检验医学

耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

何力志，黄露萍，李志芳，彭爱红

2013, 28(5): 353-356. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.001

摘要 ( 508 )

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目的　对耐亚胺培南铜绿假单胞菌(PA)进行金属β-内酰胺酶(MBL)的检测及药物敏感性分析，为控制院内PA感染提供依据。方法　收集临床分离的PA 460株，筛选亚胺培南耐药株；采用组合纸片法对亚胺培南耐药菌株进行MBL表型检测，用聚合酶链反应（PCR）检测MBL 基因型别，并对PCR扩增阳性株进行测序；比较分析产与不产MBL的耐亚胺培南PA耐药谱差异，并对MBL不同基因型别菌株的耐药特征进行分析。结果　460株PA中共检出28株MBL表型阳性PA，其中IMP-1型阳性19株、VIM-2 型阳性2株。随机选取 1 例 IMP-1型和 VIM-2型扩增阳性的菌株进行测序，结果与GenBank 注册号AY1686359和AF191564 相同；产 MBL 株对美罗培南耐药率为95.2%，显著高于非产 MBL 株（73.7%，P＜0.05）。产 MBL 菌株对其他抗菌药物的耐药率均高于非产MBL 株，但差异无统计学意义(P＞0.05)；耐亚胺培南PA产MBL的基因型别不同，耐药性也不同。结论　本研究分离的产MBL PA以 IMP-1 型为主，对临床常用的多种抗菌药物具有高度耐药性，应加强对产酶株的检测和监控，防止耐药性的传播和流行；同时，临床应加强病原学检测，尽可能根据药物敏感性结果选择药物，以达到最佳抗菌效果。

早期妊娠高血压综合征患者Cys C、NAG的变化

唐章平

2013, 28(5): 356-356. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.03.002

摘要 ( 287 )

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妊娠高血压综合征（简称妊高征）是危害母婴健康的一种妊娠期并发症，发病率约9.4%，多发生在妊娠20 周以后，病情复杂。基本病变是全身小动脉痉挛，病变可累及多个器官，严重时可导致心、肝、肾、脑等主要器官缺氧、水肿、坏死，其并发的肾功能衰竭是导致母婴死亡的重要原因。迄今为止仍未建立一套完整的检测方法来对妊高征患者的肾功能损伤进行早期诊断。因此，我们检测了妊高征患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）、微量白蛋白（mAlb）、肌酐（Cr）水平，探讨Cys C、尿NAG和尿mAlb/Cr比值在妊高征早期肾损伤中的变化。

65株临床分离MRSA的SCCmec基因分型及耐药性研究

王爱玲1，纪冰1，孙万菊2，孟玮1，安新业1，宿振国1，王连文1，张玉梅2

2013, 28(5): 357-361. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.003

摘要 ( 477 )

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目的　了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的葡萄球菌盒染色体(SCCmec)基因型分布特点及耐药状况。方法　多重聚合酶链反应(PCR)对MRSA进行SCCmec基因分型；普通PCR对MRSA进行4种耐药基因扩增；应用纸片扩散法测试MRSA对19种抗菌药物的敏感性。结果　SCCmec分型显示60株受试MRSA为SCCmec Ⅲ型菌株，4株为SCCmec Ⅳa型菌株，1株未分型。65株MRSA临床株对多种抗菌药物耐药，对氯霉素耐药率（4.62%）相对较低，对利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀、万古霉素、替考拉宁均敏感。4种耐药基因的阳性率分别为aac(6′)/aph(2′′) 93.85%、aph(3′)Ⅲ 52.31%、tetM 92.31%、ant(4′) 9.23%。结论　临床分离的MRSA SCCmec基因型以Ⅲ型为主，且具有多重耐药的特征，对氨基糖苷类、四环素类耐药基因有较高的携带率，多重PCR可以有效地用于大批量临床分离的MRSA SCCmec分型研究。

两种培养方法检测解脲脲原体及其菌落形态学的比较研究

周运恒1，马红霞2，曹广亚1，石晓星1，刘风华1

2013, 28(5): 362-365. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.004

摘要 ( 557 )

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摘要：目的　比较选择性固体培养基与液体培养基检测男女不同类型生殖泌尿道标本中解脲脲原体(Uu)结果的差异，并观察Uu在固体培养基上的菌落形态学特征。方法　1 698例生殖泌尿道标本被分别接种于固体培养基和液体培养基中，比较不同类型标本中Uu的阳性率、2种培养基的阳性率以及菌落形态学的差异。结果　女性宫颈分泌物标本中Uu阳性率（49.9%）显著性高于男性精液和尿道分泌物标本（39.6%、19.2%，P均＜0.05）；液体培养法与固体培养法相比，女性宫颈分泌物标本Uu阳性率差异有统计学意义（P＜0.05），而男性精液和尿道分泌物标本Uu阳性率之间差异无统计学意义（P＞0.05）；Uu菌落形态以海胆型为主(77.5%)，其次是油煎蛋样（13.8%），空泡型、微小型、棒状和混合型较少见。结论　女性宫颈分泌物标本中Uu阳性率最高，男性尿道分泌物标本Uu阳性率最低。对于女性宫颈分泌物标本，2种方法检测Uu的结果差异较大；对于男性尿道分泌物标本，2种方法检测结果一致性较好。Uu在菌落形态学方面存在多种异质性。

