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2015年 第30卷 第7期    刊出日期：2015-07-30

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估算肾小球滤过率公式的临床应用专题

从K/DOQI 2002到KDIGO 2012慢性肾脏疾病诊疗指南中实验室检测项目相关应用建议的解读

郭玮, 潘柏申

2015, 30(7):  663-667.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.001

摘要 ( 488 )   HTML ( 6)   PDF (997KB) ( 601 )  

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慢性肾脏疾病(CKD)已经成为为全球关注的公共卫生问题。2002年美国国家肾脏基金会(NKF)所属的“肾脏病预后质量倡议(K/DOQI)”工作组发布的“慢性肾脏疾病的评估、分期的临床实践诊疗指南”明确了CKD定义,制订了CKD分期评估与管理的概念性框架。“肾脏疾病·改善全球预后(KDIGO)”组织2012年发布的“慢性肾脏疾病评估和管理的临床实践诊疗指南”立足于循证医学证据评估,对K/DOQI 2002指南进行了完善和讨论,并且针对实验室人员以及检测项目提出建议。文章重点介绍了指南中的更新进展以及实验室检测相关应用建议,以便实验室工作人员更好地理解指南中的建议以及在临床工作中的应用。

肾小球滤过率计算公式的发展和比较

王寅, 王蓓莉 综述, 郭玮, 潘柏申 审校

2015, 30(7):  668-673.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.002

摘要 ( 570 )   HTML ( 8)   PDF (726KB) ( 896 )  

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肾脏疾病的早期诊断依赖于对肾小球滤过率(GFR)的准确判断。为了简化GFR的临床应用,学者们开发了多个基于肌酐(Cr)及半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)等滤过标志物的估算肾小球滤过率(eGFR)公式。最早开发的Cockcroft-Gault(C-G)公式基于慢性肾脏病(CKD)患者建立且例数较少,受到诸多因素的影响,目前认为其作为内生肌酐清除率的计算公式更为合适。而后建立的肾脏病膳食改良(MDRD)公式同样基于CKD患者,例数较多,但在健康人及非肾病患者中的准确性不佳,部分原因在于滤过标志物的测定并未标准化。但在Cr和CysC测定均标准化后其修正公式的应用仍不尽如人意。受到建立人群的限制,MDRD公式更适用于CKD患者。慢性肾脏病流行病学合作研究(CKD-EPI)公式建立人群不仅有CKD患者,还有更多健康人等,故其临床应用更佳。基于Cr的CKD-EPI公式准确性更优于Cr与Cys C联合公式。eGFR公式简化了肾功能的了解和评价过程,但eGFR公式是由数学模型拟合而来。直接测定GFR(mGFR)方法的选择直接决定了建立的eGFR公式是否准确。滤过标志物的检测受到多种因素的影响,故持续推进滤过标志物检测的标准化也是对结果准确性的必要保障。受到人种、饮食、肌肉量等因素的影响,eGFR公式的准确性还有赖于在与建立人群相似的人群中应用。

肾小球滤过率的测定方法及其临床应用

虞倩, 王蓓丽 综述, 郭玮, 潘柏申 审校

2015, 30(7):  674-679.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.003

摘要 ( 583 )   HTML ( 8)   PDF (726KB) ( 759 )  

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肾小球滤过率(GFR)是衡量肾功能的最佳指标,在临床工作中具有重要的参考价值,其数值是否准确对诊疗决策的优化影响重大。GFR可以通过估算公式或直接测量获得,估算肾小球滤过率(eGFR)在特定情况或特殊人群中易出现偏倚,采用直接测量的GFR(mGFR)评价肾功能更为准确。结合菊粉、肌酐、碘海醇、^99m锝-二乙烯三胺五醋酸(^99mTc-DTPA)、⁵¹铬-乙二胺四乙酸、¹²⁵I-碘肽酸盐等常用肾小球滤过标志物的不同特性,可分别采用血、尿清除率或肾动态显像法测量mGFR,但所得结果的准确性不一。鉴于其它方法的耗时繁琐,临床应用多选择内生肌酐清除率(Ccr)对肾功能进行评估,但综合各项研究证实Ccr存在显著偏倚,易高估GFR。尿液碘海醇清除率、^99mTc-DTPA清除率的准确性较高,更适宜推广于临床。GFR测量方法作为各类eGFR公式的验证手段,在临床工作中的应用和评价不容忽视,值得进一步研究。

