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2015年 第30卷 第6期    刊出日期：2015-06-30

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专家论坛

再谈糖化血红蛋白

居漪

2015, 30(6):  547-552.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.001

摘要 ( 598 )   HTML ( 6)   PDF (821KB) ( 644 )  

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

糖化血红蛋白(HbA_1c)作为被英国前瞻性糖尿病研究(UKPDS)、美国糖尿病控制和并发症试验(DCCT)两大流行病学调查结果证实的与糖尿病及其并发症密切相关的重要标志物,在临床上得到了越来越广泛的应用。但是,HbA_1c实验室检测技术的多样性导致其检测结果差异较大,无法满足临床诊治的需求。随着国际临床化学与医学实验室联盟(IFCC)和美国临床化学协会(AACC)HbA_1c标准化工作的开展,实验室HbA_1c的检测质量得到了显著提升。2010年起HbA_1c先后被美国糖尿病协会(ADA)、国际糖尿病联盟(IDF)、世界卫生组织(WHO)等组织列入糖尿病诊断标准。在我国,HbA_1c临床应用、检测质量管理和标准化工作启动相对较晚,但工作进展的速度和成绩也是有目共睹的。虽然暂时未被列入中国糖尿病诊断指南中,相信只要团结协作,必将开创出我国自己的HbA_1c标准化之路,更好地为临床医生和糖尿病患者服务。

临床应用研究·论著

IL-17和IL-23在成人原发性肾病综合征患者中的变化及意义

周韵娇，张丽红，李鹏，叶鲜妩，牛建英

2015, 30(6):  554-558.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.05.002

摘要 ( 216 )   HTML ( 1)   PDF (559KB) ( 405 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

目的　观察白细胞介素17(IL-17)和白细胞介素23(IL-23)在成人原发性肾病综合征(PNS)中的变化,探讨其在PNS发生及发展中的作用及临床意义。方法　选取初次就诊并激素治疗有效的PNS住院患者35例(实验组),按常规剂量给予强的松治疗;选取同期健康体检者20名作为对照组。检测对照组、PNS患者治疗前和完全缓解时的外周血T细胞亚群及血清和24 h尿液中IL-17、IL-23、白细胞介素6(IL-6)水平,并分别与24 h尿蛋白定量进行相关分析。结果　与对照组相比,PNS患者外周血CD3⁺、CD3⁺CD4⁺细胞数减少(P<0.05),血清IL-17、IL-6和24 h尿液中IL-17、IL-23、IL-6水平明显增加(P<0.05);经治疗,PNS患者CD3⁺、CD3⁺CD4⁺细胞数较治疗前明显增加(P<0.05),24 h尿液中IL-17、IL-23、IL-6水平较治疗前明显降低(P<0.05)。PNS患者血清IL-17、IL-23水平和24 h尿液IL-17、IL-23水平均与24 h尿蛋白定量呈显著正相关(P均<0.01)。结论　IL-17和IL-23可能与PNS患者大量蛋白尿的形成有关;激素治疗能够显著改善PNS患者细胞免疫功能紊乱和T细胞亚群失衡;监测PNS患者血清和24 h尿液中IL-17和IL-23的水平,可能有助于病情的判断和指导临床治疗。

Logistic回归和ROC曲线分析血清DKK1、GP73和AFP在原发性肝癌诊断中的价值

宗迎迎, 徐浩, 许伟, 顾玉明, 祖茂衡, 万豪光, 吴康

2015, 30(6):  559-563.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.003

摘要 ( 385 )   HTML ( 2)   PDF (669KB) ( 470 )  

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应用Logistic回归和受试者工作特征(ROC)曲线探讨血清Dickkopf同源物1(DKK1)、高尔基体糖蛋白73(GP73)和甲胎蛋白(AFP)对原发性肝癌(PHC)的诊断价值。

采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定81例PHC、50例慢性肝炎(CH)、50例肝硬化(LC)患者和50名健康对照(HC)者血清DKK1、GP73浓度,采用电化学发光免疫法(ECLIA)测定AFP浓度,建立PHC诊断的统计模型即综合预测模型,应用Logistic回归和ROC曲线进行分析。