2型糖尿病患者高胰岛素血症变化的研究

李莎1，刘蕊2，吴谊青2，吴丽娜1

2013, 28(5): 366-369. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.005

摘要 ( 488 )

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摘要：目的　探讨2型糖尿病（T2DM）不同发展阶段高胰岛素血症（HINS）的变化情况。方法　分别检测38例T2DM前期、52例新确诊、92例有T2DM病史患者（按病程分为0.5～3年、4～7年和8～11年）及20名正常对照者糖化血红蛋白（HbA_1c）、血糖、胰岛素、C肽等指标，并采用从www.ocdem.ox.ac.uk下载的HOMA2计算器（V2.2）计算胰岛素抵抗指数（HOMA2-IR）和胰岛素分泌指数（HOMA2-%β）。结果　T2DM各组胰岛素分泌高峰出现在2 h，均呈现胰岛素分泌延迟现象；T2DM前期组和新确诊组口服葡糖糖耐量试验（OGTT） 2 h胰岛素均值高于HINS诊断标准，且HINS患者分别占各组的50.00%和48.10%；随着病程的增长，HINS患者在有0.5～3年、4～7年和8～11年T2DM病史的患者中分别占28.57%、13.89%和10.00%。结论　T2DM前期有相当一部分患者处于HINS状态；随着病程的增长，HINS患者逐渐减少，但仍有部分T2DM患者长期处于HINS状态。

肾病患者免疫球蛋白、补体、白蛋白、血脂与肾脏病理的关系

吴春林

2013, 28(5): 370-373. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.006

摘要 ( 554 )

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摘要：目的　探讨肾病患者血清免疫球蛋白（IgG、IgA）、补体（C3、C4）、白蛋白（Alb）、24 h尿蛋白定量、血脂[总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）]等与肾脏病理的关联性。方法　对251例肾病患者的血清IgG、IgA、C3、C4、肾小球系膜增生程度评分与Alb、24 h尿蛋白定量、TC、TG及IgG、IgA、C3免疫荧光强度评分进行相关性分析。肾病病理诊断包括IgA肾病（IgAN，106例）、膜性肾病（MN，19例）、局灶节段性肾小球硬化（FSGS，14例）、微小病变性肾病（MCD，7例）、狼疮性肾炎（LN，7例）、乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN，5例）、高血压肾损伤（8例）。测定各肾病组及健康对照组（56名）的IgG、IgA、C3、C4水平并做比较。结果　血清IgG、IgA与Alb及IgA、C3免疫荧光强度呈正相关（P＜0.05）；血清C3、C4与TC、TG呈正相关（P＜0.05），与IgG、IgA、C3免疫荧光强度呈负相关（P＜0.05）；肾小球系膜增生程度评分与血清IgA、TG及IgA、C3免疫荧光强度呈正相关（P＜0.05），与血清C3呈负相关（P＜0.05）。MCD组血清IgG水平最低，与IgAN组、FSGS组、LN组、HBV-GN组、高血压肾损伤组及健康对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.05），但与MN组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。IgAN组血清IgA水平最高，与MN组、FSGS组、MCD组及健康对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.05），但与LN组、HBV-GN组、高血压肾损伤组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。LN组血清C3、C4水平最低，与其余各组比较差异均有统计学意义（P＜0.01）。结论　免疫球蛋白、补体、尿蛋白、Alb、血脂对于肾脏疾病的诊断、治疗和预后评估具有重要指导意义。但其影响因素很多，不能仅凭某一种或几种指标的变化进行肾病的诊治，而应在参考有无影响因素的情况下，结合更多的临床指标和肾脏病理进行综合判断。

尿NGAL在顺铂化疗肿瘤患者肾小管损伤中的临床意义探讨

胡雷光1，朱立岳1，谢芳2，陈坚1，王昕蕾1

2013, 28(5): 374-378. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.007

摘要 ( 494 )