肾小球滤过率评估方程在不同人群中的适用性

卞炳贤, 周韵斓, 沈立松

2015, 30(7):  680-683.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.004

摘要 ( 175 )   HTML ( 1)   PDF (695KB) ( 575 )  

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目前基于普通人群所开发的通用估算肾小球滤过率(eGFR)评估公式在临床广泛使用,但某些特定人群由于其自身特点的影响,其eGFR评估公式亦会与普通人群有所不同。文章就eGFR评估公式的发展过程及在不同人群中的适用性作一综述,主要包括中国人群、儿童、糖尿病患者、心力衰竭患者、老年人。在临床研究及应用中应需注意肌酐与半胱氨酸蛋白酶抑制剂C检测方法的标准化以及eGFR评估公式的差异化和本土化使用。

7种eGFR公式早期诊断CKD的性能评价

陈贵英, 杨涛, 应军, 何晓华

2015, 30(7):  684-690.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.005

摘要 ( 375 )   HTML ( 2)   PDF (792KB) ( 514 )  

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评价慢性肾脏疾病流行病学协作组(CKD-EPI)公式、中国eGFR协作组公式和FQ-eGFR公式计算的估算肾小球滤过率(eGFR)在慢性肾病(CKD)中的早期诊断性能。

测定283例住院成人CKD患者和9 307例门诊成人就诊者血清中半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)和肌酐(Cr)水平,计算3个CKD-EPI公式(Cr-、Cys C-和Cys C-C联合公式)、2个eGFR协作组公式(Cys C-和Cys C-C联合公式)和2个FQ-eGFR公式(Cys C-和Cys C-C联合公式)的eGFR,依次得到eGFR1~eGFR7。住院患者同时测定血浆^99m锝-二乙烯三胺五乙酸(^99mTc-DTPA)清除率[作为测量GFR(mGFR)],用于其eGFR差异性、一致性以及分析性能评价的金标准。然后回顾性分析了9 307例门诊成人就诊者中各eGFR预测CKD的相对发生率(IRR)。

eGFR2、eGFR3与mGFR比较差异均有统计学意义(P均=0.000)。eGFR4、eGFR6和eGFR7与mGFR的一致性相关系数(ρ_c)值均明显高于eGFR1(P均<0.01)。对于mGFR<60 mL/(min·1.73 m²)患者,eGFR4、eGFR6和eGFR7的偏差、精密度和准确性无差异(P均>0.05),但与eGFR1比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。相比之下,eGFR4的偏差更小[中位数(M)=0.3 mL/(min·1.73 m²)],eGFR6的精密度更高[标准四分位距(IQR)=7.7 mL/(min·1.73 m²)],eGFR7的准确性更好(1-P₃₀=13.8%)。应用eGFR4、eGFR6和eGFR7预测CKD的发生率高于eGFR1(P均<0.01),且年长者(>65岁)与65岁以下者相比其预测CKD发生率更高(P均=0.000)。

对于GFR<60 mL/(min·1.73 m²)的中国成人CKD患者,CKD-EPI公式并不能提供更为准确的肾功能评估。相对而言,中国eGFR协作组Cys C公式、FQ-eGFR Cys C公式或FQ-eGFR Cys C-C联合公式更适用于中国成人CKD的疾病筛查和早期诊断,其中FQ-eGFR Cys C公式用于疾病筛查可尽可能地避免漏诊或误诊。

临床应用研究·论著

阴沟肠杆菌16S rRNA甲基化酶基因分布

唐翠连, 王芳, 陈芳军, 张文斌

2015, 30(7):  691-693.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.006

摘要 ( 234 )   HTML ( 2)   PDF (719KB) ( 507 )  

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了解湖南邵阳地区耐氨基糖苷类抗菌药物的阴沟肠杆菌中16S rRNA甲基化酶基因分布特点及其与氨基糖苷类抗菌药物耐药性的关系。

收集2012年8月至2014年5月邵阳地区新宁县人民医院、武岗市人民医院、邵阳县人民医院和邵阳医学高等专科学校附属医院临床样本中分离的241株阴沟肠杆菌,采用API20E进行菌种鉴定,同时用纸片扩散法进行体外药物敏感性试验。采用聚合酶链反应(PCR)进行armA、npmA、rmtA、rmtB、rmtC和rmtD基因检测,分析耐药基因与耐药表型的关系。