PHC组DKK1水平[5.29(4.27~7.45)ng/mL]明显高于CH组[4.11(3.82~4.52)ng/mL]、LC组[3.66(3.61~4.15)ng/mL]和HC组[3.42(3.28~3.68)ng/mL](P<0.01)。PHC组GP73水平[(215.44±68.66)ng/mL]明显高于CH组[(121.02±49.10)ng/mL]、LC组[(168.39±37.91)ng/mL]和HC组[(57.36±19.94)ng/mL](P<0.05)。DKK1、GP73、AFP诊断PHC的敏感性分别为71.6%、77.8%和58.0%,特异性分别为90.0%、86.7%和78.7%。综合预测模型的敏感性和特异性为87.7%和90.0%。AFP、DKK1、GP73的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.76、0.86、0.87,综合预测模型AUC为0.93,与AFP、DKK1、GP73比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。

DKK1、GP73可以作为诊断PHC的血清标志物,与AFP联合检测可提高诊断效能;Logistic回归结合ROC曲线分析简单、有效,可用于PHC多指标联合诊断的分析评价。

不同程度阿尔茨海默病患者血清可溶性Fas及其配体水平的变化

陈同伟

2015, 30(6):  564-566.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.004

摘要 ( 299 )   HTML ( 1)   PDF (359KB) ( 447 )  

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探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清可溶性Fas(sFas)及其配体(sFasL)水平的变化。

选取AD患者100例,以54例老年疾病(包括糖尿病17例、高血压18例、高血脂15例、其它内分泌疾病4例)患者和46名健康体检者分别作为老年疾病对照组和正常对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有受检者血清sFas、sFasL水平,使用临床痴呆评定量表(CDR)、简易智能精神状态量表(MMSE)、Hachinski缺血指数量表(HIS)评定 AD患者认知功能。

AD患者血清sFas、sFasL水平明显高于老年疾病对照组和正常对照组(P<0.01);随着病程加重,其血清sFas 、sFasL水平逐渐升高。AD患者血清sFas与年龄、病程和MMSE评分呈正相关(r=0.856、0.834、0.799, P<0.01),与Hachinski评分呈负相关(r=-0.714,P<0.01);血清sFasL与年龄、病程呈正相关(r=0.863、0.857,P<0.01),与MMSE评分、HIS评分呈负相关(r=-0.801、-0.745,P<0.01)。

AD患者存在血清sFas 、sFasL水平异常,提示AD患者在发病过程中可能存在神经细胞凋亡,且血清sFas 、sFasL水平可能与患者的智能水平、脑缺血程度有关。

5种中药颗粒剂与水煎剂对5种耐药菌株的体外抑菌作用比较

李蔼文, 谭俊青, 王康椿, 黄双旺, 周兵, 刘启波

2015, 30(6):  567-570.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.005

摘要 ( 231 )   HTML ( 1)   PDF (492KB) ( 560 )  

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比较5种中药(黄芩、连翘、薄荷、蒲公英、苦参)颗粒剂与水煎剂对5种临床分离耐药菌株的体外抑菌效果。

根据中药抗耐药菌的相关研究,选取5种有抑菌效果的中药颗粒剂与水煎剂,取血平板分离的5种临床耐药菌株[包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及鲍曼不动杆菌],进行常规中药药敏纸片琼脂扩散法,测定抑菌圈直径,比较水煎剂和颗粒剂的抑菌效果。

5种中药对5种耐药菌的抑菌强度不同,黄芩抑菌效果最好。同一种中药颗粒剂与水煎剂相比:对于MRSA,黄芩、连翘、薄荷、蒲公英、苦参2种剂型均有抑菌效果,差异无统计学意义(P>0.05);对于耐药性铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌,黄芩、连翘、薄荷2种剂型均有抑菌效果,差异无统计学意义(P>0.05);对于大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌,黄芩的2种剂型均有抑菌效果,差异无统计学意义(P>0.05)。