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目的　探讨尿中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）检测在肿瘤化疗患者肾小管损伤的临床应用价值。方法　选择58例接受顺铂（DDP）化疗的住院肿瘤患者（包括肺癌、乳腺癌、宫颈癌和腮腺癌等），收集其DDP化疗前24 h和/或DDP化疗后24 h的随机尿标本。化疗前收集57份样本并根据是否初次入院接受化疗分为已化疗组（32份）和未化疗组（25份）；化疗后收集54份标本，其中53份与化疗前的标本相配对。另选取51名体检正常者作为对照组。分别检测所有对象尿NGAL、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）、α1-微球蛋白（α1-MG）、微量白蛋白（mAlb）和肌酐（Cr）含量，测定结果以尿Cr（UCr）进行校正（即计算前4项指标与UCr的比值）。以NAG阳性作为肾小管损伤的判断指标，将全部观察对象分为有损伤和无损伤2组，运用受试者工作特征曲线(ROC)评价尿NGAL/UCr对肾小管损伤判断的准确性。结果　化疗前各组结果比较，除未化疗组NGAL/UCr和NAG/UCr高于对照组（P＜0.05）外，已化疗组、未化疗组和对照组的其余项目之间差异均无统计学意义（P＞0.05）。化疗前组NGAL/UCr、NAG/UCr、α1-MG/UCr[中位数(25%～75%)]分别为1.37(0.76～2.16)mg/mmol、1.30(0.76～2.56)U/mmol、0.21(0.04～0.74)mg/mmol，明显低于化疗后组[2.14(1.39～4.08) mg/mmol、2.58(1.75～4.02)U/mmol、1.00(0.30～1.91)mg/mmol]（P＜0.01），而mAlb/UCr化疗前、后差异无统计学意义（P＞0.05）。化疗前组NGAL/UCr异常率与NAG/UCr、α1-MG/UCr及3项指标联合检测的异常率比较差异均无统计学意义（P＞0.05）；化疗后组NGAL/UCr和3项指标联合检测的异常率明显高于NAG/UCr、α1-MG/UCr（P＜0.05）。NGAL/UCr的ROC曲线下面积（AUC）为0.770 1[95%可信区间：0.698 4～0.841 7]，诊断切割点为1.15 mg/mol（灵敏度为82.09%，特异性为61.05%）。结论　尿NGAL/UCr对DDP化疗患者肾小管损伤和功能减退的检出有一定的临床应用价值。对于药物性等肾毒性损伤，尿NGAL可以作为一种较为理想的生物标志物。

血浆同型半胱氨酸与B型钠尿肽联合检测在急性心肌梗死中的应用评价

刘晓峰，陈雪礼，涂艳

2013, 28(5): 379-381. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.008

摘要 ( 625 )

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目的　探讨血浆同型半胱氨酸（Hcy）和B型钠尿肽（BNP）联合检测在急性心肌梗死（AMI）中的应用。方法　选取150例AMI患者及135名健康体检者（正常对照组）。AMI患者分别于入院后和进行药物溶栓或经皮冠状动脉介入（PCI）治疗前、后检测其血浆BNP和Hcy水平。对住院和随访期间发生心血管事件的51例患者和未发生心血管事件的99例患者分别检测血浆BNP和Hcy水平并进行比较。结果　AMI组血浆BNP[（594.38±167.58）pg/mL]和Hcy[（37.6±11.44）μmol/L]水平明显高于正常对照组[（56.32±28.79）pg/mL、（7.62±3.18）μmol/L]（P＜0.05）。AMI患者经药物溶栓或PCI治疗后血浆BNP[（256.94±118.55）pg/mL或（78.03±11.24）pg/mL]和Hcy[（16.47±7.24）μmol/L或（10.33±6.09）μmol/L]水平明显低于药物溶栓前[（618.06±224.46）pg/mL、（39.66±9.54）μmol/L]或PCI治疗前[(494.37±183.63)pg/mL、（35.53±8.12）μmol/L]（P均＜0.05）。发生心血管事件组血浆BNP[（609.15±287.37）pg/mL]和Hcy[（39.5±12.61）μmol/L]水平明显高于未发生心血管事件组[（326.85±134.24）pg/mL、（14.56±7.12）μmol/L]（P＜0.05）。结论　血浆BNP和Hcy水平与AMI有一定的关系，可作为AMI的临床应用指标。

脱-γ-羧基凝血酶原对原发性肝癌的诊断价值探讨

钟志敏，王维，莫云丹，戴卉

2013, 28(5): 382-386. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.009

摘要 ( 456 )

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摘要：目的　探讨脱-γ-羧基凝血酶原（DCP）对原发性肝癌的诊断灵敏度、特异性的价值。方法　采用化学发光法检测116例原发性肝癌患者、57例继发性肝癌患者、52例消化系统肿瘤患者、50例慢性肝病患者、73例其他肝脏疾病患者及50名健康体检者（正常对照组）血清DCP、甲胎蛋白浓度，并绘制DCP的受试者工作特征（ROC）曲线，计算诊断原发性肝癌的最佳诊断值。结果　原发性肝癌组DCP浓度明显高于继发性肝癌组、消化系统肿瘤组、慢性肝病组、其他肝脏疾病组和正常对照组（P＜0.05），而正常对照组、慢性肝病组、消化系统肿瘤组、其他肝脏疾病组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。由ROC曲线得出DCP诊断原发性肝癌的最适合临界值为44.5 mAU/mL，此时的灵敏度为74.2%、特异度为88.6%。DCP和AFP联合诊断原发性肝癌时的特异性可高达96%以上，灵敏度也可提高至91%以上。DCP和AFP的相关性分析显示二者无相关性（r＝0.026，P=0.782）。结论　DCP对原发性肝癌具有较高的诊断价值，且能鉴别诊断原发性肝癌、继发性肝癌及其他良性肝脏疾病。DCP和AFP联合诊断可以提高对原发性肝癌的诊断效能。