241株阴沟肠杆菌中200株对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素和奈替米星4种氨基糖苷类抗菌药物耐药,其耐药率分别为41.9%、68.5%、70.1%和63.5%。基因检测结果提示,241株阴沟肠杆菌检出2种16S rRNA甲基化酶基因,分别为armA(96株,39.8%)和rmtB(17株,7.1%),未检出npmA、rmtA、rmtC和rmtD基因。

16S rRNA甲基化酶与氨基糖苷类抗菌药物的耐药性有相关性。不同地区分离的对氨基糖苷类药物耐药的阴沟肠杆菌菌株携带16S rRNA甲基化酶的基因型有一定差异,湖南邵阳地区阴沟肠杆菌以携带armA基因为主。

广州番禺地区儿童总钙和25-羟基维生素D检测结果分析

肖钘, 何金花, 黎毓光, 韩泽平, 胡淑芬, 黄惠

2015, 30(7):  694-696.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.007

摘要 ( 349 )   HTML ( 1)   PDF (748KB) ( 462 )  

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统计广州市番禺地区儿童总钙和25-羟基维生素D[25(OH)D]水平并进行分析,为以后该地区儿童保健提供参考依据。

使用原子吸收光谱仪和电化学发光仪检测1 902名儿童总钙和25(OH)D水平。将受检儿童按年龄不同分为5个年龄组:婴儿组(1~12个月,817名)、幼儿组(1~2岁,599名)、学龄前组(3~6岁,291名)、学龄期组(7~11岁,167名)、青春发育期组(12~18岁,28名)。在按年龄分组的基础上再按性别分成男、女两组。对各组总钙和25(OH)D水平进行统计分析。

广州番禺地区儿童总钙水平为(1.72±0.19)mmol/L,25(OH)D 水平为(39.12±11.26)ng/mL,两者均随年龄的增长呈下降趋势。按年龄分组比较显示婴儿组总钙及25(OH)D水平均明显高于其余4组(P均<0.05);幼儿组总钙水平明显高于学龄前组及学龄期组(P均<0.05),25(OH)D水平明显高于学龄前组、学龄期组及青春发育期组;学龄前组总钙及25(OH)D水平均高于学龄期组(P均<0.05)。男、女性儿童总钙和25(OH)D水平差异均无统计学意义(P均>0.05)。总钙和25(OH)D呈正相关[相关系数(r)=0.221,P<0.05,线性方程为Y_总钙=0.004X_25(OH)D+1.573]。

番禺地区儿童血液总钙和25(OH)D水平偏低。建议学校和家长能督促儿童及时、合理的补钙。

药物基因组学方程对上海患者华法林抗凝治疗稳定剂量预测准确性的评估

庄文芳, 陈燕红, 罗瑞萍, 吴婧, 宣彬彬, 曹雅楠, 杨莉, 盛慧明

2015, 30(7):  697-702.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.008

摘要 ( 183 )   HTML ( 0)   PDF (720KB) ( 464 )  

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在接受华法林抗凝治疗肺栓塞和心颤患者的上海患者人群中,验证华法林药物基因组学稳定剂量预测方程的准确性。

收集已达华法林稳定剂量的198例患者完整的临床资料,采集每位患者枸橼酸钠抗凝1:9抗凝的外周血1.8 mL,抽提全血基因组DNA后采用高分辨率溶解曲线法检测其VKORC1-1173C>T和CYP2C9*2、CYP2C9*3基因型。采用较多使用的符合筛选条件的4个华法林稳定剂量预测模型[包括IWPC模型(基于混合种群构建)、WEN模型(基于中国台湾人群构建)、HUANG模型(基于中国大陆人群构建)及OHNO模型(基于日本人群构建)]。采用绝对误差均值(MAE)和预测百分比2个指标评价并比较各模型预测准确性。

在4个预测模型中,HUANG、OHNO及WEN 3个预测模型及固定剂量方案计算的MAE<±1.0 mg/d,理想预测百分比>40%,其中MAE最低的模型为HUANG模型。理想预测百分比最高的模型为OHNO。

