耐药机制和多位点序列分型研究

彭乃杰,林哈妮,夏菲,李克诚,张青,葛少红

2013, 28(9):  862-863.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.030

摘要 ( 210 )   HTML   PDF (738KB) ( 728 )  

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碳青霉烯类抗菌药物被认为是为数不多的可有效治疗高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)多重耐药菌引起的严重感染的药物之一。然而,随着碳青霉烯类药物在临床中的大量、广泛应用,碳青酶烯类耐药的肠杆菌科细菌不断增加。其机制主要是细菌产生的碳青霉烯酶能够水解碳青霉稀类抗生素。肺炎克雷伯菌产生碳青霉烯酶主要为产KPC酶。KPC是一种质粒介导的Ambler分类B类酶,能水解几乎所有的β-内酰胺酶和碳青霉稀类抗菌药物。

B型钠尿肽对妇产科输血过程中呼吸困难的鉴别作用

吴梅芳

2013, 28(9):  864-864.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.031

摘要 ( 174 )   HTML   PDF (664KB) ( 340 )  

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输血是妇产科常有的有效救治手段之一,输血过程中呼吸困难时有发生。由于心源性与非心源性呼吸困难治疗方式有明显差别,因此对两者及时、准确的做出鉴别诊断尤为重要。本研究通过分析妇产科输血过程中急性呼吸困难患者B型钠尿肽(BNP)水平,对输血过程中急性呼吸困难进行鉴别。

高原地区先天性心脏病患儿血浆BNP检测的临床意义

王红练, 阿祥仁

2013, 28(9):  865-866.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.09.032

摘要 ( 198 )   HTML   PDF (663KB) ( 450 )  

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