肺癌患者中医证型与其组织类型、临床分期及肿瘤标志物的相关性分析

王蕾1，宁小晓1，李和根2，王绮华1，徐蔚杰2，周蕾2，许玲2

2013, 28(5): 387-390. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.010

摘要 ( 532 )

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目的　探讨不同中医证型肺癌患者的组织病理类型、临床分期与肿瘤标志物水平的关系。方法　对196例肺癌患者的中医证型与组织病理类型[非小细胞肺癌（鳞癌、腺癌、大细胞癌和混合细胞癌）和小细胞肺癌]、临床TNM分期及肿瘤标志物[包括细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）、胃泌素释放肽前体（ProGRP）和鳞状细胞癌相关抗原（SCC Ag）]结果进行相关性分析。结果　196例肺癌患者中肺脾气虚119例（60.71%）、气阴两虚76例（38.77%）、脾肾两虚1例（0.52%）。不同组织病理类型的肺癌患者其中医证型的分布无明显差异（P=0.325）；TNM分期Ⅰ～Ⅲ期肺癌患者中肺脾气虚证占多数，而Ⅳ期患者中气阴两虚证较多。气阴两虚证肺癌患者CYFRA21-1水平高于肺脾气虚证患者（P=0.017）；而CEA、CA125、ProGRP和SCC Ag水平两者之间无明显差异（P均＞0.05）。结论　肺癌以虚证为主，是因虚而致病；肺癌晚期患者以气阴两虚证多见，常预示肺癌病情出现变化、预后不佳；CYFRA21-1等肿瘤标志物可为中医辨证分型提供微观辩证依据。

胰岛素样生长因子1及其结合蛋白3对胃癌诊断的意义

彭冲，孙桂荣，张娜娜，高振亮，吕晓玉荣

2013, 28(5): 391-395. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.011

摘要 ( 395 )

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目的　评估血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)对胃癌及胃癌前病变的临床诊断价值。方法　采用化学发光法、酶联免疫吸附试验（ELISA）和电化学发光法对90例胃癌患者、40例胃良性疾病患者和50名健康体检者血清IGF-1、IGFBP-3、癌胚抗原（CEA）和糖类抗原199（CA199）水平进行检测。结果　胃癌组血清IGF-1水平明显高于胃良性疾病组和健康对照组(P＜0.05、P＜0.001），血清IGFBP-3水平明显低于胃良性疾病组和健康对照组(P＜0.001)；胃癌早期(Ⅰ~Ⅱ期)组血清IGF-1水平虽明显低于胃癌晚期(Ⅲ~Ⅳ期)组，但高于健康对照组；IGFBP-3水平虽高于胃癌晚期组，但也低于健康对照组。血清IGF-1与IGFBP-3呈明显负相关，直线相关方程为Y =-0.33X+116.65(r=-0.566，P＜0.01)；血清IGF-1、IGFBP-3与CEA、CA199均无相关性。以健康对照组为对照绘制受试者工作特征(ROC)曲线，IGF-1的ROC曲线下面积（AUC）明显高于CEA和CA199(P＜0.01、P＜0.05)，诊断胃癌的敏感性亦高于CEA和CA199(P＜0.05)。结论　IGF-1对胃癌的诊断价值优于CEA和CA199，且有助于胃癌分期的评估。

系统性红斑狼疮患者Th17和Th1细胞及其细胞因子水平的变化及临床意义

徐维家1，李志1，杨婷婷2 ，王波1

2013, 28(5): 396-399. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.012

摘要 ( 428 )

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目的　研究系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中辅助性T细胞17（Th17）和辅助性T细胞1（Th1）及其细胞因子白细胞介素17（IL-17）、白细胞介素23（IL-23）和干扰素-γ（IFN-γ）的表达情况及其临床意义。方法　将38例SLE患者根据SLE活动指数（SLEDAI）评分分为活动组（SLEDAI≥10分）20例和非活动组（SLEDAI＜10分）18例；采用流式细胞术检测38例SLE患者和20名健康对照者外周血中Th17和Th1细胞的比例；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中相关细胞因子IL-17、IL-23及IFN-γ的水平，并进行统计学分析。结果　SLE组外周血中Th17 细胞比例高于对照组（P＜0.05），且SLE活动组Th17细胞比例高于非活动组（P＜0.05）；而Th1细胞比例与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；SLE组血清IL-17、IL-23及IFN-γ水平明显高于对照组（P＜0.05）；Th17细胞比例及IL-17、IL-23水平与SLEDAI评分呈正相关（r值分别为0.537、0.428、0.525，P值＜0.05）。结论　SLE患者外周血中Th17细胞及血清IL-17、IL-23和IFN-γ水平明显升高，提示Th17与Th1细胞可能在 SLE发病机制中发挥重要作用。

早期类风湿性关节炎患者血清Ⅰ型胶原吡啶交联终肽、基质金属酶-3等指标的检测及意义

董奕裕1，张新根2，陆建良3，于国芳4，陆鑫丽1

2013, 28(5): 400-403. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.013

摘要 ( 587 )

