人甲胎蛋白的制备及其应用

doi:10.3969/j.issn.1673-8640.2026.09.016

摘要/Abstract

摘要：

目的制备可替代人腹水的天然人甲胎蛋白（AFP），作为AFP检测试剂盒的校准品和质控品。方法用中空纤维细胞培养系统培养人肝癌细胞系HuH7，收集细胞培养上清液，经免疫亲和纯化获得AFP抗原。采用磁微粒化学发光法检测AFP抗原，并评价抗原效价、稳定性、不同品牌试剂检测一致性等性能指标。结果中空纤维培养肿瘤株可分泌高浓度AFP，免疫亲和纯化可获得高纯AFP抗原。电泳结果显示，该蛋白与预期蛋白大小一致，纯度>90%。3批AFP抗原的浓度为2.0~3.1 mg·mL^-1。2~8 ℃复溶稳定性试验和37 ℃热稳定性试验的AFP浓度变化幅度均<±10%。4种检测系统检测3批AFP抗原的低、中、高水平，AFP浓度差异均无统计学意义（P>0.05）；CV均<15%，略优于腹水质控品。结论制备的人AFP抗原可作为 AFP检测试剂盒的校准品和质控品，批间一致性良好。

关键词: 人甲胎蛋白, 中空纤维细胞培养系统, 人腹水, 一致性

中图分类号:

R446.1

孙静静, 彭亚杰, 崔亚敏, 田晓平, 赵巧辉, 李桂林. 人甲胎蛋白的制备及其应用[J]. 检验医学, 2026, 41(9): 919-921.

图/表 4

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抗原批号	稀释比例	浓度回算值/ （ng·mL^-1）	浓度均值/ （ng·mL^-1）
批次1	1∶500 0	3 566 330	3 179 550
	1∶1 000 0	2 945 520
	1∶2 000 0	3 026 800
批次2	1∶5000	1 995 405	2 004 618
	1∶1000 0	1 808 110
	1∶2 000 0	2 210 340
批次3	1∶5000	1 780 900	2 014 740
	1∶1 000 0	2 010 220
	1∶2 000 0	2 240 100

抗原批号	稀释比例	浓度回算值/ （ng·mL^-1）	浓度均值/ （ng·mL^-1）
批次1	1∶500 0	3 566 330	3 179 550
	1∶1 000 0	2 945 520
	1∶2 000 0	3 026 800
批次2	1∶5000	1 995 405	2 004 618
	1∶1000 0	1 808 110
	1∶2 000 0	2 210 340
批次3	1∶5000	1 780 900	2 014 740
	1∶1 000 0	2 010 220
	1∶2 000 0	2 240 100

批次	在产对照/（ng·mL^-1）	2~8 ℃复溶稳定性		37 ℃热稳定性
批次	在产对照/（ng·mL^-1）	检测值/（ng·mL^-1）	变化幅度/%	检测值/（ng·mL^-1）	变化幅度/%
批次1
低	10.48	10.60	1.15	10.44	-0.34
中	80.77	74.53	-7.73	77.02	-4.64
高	168.47	178.42	5.90	167.70	-0.46
批次2
低	10.64	10.09	-5.15	9.88	-7.11
中	73.50	74.27	1.05	73.11	-0.53
高	155.51	152.66	-1.83	154.85	-0.43
批次3
低	10.49	10.32	-1.62	10.05	-4.17
中	73.00	75.10	2.87	75.06	2.82
高	164.71	163.94	-0.46	168.70	2.43

批次	在产对照/（ng·mL^-1）	2~8 ℃复溶稳定性		37 ℃热稳定性
批次	在产对照/（ng·mL^-1）	检测值/（ng·mL^-1）	变化幅度/%	检测值/（ng·mL^-1）	变化幅度/%
批次1
低	10.48	10.60	1.15	10.44	-0.34
中	80.77	74.53	-7.73	77.02	-4.64
高	168.47	178.42	5.90	167.70	-0.46
批次2
低	10.64	10.09	-5.15	9.88	-7.11
中	73.50	74.27	1.05	73.11	-0.53
高	155.51	152.66	-1.83	154.85	-0.43
批次3
低	10.49	10.32	-1.62	10.05	-4.17
中	73.00	75.10	2.87	75.06	2.82
高	164.71	163.94	-0.46	168.70	2.43

项目	AFP/（ng·mL^-1）	罗氏系统	雅培系统	贝克曼系统	西门子系统	CV/%
腹水质检品
低水平	10	6.56±0.05	7.76±0.01	8.02±0.05	7.20±0.09	9
中水平	100	78.57±0.92	98.60±1.24	88.25±0.49	95.00±1.19	18
高水平	200	176.80±1.66	203.28±0.75	196.42±1.56	193.30±1.42	8
批次1
低水平	10	9.79±0.15	10.26±0.04	11.49±0.13	9.70±0.10	1
中水平	100	87.62±0.60	99.86±0.63	91.84±1.14	93.90±2.07	10
高水平	200	198.20±2.65	214.99±2.87	204.89±0.14	205.10±3.36	5
批次2
低水平	10	8.56±0.10	9.79±0.10	10.65±0.03	9.00±0.05	1
中水平	100	83.28±0.88	90.53±1.13	88.12±0.89	89.40±1.32	7
高水平	200	174.10±1.66	197.97±1.29	193.50±2.00	199.20±1.11	8
批次3
低水平	10	9.15±0.11	9.73±0.13	10.77±0.14	10.2±0.23	1
中水平	100	83.30±0.41	94.4±1.81	94.14±1.28	95.00±1.41	11
高水平	200	197.7 0± 0.14	205.38±2.73	199.64±2.3	212.7±2.96	5

人甲胎蛋白的制备及其应用

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