采用亚洲人群建立的基因导向结合基本临床资料的华法林稳定剂量预测模型可以较好预测服用华法林的部分上海患者的药物剂量,具有一定临床应用价值。

MCV与MCH联合血红蛋白电泳筛查常见地中海贫血

李红萍, 李培培, 张轩, 朱淑娥, 林洁, 杨庆伟, 陈伟光, 吴晓洋

2015, 30(7):  703-706.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.009

摘要 ( 219 )   HTML ( 0)   PDF (694KB) ( 562 )  

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比较HbA₂或HbA₂联合平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)筛查常见地中海贫血的敏感性、特异性的差异。

选择275例β-地中海贫血、44例α-复合β-地中海贫血、186例α-地中海贫血和398例非地中海贫血,分别采用XE-2100血液分析仪检测MCV和MCH、CAPILLARYS 2全自动电泳仪做血红蛋白电泳、跨越断裂点聚合酶链反应(GAP-PCR)检测3种常见缺失、聚合酶链反应(PCR)结合反向斑点杂交法检测17个常见突变位点。比较血红蛋白电泳单独和联合MCV、MCH筛查常见地中海贫血的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)。

血红蛋白电泳筛查β-地中海贫血和α-复合β-地中海贫血的敏感性为99.69% ,特异性为98.28%,阳性预测值(PPV)为96.96%,阴性预测值(NPV)为 99.83% 。MCV联合血红蛋白电泳筛查α-地中海贫血的敏感性为86.56%,特异性为83.26%,PPV为57.30%,NPV为 95.98%。MCH联合血红蛋白电泳筛查α-地中海贫血的敏感性为92.47%,特异性为81.45%, PPV为56.39%,NPV为97.66%。

血红蛋白电泳可以筛查出95%以上的β-地中海贫血和α-复合β-地中海贫血,MCH联合血红蛋白电泳筛查α-地中海贫血可以提高筛查的敏感性。

单核苷酸多态性与华法林初始抗凝疗效和维持剂量的研究

吴炯, 李军, 邬升超, 张春燕, 宋斌斌, 王蓓丽, 郭玮, 潘柏申

2015, 30(7):  707-714.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.010

摘要 ( 215 )   HTML ( 5)   PDF (926KB) ( 387 )  

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筛选华法林初始抗凝治疗疗效和华法林维持剂量存在显著影响的基因因素。

初始抗凝疗效组:选取进行心脏瓣膜置换的汉族患者212例,以术后4 d为观测期限,根据设立初始抗凝疗效的观测指标△INR_4-1[即观测期结束时的国际标准化比值(INR)与初始INR的差值],筛选出对于该指标存在显著影响的基因因素。同时观查上述因素与其它终点事件如INR>3、INR>4和3 d内是否入窗等是否相关。维持剂量组:选取服用华法林3个月以上的门诊患者266例,需满足相隔7 d以上、在服用相同剂量华法林的情况下,2次INR检测结果均在治疗窗内。筛选显著影响的基因因素。

在初始抗凝疗效组中,CYP2C9 (rs1057910)、VKORC1 (rs9923231)和VKORC1 (rs2292566)对△INR_4-1有明显影响;CYP2C9 (rs1057910)和EPHX1(rs2292566)对3 d内INR是否进入治疗范围有明显影响(P<0.001、P<0.05)。在维持剂量组中,CYP2C9 (rs1057910)和VKORC1 (rs9923231)对每日及每周华法林剂量均有明显影响(P<0.001)。

CYP2C9 (rs1057910)、VKORC1 (rs9923231)和EPHX1 (rs2292566) 对于华法林初始抗凝疗效有明显影响。CYP2C9(rs1057910)、VKORC1 (rs9923231)对华法林维持剂量有明显影响。

银屑病患者Th17和Treg细胞及其相关细胞因子的表达

杨婷婷, 王青, 李志, 朴君, 朴敬爱

2015, 30(7):  715-719.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.011

摘要 ( 307 )   HTML ( 0)   PDF (820KB) ( 548 )  

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探讨银屑病患者辅助性T细胞17(Th17)和调节性T (Treg)细胞及其相关因子表达的临床意义。