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目的　探讨Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)、基质金属酶-3 (MMP-3) 、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)检测及类风湿性关节炎（RA）活动度在RA早期诊断中的意义。方法　应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测213例RA患者（早期RA组92例、中长期RA组121例）、43例非RA的其他免疫系统疾病患者和40名正常对照者血清ICTP、MMP-3及抗CCP抗体；同时采用免疫比浊法检测血清RF。结果　 ICTP、MMP-3、抗-CCP抗体、RF在早期RA诊断中的最佳临界值分别为3.21 μg/L、67.45 ng/mL、15.45 U/mL、12.35 U/mL，灵敏度分别为74.0%、63.4%、52.4%、55.3%，特异性为95.5%、81.8%、95.5%、90.9%。RA各组RF、抗CCP水平均高于对照组及非RA组(P＜0.01)，ICTP、MMP-3、RF在非RA组和正常对照组间差异有统计学意义（P＜0.01），ICTP在早期RA与非RA组间差异无统计学意义（P＞0.05）。X线分期中Ⅰ期患者的ICTP、MMP-3、抗CCP抗体及RF水平与Ⅱ、Ⅲ期、Ⅳ期患者比较差异均有统计学意义(P＜0.05、P＜0.01)。Ⅱ期患者ICTP、MMP-3及抗CCP抗体水平与Ⅲ、Ⅳ期比较差异均有统计学意义（P＜0.05、P＜0.01），而RF水平3组之间差异无统计学意义 (P＞0.05)。结论　同时检测ICTP、MMP-3、抗CCP抗体和RF能提高RA早期诊断的准确性，减少漏诊，动态联合检测可有效监测RA病情进展。

基因芯片和比例法药物敏感性试验检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性的比较研究

欧维正，骆科文，王燕，秦万，蒙俊，张廷梅

2013, 28(5): 404-407. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.014

摘要 ( 545 )

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目的　比较基因芯片和比例法药物敏感性试验在检测结核分枝杆菌（MTB）对利福平（RFP）和异烟肼（INH）耐药性中的应用，探讨快速诊断耐多药结核病（MDR-TB）的方法。方法　从改良罗氏培养基上分离的327株菌株，分别用基因芯片检测MTB对RFP和INH耐药相关的rpoB、katG和inhA基因上8个位点的基因突变，从而判断其耐药性；同时用比例法药物敏感性试验检测MTB对RFP和INH耐药性，比较2种方法的符合率。进一步从二者RFP或/和INH结果不符的标本中随机选出16株菌株做DNA序列测定，比较二者与DNA测序的符合率。结果　基因芯片和比例法药物敏感性试验检测MTB对RFP耐药性符合率为93.27%，对INH耐药性符合率为95.11%，RFP和INH的总符合率为90.52%；二者对MDR-TB的检出率分别为18.65%和18.96%。基因芯片与DNA测序比较，RFP耐药性符合率为81.25%，INH耐药性符合率为100.00%；比例法药物敏感性试验与DNA测序比较，RFP耐药性符合率为50.00%，INH耐药性符合率为37.50%。结论　基因芯片检测MTB对RFP和INH的耐药性较比例法药物敏感性试验有更高的敏感性和特异性，对MDR-TB的快速诊断具有重要临床价值。

两种检测系统测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的偏差评估

戴悦1，吴文清2

2013, 28(5): 408-411. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.015

摘要 ( 439 )

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目的　对液相透射比浊检测系统和颗粒增强散射比浊检测系统测定半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）结果偏差进行方法学比较及偏差评估。方法　按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP9-A2文件，以 40例血清标本分别在罗氏MODULAR P800全自动生化分析仪和西门子BN-II特定蛋白分析仪上进行双份重复测定。将测定数据结果进行离群点检查，线性回归分析，计算预期偏差及可信区间（CI）。结果　2种检测系统Cys C测定结果的相关回归方程为Y=1.216X-0.139，r 2=0.978。浓度为0.53、0.95 mg/L时，允许误差在预期偏差95%CI范围内；Cys C浓度为7.85 mg/L时，允许误差＜预期偏差95%CI下限。结论　2种检测系统的测定结果呈线性相关。在低浓度时，预计偏差可以接受。在高浓度时，测定结果不一致，预期偏差不可以接受。

光激化学发光系统测定孕妇促甲状腺激素的性能评价

钱俊1，胡德宇1，张向辉2，宋芳2，赵卫国2

2013, 28(5): 412-415. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.016

摘要 ( 414 )

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目的　比较光激化学发光（LiCA）系统和电化学发光（ECL）系统测定孕妇促甲状腺激素（TSH）的结果，评价国产LiCA TSH检测试剂盒的性能。方法　依据《体外诊断试剂临床研究指导原则》及美国国家临床生化学院(NACB)准则，采用LiCA和ECL 2种试剂盒分别测定孕妇TSH血清样本384份，对结果进行统计学分析；同时评估LiCA TSH检测试剂盒的分析敏感性、功能敏感性、批内精密度、线性、回收率和干扰。结果　2种试剂盒定量测定TSH结果高度相关，临床符合率差异无统计学意义（P＞0.05）；LiCA TSH检测试剂盒分析敏感性、功能敏感性分别为0.001 1和0.017 μIU/mL，高、低浓度质控品（QCH和QCL）批内精密度为1.42%和1.55%，回收率为97.01%和101.57%，线性分析显示Y＝24.58X－22.9（r=0.998，P＜0.05），250 mg/dL血红蛋白、500 mg/dL甘油三酯和10 mg/dL胆红素对检测结果无干扰。结论　LiCA与进口ECL系统定量测定孕妇TSH的性能无差异，适合临床应用。