用流式细胞术检测28例轻度和25例重度银屑病患者及25名健康对照者外周血中Th17和Treg细胞的比例;用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)和抗人叉头状转录因子(Foxp3) mRNA的表达;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆Th17和Treg相关细胞因子白细胞介素17(IL-17)和转化生长因子β(TGF-β)的水平。

与健康对照组比较,银屑病患者组Th17 细胞比例、RORγt的mRNA水平及IL-17的浓度显著上升,且重度组显著高于轻度组(P<0.05);而重度银屑病患者Treg细胞、Foxp3 mRNA和血浆TGF-β浓度均较健康对照组和轻度组显著降低(P<0.05)。

Th17和Treg细胞的比例及其相关因子的表达可作为银屑病病情进展的标志。

免疫固定电泳和骨髓细胞形态学检查在多发性骨髓瘤临床分期中的价值比较

崇慧峰, 孙芸, 王传发, 汪亚勤, 曹春鸾, 周萍

2015, 30(7):  720-722.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.012

摘要 ( 359 )   HTML ( 0)   PDF (683KB) ( 496 )  

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探讨免疫固定电泳(IFE)和骨髓细胞形态学检查在多发性骨髓瘤(MM)临床分期中的价值。

按照International Staging System(ISS)分期标准将89例MM患者分为Ⅰ~Ⅲ期,其中ISS Ⅰ期18例、ISS Ⅱ期23例、ISS Ⅲ期48例。比较各期患者间血清IFE结果和骨髓细胞形态学检验结果的差异,并分析各指标与ISS分期的关系。

ISS各期中免疫球蛋白(Ig)分型均以IgG型为主(占50%以上)。ISS Ⅱ、Ⅲ期的M蛋白阳性率和骨髓瘤细胞比例均高于ISS Ⅰ期(P均<0.05);ISS Ⅲ期M蛋白阳性率和总体阳性率均明显高于骨髓细胞形态学(骨髓瘤细胞比例≥10%为标准)(P<0.05);ISS各期之间M蛋白和骨髓细胞形态学阳性率差异均有统计学意义(P均<0.05)。

MM患者随着ISS分期的增高,其M蛋白阳性率和骨髓瘤细胞比例有增高趋势。

外周血DNT细胞及T细胞亚群变化与乙型肝炎慢性化的相关性研究

杜振华, 鲍布和, 王仁杰, 任党利, 张明华, 刘冀琴

2015, 30(7):  723-727.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.013

摘要 ( 186 )   HTML ( 0)   PDF (773KB) ( 465 )  

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探讨外周血中CD3⁺CD4^-CD8^-(DNT)细胞及T细胞亚群变化与乙型肝炎病毒(HBV)感染慢性化的关系。

用流式细胞术测定136例HBV感染者[33例无症状携带者(ASC)、28例急性乙型肝炎(AHB)、28例轻度慢性乙型肝炎(CHB)、25例中度CHB、22例重度CHB患者]及39名健康对照(HC)外周血中的DNT细胞及T细胞亚群。

ASC组、AHB组、HC组DNT细胞比例分别为5.43%±3.31%、4.75%±2.71%和4.82%±3.43%,3组间差异无统计学意义(P>0.05),其中HC组和AHB组均低于CHB各组(由轻到重分别为7.97%±4.12%、8.41%±4.93%、11.36%±5.01%,P均<0.05),但ASC组仅显著低于重度CHB组(P<0.05),与轻度CHB组和中度CHB组间差异均无统计学意义(P>0.05);DNT细胞比例在轻度CHB组与中度CHB组间差异无统计学意义(P>0.05),但二组均显著低于重度CHB组(P均<0.05)。HC组、AHB组、ASC组间T淋巴细胞亚群分布差异无统计学意义(P均>0.05),但随着CHB患者病情加重CD3⁺、CD3⁺CD4⁺CD8^-(CD4⁺)细胞比例降低,CD3⁺CD4^-CD8⁺(CD8⁺)细胞比例升高。

外周血DNT细胞比例的升高与HBV感染者慢性化关系密切,且与CHB患者的疾病进程有关。

急性脑梗死患者阿司匹林抵抗与红细胞及血小板参数的相关性分析

吴学兵, 卢凌鹏, 余志良, 姚晓阳, 谢钰帆, 李志兰, 李博, 沈海涛

2015, 30(7):  728-730.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.014

摘要 ( 195 )   HTML ( 1)   PDF (676KB) ( 511 )  

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探讨急性脑梗死患者阿司匹林抵抗(AR)与红细胞(RBC)及血小板(PLT)参数的关系。

对211例急性脑梗死患者用血栓弹力图测定AR率,同时检测上述患者及50名健康对照者(正常对照组)中RBC体积分布宽度(RDW)、PLT计数、PLT平均体积(MPV)、PLT分布宽度(PDW)、PLT压积(PCT)。

211例急性脑梗死中AR 33例(15.64%)、阿司匹林半抵抗(ASR)30例(14.22%)、阿司匹林敏感(AS)148例(70.14%)。AR组、ASR组和AS组ROW、PLT计数均明显高于正常对照组(P均<0.05),ASR组PLT计数明显高于AS组及AR组;AR、ASR和AS 3组之间PDW差异无统计学意义(P>0.05);AR组及ASR组MPV明显高于正常对照组(P<0.05)。

急性脑梗死中PLT和MPV的升高对AR的诊治、临床用药调整有一定的参考价值。

病毒性肝炎患者血清自身抗体的变化

黄金保, 徐秀亮, 胡义忠, 吴芬, 苏静

2015, 30(7):  731-733.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.015

摘要 ( 219 )   HTML ( 2)   PDF (677KB) ( 365 )  

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探讨病毒性肝炎患者自身抗体的变化及其与病毒性肝炎的相关性。

采用免疫印迹法检测370例病毒性肝炎患者(包括甲型肝炎56例、乙型肝炎157例、丙型肝炎115例、丁型肝炎23例、戊型肝炎19例)抗线粒体抗体(AMA)、抗线粒体抗体2型(AMA-2)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗肝细胞溶质抗原1型抗体(LC-1)、抗肝肾微粒抗体(LKM)、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体(SLA/LP),同时采用免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)。

病毒性肝炎患者AMA总阳性率为7.03%、AMA-M2总阳性率为3.78%、SMA总阳性率为0.81%、LC-1总阳性率为0.54%、LKM总阳性率为1.89%、SLA/LP总阳性率为0%、ANA总阳性率为18.38%。5种病毒性肝炎中以丙型肝炎患者自身抗体阳性率最高,为62.61%,且以ANA阳性为主(33.91%);乙型肝炎次之,为26.75%,也以ANA阳性为主(15.29%);明显高于其它3种病毒性肝炎(甲型肝炎8.93%、丁型肝炎4.35%)、戊型肝炎0%)。

病毒性肝炎患者血清中存在多种自身抗体,其中又以乙型肝炎、丙型肝炎多见,自身抗体中则以ANA为主。对病毒性肝炎患者进行自身抗体检测有助于了解患者机体免疫状况,以便指导临床用药。

技术研究与评价·论著

胶乳增强免疫比浊法定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的方法学评价及临床应用

孙丽, 牛国平

2015, 30(7):  734-739.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.016

摘要 ( 233 )   HTML ( 5)   PDF (911KB) ( 431 )  

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对胶乳增强免疫比浊法(LEIA)定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)进行方法学评价并探讨其初步的临床应用。

应用美国临床实验室标准化协会(CLSI)的标准化评价方案评价LEIA测定血浆NGAL的不精密度、回收率、线性范围、抗干扰性、稳定性等指标。同时测定86例2型糖尿病(T2DM)患者(其中包括41例糖尿病肾病(DN)患者)、40名体检健康者(正常对照组)的血浆NGAL水平。

LEIA测定血浆NGAL低、高水平的批内变异系数(CV)分别为3.76%、1.79%;日间CV分别为6.62%、3.45%。平均回收率为97.3%~104.6%;在0~5 000 μg/L内线性良好,线性范围内偏差<8%。与进口同类试剂盒(粒子增强免疫比浊法)具有高度相关性(R²=0.996 6),两种检测方法在200和700 μg/L处的偏倚分别为3.66和11.79 μg/L,均满足厂家规定的要求。总胆红素≤600 μg/L、血红蛋白≤10 g/L、维生素C≤0.6 g/L、甘油三酯≤15 mmol/L时对LEIA测定血浆NGAL均无明显干扰;试剂在仪器2~8 ℃的条件下放置,至少可保存稳定35 d;20名健康体检者血浆NGAL水平均处于厂家声明的参考区间内。正常对照组、T2DM组和DN组血浆NGAL水平呈逐步增高趋势,各组间差异均有统计学意义(P均<0.01)。血浆NGAL与血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)、肌酐(Cr)呈正相关(相关系数分别为0.58、0.43,P均<0.01)。