CD64指数、WBC在小儿败血症早期诊断与预后判断中的应用价值

汪文娟1，王浩2，陈哲3

2013, 28(5): 416-419. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.017

摘要 ( 430 )

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摘要：目的　探讨外周血CD64指数、白细胞（WBC）计数在小儿败血症早期诊断、预后监测中的价值。方法　选取小儿败血症患儿57例、一般感染肺炎患儿65例、健康对照者36名，应用流式细胞术检测CD64指数，血液分析仪检测WBC。结果　CD64指数、WBC计数在败血症组、肺炎组和健康对照组之间差异有统计学意义(P＜0.01)；血培养阳性者CD64指数高于血培养阴性者(P＜0.05)；根据受试者工作特征(ROC)曲线，当CD64指数临界值取2.25时，敏感性为88%，特异性为85%；经治疗后CD64指数明显下降(P＜0.01)，但未降至正常水平，与对照组比较差异仍有统计学意义(P＜0.01)。结论　CD64指数具有最佳的临床诊断价值，可以指导临床早期诊断和鉴别诊断小儿败血症，并可作为预后判断的指标。

中老年表面健康人群血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的异常表达及临床意义

王斌 1，屈靖 2，范进东 3，黄勇进 1，罗晓荣 1

2013, 28(5): 419-419. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.03.018

摘要 ( 248 )

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随着社会老龄化的到来，如何提高老年人的生活质量，已经成为各级政府及各单位职工健康保障部门所关注的重要内容。由于老年人特有的生理特性及各种慢性疾病的影响，肾脏滤过功能也像机体的其他机能一样在逐渐减退。目前，临床通常以血清尿素（Urea）和肌酐（Cr）作为评价肾功能的实验室指标，但其敏感性和特异性均较低^[1]。近年来的研究^[2-3]表明，血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C，Cys C)在评价肾功能方面较Urea和Cr更好，是反映肾小球滤过率（GFR）较好的指标。为了解中老年健康人肾功能的变化，我们测定了中老年表面健康人群的血清Cys C浓度。

佛波酯诱导血小板黏附受体GPⅠbα酶切的机制研究

王志成1，罗梅宏1，谢如锋2，张晓峰1

2013, 28(5): 420-424. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.019

摘要 ( 465 )

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摘要：目的　佛波酯（PMA）能诱导血小板黏附受体GPⅠbα酶切，但分子机制未完全阐明。本研究主要探讨PMA诱导GPⅠbα酶切的分子机制。方法　取健康志愿者静脉血，分离得到洗涤血小板。将洗涤血小板分别与蛋白激酶C（PKC）抑制剂、活性氧（ROS）抑制剂、NAD(P)H氧化酶抑制剂、线粒体ROS拮抗剂或二甲基亚矾（DMSO）对照等预孵育，再与PMA孵育。流式细胞仪检测ROS浓度；Western blot检测GPⅠbα酶切产物；用非同位素标记法检测PKC活性。结果　 PKC抑制剂BIM和ROS抑制剂二硫苏糖醇（DTT）单独使用时，都能完全抑制PMA诱导的GPⅠbα酶切。PMA浓度依赖地诱导血小板ROS产生，PKC抑制剂和NAD(P)H氧化酶抑制剂都能抑制PMA诱导的ROS产生，而线粒体ROS拮抗剂没有抑制作用。BIM抑制PMA诱导的PKC活化，DTT则没有抑制作用。结论　PMA可能通过PMA-PKC-NAD(P)H氧化酶-ROS-ADAM17-GPⅠbα信号通路调节GPⅠbα酶切。

正常与乳腺肿瘤细胞表面黏附分子CD44活化状态差异分析

侯利丹，刘鹥雯，何怡青，杨翠霞，杜艳，高锋

2013, 28(5): 425-429. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.020

摘要 ( 467 )

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摘要：目的　检测黏附分子CD44在正常和乳腺肿瘤细胞表面的表达，并分析其活化状态差异，为以CD44为靶点的肿瘤靶向治疗提供新的理论依据。方法　采用流式细胞术检测20名正常人外周血单个核细胞（PBMCs）、正常小鼠胚细胞NIH3T3及人乳腺肿瘤细胞Hs578T、BT-549表面CD44表达水平；使用荧光标记透明质酸(FL-HA)，通过流式细胞术分析CD44的活化状态；再运用细胞免疫荧光的方法观察HA与不同活化状态CD44的靶向结合情况。结果　正常人PBMCs、NIH3T3与乳腺肿瘤细胞Hs578T、BT-549表面均高表达CD44，阳性表达率＞95%。PBMCs、NIH3T3的CD44与FL-HA结合活性相对较低，分别为（3.61±2.65）% 和（14.33±1.35）%，而乳腺肿瘤细胞表面CD44与FL-HA结合活性高（＞90%）。细胞免疫荧光显示NIH3T3细胞表面基本无荧光，HA不靶向结合CD44，而Hs578T和BT-549细胞表面呈现强荧光，HA靶向结合CD44。结论　正常细胞PBMCs、NIH3T3表面虽然高表达CD44，但与其天然配体HA结合活性较低，而乳腺肿瘤细胞表面高表达CD44且与其配体HA结合活性很高。提示CD44分子在正常和肿瘤细胞表面存在相对静止与活化2种状态，前者与HA结合活性较低，后者与HA结合活性高。提示以HA为靶向分子、CD44为靶点的抗肿瘤药物，能够选择性杀伤高表达CD44的肿瘤细胞而不影响正常细胞。