LEIA测定血浆NGAL具有较高的灵敏度和精密度,所测结果准确可靠,能直接在自动生化分析仪上使用,操作简便、快速,适用于大批量测定。

基础研究·论著

不同基因型金黄色葡萄球菌临床分离株体外侵袭力差异性研究

王俊瑞, 魏常梅, 塔拉, 崔晶花, 杜小莉, 韩艳秋

2015, 30(7):  740-746.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.017

摘要 ( 221 )   HTML ( 0)   PDF (926KB) ( 533 )  

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分析不同基因型金黄色葡萄球菌临床分离株体外侵袭能力的差异,为进一步阐明金黄色葡萄球菌致病机制及防控医院感染提供新的实验依据。

采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型法(MLST)对43株金黄色葡萄球菌临床分离株进行分子分型,采用抗菌药物保护试验和流式细胞内化试验检测不同基因型金黄色葡萄球菌体外侵袭能力。

按照80%相似度为计算依据,43株金黄色葡萄球菌共分12个PFGE基因型,2个优势型(Ⅰ和Ⅱ型)分别占25.6%(11/43)和34.9%(15/43),其它型别为少见型,占39.5%(17/43)。体外药物敏感性试验结果显示,Ⅰ型和少见型主要为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)(85.7%,24/28),而Ⅱ型均为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)(100.0%,15/15)。MLST结果显示,Ⅱ型菌株为ST-239型,Ⅰ型及其它型菌株ST型不定。抗菌药物保护试验结果显示,侵袭能力最强的3株菌的侵入率分别为3.27%、3.15%和3.09%,侵袭力最弱的3株菌的侵入率分别为0.22%、0.24%和1.16%。Ⅰ型菌株和Ⅱ型菌株比较差异不明显(P>0.05);Ⅰ型和Ⅱ型菌株体外侵袭力均显著高于少见型(P均<0.01)。

不同基因型金黄色葡萄球菌体外侵袭力差异显著,优势克隆株特别是ST-239型MRSA菌株显示出较强的体外侵袭能力。金黄色葡萄球菌分离率较高的科室应对该克隆株给予更多关注,加强感染防控措施,降低其医院内传播及感染率。

实验室管理·论著

探析利用“自上而下”方法对8项特种蛋白指标定量检测不确定度的评估

王雁勇, 曹辉彩, 蔡会欣, 戴冬雪, 马雅文

2015, 30(7):  747-749.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.018

摘要 ( 234 )   HTML ( 1)   PDF (678KB) ( 327 )  

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通过分析8项特种蛋白指标定量检测不确定的评估,探析其价值与意义。

收集本实验室2013年4月至9月共6个月的室内质量控制(简称室内质控)数据及2011年至2013年6次参加卫生部临床检验中心特种蛋白室间质量评价(简称室间质评)的结果,参照《医学实验室——测量不确定度的评定与表达》,采用“自上而下”方法评定免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM、补体C3、补体C4、抗链球菌溶血素O(ASO)、类风湿因子(RF)、 C反应蛋白(CRP)的相对测量不确定度(u_crel)和相对扩展测量不确定度(u_rel)。

经统计发现,8项检测指标的u_rel存在明显的差异,C4的u_rel最大为16.01%,与美国临床实验室改进修正法案(CLIA'88)的允许总误差比较,除C4外,其它7项指标均处于允许范围之内。

利用室内和室间质控数据,采用“自上而下”方法对免疫速率散射比浊法测定特种蛋白的测量不确定度的评价,方法简单、方便,能在进行测量不确定度评定的同时充分了解实验室检测系统分析性能,具有很好的临床应用价。

综述与讲座

MALDI-TOF MS在临床微生物样本直接检测中的应用

陈飞, 胡玢婕, 赵虎

2015, 30(7):  750-756.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.019

摘要 ( 221 )   HTML ( 2)   PDF (733KB) ( 582 )  

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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是近年来发展起来的一项新兴的微生物鉴定技术,与传统的生化表型鉴定方法和分子生物学方法相比,MALDI-TOF MS具有操作简单、快速、准确和经济的特点。鉴于其对培养出的纯菌落鉴定的准确性和稳定性,MALDI-TOF MS也可被应用于临床样本的直接检测,包括阳性血培养瓶、中段尿、脑脊液等。本文主要就MALDI-TOF MS 用于直接检测临床样本的原理、流程、鉴定效能及其研究进展等方面做一综述。

临床微生物实验室细菌分离接种技术的研究进展

王敬华, 葛平, 陈蓉, 徐蓉, 刘学杰

2015, 30(7):  757-760.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.020

摘要 ( 217 )   HTML ( 2)   PDF (689KB) ( 717 )  

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近年来,自动化研究方兴未艾,出现了商品化的自动化、半自动化微生物接种仪,如Robobact system全自动微生物分离培养系统、 EasySpiral Pro全自动螺旋接种仪以及PREVI Isola自动化微生物接种仪等。然而临床实践表明,目前尚没有比较理想的自动化接种仪,特别是能够准确定量接种的自动化仪器,致使现有商品化自动接种仪在临床实验室难以推广。同时,建立细菌培养定量检验方法,进一步统一和标准化操作程序,已成为临床微生物检验质量控制的发展趋势。基于伯努利原理和流体力学,国内学者设计研发的多通道自动化微生物接种仪,有望建立基于自动化接种技术的细菌培养定量检验方法。现就临床微生物实验室细菌分离接种技术的发展现状、趋势和研究进展进行综述。

检验项目的临床应用

激素检测在女性不孕症诊治中的临床应用

张春燕, 潘柏申

2015, 30(7):  761-765.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.021

摘要 ( 254 )   HTML ( 1)   PDF (809KB) ( 492 )  

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女性激素水平的实验室检测在不孕症的诊治中,特别是在体外受精(IVF)的周期中起着重要作用。这些激素包括卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、抗苗勒氏管激素(AMH)、抑制素B(Inh B)、孕酮和黄体生成素(LH)。血清FSH、E2 和AMH通常作为评估女性卵巢储备功能的检测项目。E2通常也被用于监测控制性超排卵(COH)中的卵泡发育。除了用于评估卵巢储备功能以外,AMH还可在诱导排卵过程中作为对促性腺激素反应的预测因子。Inh B不能被视为一个评估卵巢储备功能的可靠标志物。促性腺激素反应不良的患者Inh B水平一般较低。孕酮是一个检测卵巢功能的简单指标。孕酮和LH在预测IVF是否成功方面的价值存在争论。

经验交流

线性探针法与传统药敏法筛查耐多药肺结核符合性的研究

刘然, 郭春梅, 刘佃香, 李玉梅

2015, 30(7):  766-767.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.022

摘要 ( 333 )   HTML ( 0)   PDF (663KB) ( 435 )  

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VIDAS荧光免疫分析仪检测血清肌钙蛋白Ⅰ的分析性能评价

陈佩, 王奇军, 罗建平

2015, 30(7):  768-769.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.023

摘要 ( 187 )   HTML ( 2)   PDF (723KB) ( 404 )  

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一种单克隆多抗体ELISA测定降钙素原方法的建立及其临床价值的探讨

翟栓柱, 杨葳, 严俊, 刘娟娟, 郁彭, 周泽奇

2015, 30(7):  770-771.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.024

摘要 ( 210 )   HTML ( 2)   PDF (670KB) ( 345 )  

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病例报道

16S rRNA测序法鉴定致皮下软组织感染的毗邻颗粒链菌一例

卫颖珏, 杨海慧, 秦娟秀

2015, 30(7):  772-773.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.025

摘要 ( 161 )   HTML ( 0)   PDF (663KB) ( 464 )  

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痰标本中检出一例水生拉恩菌

方毅, 赵付菊, 张景皓, 赵虎

2015, 30(7):  774-775.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.026

摘要 ( 169 )   HTML ( 1)   PDF (722KB) ( 465 )  

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一例血培养脆弱拟杆菌的鉴定过程及思考

李慧敏, 马清光

2015, 30(7):  775-776.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.027

摘要 ( 189 )   HTML ( 1)   PDF (666KB) ( 589 )  

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