骨碱性磷酸酶活性检测在小儿佝偻病筛查中的价值

沈春燕，王云芳，王正良，谢颖

2013, 28(5): 429-429. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.021

摘要 ( 435 )

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小儿佝偻病是国家重点防治的小儿四大疾病之一。骨碱性磷酸酶（BALP）由成骨细胞合成。当小儿体内维生素D（Vit D）缺乏时，骨钙化不足，成骨细胞活跃，BALP活性升高。BALP测定一般使用外周血，并可与血常规同时进行，容易被家长接受。为进一步探讨BALP在小儿佝偻病中的价值，正确指导Vit D及钙剂的补充，我们检测了1 897名儿保体检婴幼儿的BALP水平。

复合血脂质控品的制备及性能评价

唐立萍1，张瑞镐2，居漪1，王美娟1，胡春力2，诸佩超2，詹方尧2

2013, 28(5): 430-433. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.022

摘要 ( 489 )

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摘要：目的　研制一种液体非定值复合血脂质控品，并对其稳定性进行探讨和研究。方法　采用混合人血清[人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体、丙型肝炎病毒（HCV）抗体、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阴性]为基质制备复合血脂质控品，并对其精密度（瓶间差）、开瓶及储存稳定性进行评价。结果　自制的质控品各项目精密度（瓶间差）均＜1/4美国临床实验室修正法规( CLIA’88)可接受性能指标。于－20 ℃条件下保存18个月，各项目偏移结果均符合1/2 美国CLIA’88可接受性能指标规定。开瓶后于2～8 ℃保存19 d，各项目稳定性[变异系数（CV）]均＜1/4 美国CLIA’88可接受性能指标。结论　自制质控品的均匀性和稳定性良好，可替代人血清用于临床实验室的日常质量控制（IQC）以及进行不同实验室之间的质量评价（EQA）和检测结果一致性调查使用。

健康体检妇女宫颈高危型人乳头状瘤病毒感染情况及基因亚型分析

陈颖，蓝海鹰，黄紫艳，叶云

2013, 28(5): 434-435. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.023

摘要 ( 471 )

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目的　分析健康体检妇女宫颈高危型人乳头状瘤病毒（HR-HPV）感染率以及基因亚型的分布特征。方法　采用多重聚合酶链反应（PCR）荧光检测法对650名健康体检妇女宫颈刷片标本进行人乳头状瘤病毒（HPV）分型检测，分析HPV感染亚型、不同年龄组妇女感染率。结果　650名妇女中检测出HPV阳性73例，阳性率为11.23%。感染亚型前5位依次为HPV52（17例，2.62%）、HPV39(11例，1.69%)、HPV58 (8例，1.23%)、HPV68（7例，1.08%）和HPV56（6例，0.92%）。50~59岁组检出率（15.09%）明显高于20～29岁组（5.49%）。?结论　HPV感染有年龄差异，应加强对高年龄段妇女宫颈病变的筛查，为临床HR-HPV感染的预防、治疗提供参考依据。

不同采血部位及放置时间对样品检测高敏C反应蛋白的影响

彭海维，方宗君，杨容维

2013, 28(5): 436-438. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.024

摘要 ( 429 )

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目的　探讨静脉抗凝血样品与末梢血样品检测高敏C反应蛋白(hs-CRP)结果的差异程度及上述样品放置不同时间对hs-CRP测定结果的影响。方法　采用散射比浊法分别检测静脉抗凝血与末梢血2种样品各84例在即刻及4 ℃放置24 h、7 d 3个时间段的hs-CRP含量，并进行比较分析。结果　静脉抗凝血与末梢血的精密度分别为2.33%、2.30%，均在允许误差范围内。以静脉抗凝血样品即刻hs-CRP检测值为参比，末梢血样品即刻检测值与其比较偏差最小（P＞0.05），相关性最好；而4 ℃放置24 h，静脉抗凝血样品及末梢血样品相对偏差均增大，放置7 d时偏差明显增大（P＜0.05），相关性均明显下降。结论　静脉抗凝血与末梢血即刻检测hs-CRP两者间具有良好的相关性，随着放置时间的延长其检测值差异逐渐增大，4 ℃放置7 d时偏差已超出分析要求。

Rh（D）阴性献血者资料库的建立及其构成状况调查

卢海燕，姜利军

2013, 28(5): 438-441. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.025

摘要 ( 447 )

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目的　丰富Rh(D)阴性血液，以满足临床的需求，保障输血安全。方法　采用Rh(D)初筛试验及Rh(D)确证试验筛查136 887名献血者中的Rh(D)阴性献血者，并将有关信息输入计算机管理系统，建立Rh(D)阴性稀有血型资料库。结果　在136 887名献血者中，共筛查出340名Rh(D)阴性献血者，筛出率为0.25%。在340名Rh(D)阴性献血者中，按ABO血型分类，A型99名、B型86名、AB型31名、O型124名；按性别分类，男181名、女159名；按人口来源分类，常住人口214名、流动人口126名；按民族分类，汉族273名、苗族28名、土家族16名、侗族15名、其他少数民族8名。结论　Rh(D)阴性血型资料库的建立和建设，是满足临床对Rh(D)阴性血液需求的首要保证。只有不断地扩大和完善Rh(D)阴性献血者资料库的建设、加强对资料库中的Rh(D)阴性献血者的管理、科学合理输血、建立冷冻血库及开展自身输血，才能做到长期满足临床对Rh(D)阴性血液的需求。

抗血小板药物治疗监测的进展

乔蕊，张捷

2013, 28(5): 442-447. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.05.026

摘要 ( 546 )

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抗血小板药物在动脉粥样硬化导致的血栓事件一级预防和二级预防中发挥着重要的作用。但是与降压药、降糖药和降脂药不同，临床目前一般不根据抗血小板治疗的效果而调整抗血小板药物剂量。近年来，这种给予固定剂量的抗血小板药物而不常规监测血小板抑制程度的做法受到挑战。实验室研究结果证明阿司匹林和二磷酸腺苷（ADP）受体拮抗剂（如氯吡格雷）存在广泛的个体间差异 [1-2]。前瞻性观察研究提示阿司匹林和氯吡格雷的低反应性与不良心血管预后有关。初步的数据提示根据血小板试验调整氯吡格雷剂量可以改善临床预后 [3-4]。因此重视发展安全有效的抗血小板治疗的监测手段可能将非常有意义。

抗β2GPⅠ抗体/β2GPⅠ与PLT活化

李刚综述，刘彦虹审校

2013, 28(5): 448-451. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.03.027

摘要 ( 603 )

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近年来，血栓性疾病发病率不断上升，严重威胁人类健康和生命，血小板（PLT）活化是血栓形成的始动因素，在血栓形成中起到关键作用。研究发现抗β2糖蛋白I（β2GPⅠ）抗体出现在多种血栓性疾病中，常见于抗磷脂综合征，能使体内PLT活化并和纤维蛋白结合，引起PLT聚集，与血栓形成关系非常密切。抗β2GPⅠ抗体如何诱导血栓形成还不明确，其中PLT的活化聚集是整体上的病理机制，研究抗原抗体复合物对PLT活化的过程，对血栓形成机制和血栓性疾病预防和治疗具有重要意义。

ICU产ESBLs大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶基因的分析

芮球红，廖于峰，陈燕敏

2013, 28(5): 452-454. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.03.028

摘要 ( 438 )

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大肠埃希菌是临床常见的条件致病菌，也是重症监护病房(ICU)感染的主要病原菌之一。近年来，随着抗生素的广泛使用，产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌日益增多。ESBLs由质粒介导，易在种属甚至不同种属细菌间传递造成暴发流行 [1]。这一现象已成为医院感染的突出问题。氨基糖苷类抗菌药物（aminoglycosides，AGs）是一种治疗革兰阴性菌感染的重要抗菌药物。细菌对该类药物耐药主要是通过产氨基糖苷类修饰酶（AMEs）。我们收集了ICU分离的82株大肠埃希菌，通过ESBLs检测、体外药敏试验和AMEs基因携带情况分析，了解ICU大肠埃希菌产ESBLs感染发生率，探讨产ESBLs株AGs耐药和AMEs基因之间的关系，以期为临床合理选用抗菌药物提供理论依据。

不同血液样本类型对B型钠尿肽测定结果的影响

张海霞1，李立方2，袁宁1，郭杰1，张连祥1

2013, 28(5): 455-456. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2013.03.029

摘要 ( 437 )

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德国西门子公司的ADVIA CentaurCP全自动化学发光分析仪检测B型钠尿肽（B-type natriuretic peptide，BNP)的原理是基于直接化学发光技术的全自动双抗夹心免疫法。乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）抗凝血浆是该仪器检测试剂推荐用于检测BNP的样本类型。但在临床工作中，我们发现外单位送检到本实验室的血液样本中经常使用枸橼酸钠抗凝或血清样本，而且在某些特殊情况下，如严重失血患者，可采集的样本量过少，此时了解能否用其他血液样本，如柠檬酸钠抗凝血浆或血清样本代替EDTA抗凝血浆样本进行BNP检测就显得比较重要。因此，我们探讨了柠檬酸钠抗凝血浆或血清样本对同一份血液样本BNP测定结果的影响，为做好本实验室分析前质控及临床应用提供指导。

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