同等浓度的黄芩、连翘、薄荷、蒲公英、苦参,颗粒剂和水煎剂抑菌效果无明显差异。

血栓弹力图对经皮冠状动脉介入治疗患者预后的预测作用

顾梅秀, 孙林, 王蓓丽, 任孝慈, 姚珂, 郭玮, 潘柏申

2015, 30(6):  571-574.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.006

摘要 ( 229 )   HTML ( 1)   PDF (510KB) ( 519 )  

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评估经皮冠状动脉介入治疗(PCI)患者术后血栓弹力图(TEG)指标对其预后的预测作用。

收集115例PCI患者资料,根据其TEG报告中二磷酸腺苷(ADP)诱导的最大血块强度(MA-ADP)将患者分为MA-MDP<50mm组和≥50mm组,随访观测其1年后心血管不良事件和支架再梗死及再狭窄的发生率。

根据MA-ADP分组的2组患者的临床基本情况差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示MA-ADP是PCI术后患者心血管不良事件复发风险的危险因素[OR=3.547(95% CI: 1.10311.412), P=0.034]。与MA-ADP正常(<50mm)的患者相比,MA-ADP升高(≥50mm)的患者的心血管不良事件和支架内再梗死的发生率均明显升高(P均<0.05)。

MA-ADP对PCI术后患者的预后有预测作用,MA-ADP=50mm可作为PCI术后患者心血管不良事件复发风险的判断切点。

丙型肝炎患者HCV RNA载量、肝脏纤维化指数与25羟基维生素D水平的相关性分析

宋斌斌，周琰，吴文浩，吴炯，张春燕，王蓓丽，郭玮，潘柏申

2015, 30(6):  575-580.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.05.007

摘要 ( 172 )   HTML ( 2)   PDF (1016KB) ( 445 )  

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目的　分析丙型肝炎（简称丙肝）患者血清25羟基维生素D[25（OH）D]水平和病毒载量、肝脏纤维化程度之间的关系。方法　收集271例丙肝患者和218名表面健康人（正常对照组）的血清标本，定量检测血清25（OH）D浓度、HCV RNA病毒载量以及Fibrotest分级标准中的5项指标[包括α2巨球蛋白（α2M）、触珠蛋白（HPT）、载脂蛋白A1（apo A1）、总胆红素（TBil）和γ-谷氨酰基转移酶（GGT）]。根据Fibrotest分级标准判断丙肝患者的肝纤维化程度。比较丙肝组与正常对照组之间25（OH）D浓度的差异；比较HCV RNA阳性组与阴性组25（OH）D浓度的差异；分析HCV RNA阳性组HCV RNA载量与25（OH）D浓度的相关性。根据25（OH）D浓度进行四分位分组，分析25（OH）D浓度与肝脏纤维化指数（Fibrotest分级）的关系。结果　丙肝组25（OH）D浓度为（49.31±1.39）nmol/L，明显低于正常对照组[（60.42±1.34）nmol/L，P＜0.01]。丙肝组中25（OH）D缺乏（＜50nmol/L）和严重缺乏（＜25nmol/L）的比例为41.33%（112/271）和14.40%（39/271），明显高于正常对照组[27.98%（61/218）和3.67%（8/218）]（P＜0.01）。丙肝患者中HCV RNA阳性组与HCV RNA阴性组25（OH）D浓度分别为48.98±21.59、（49.89±25.27）nmol/L，两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。线性相关分析显示HCV RNA阳性组病毒载量对数值与其25（OH）D浓度无相关性（r=0.056，P=0.412）。四分位25（OH）D最低浓度分位和最高浓度分位患者的Fibrotest分级F0-F1级、F1-F3级和F3-F4级的比例差异无统计学意义（P＞0.05）；无肝纤维化、轻度肝纤维化、重度肝纤维化患者25（OH）D浓度分别为49.12±5.80、48.27±4.90和（49.89±8.20）nmol/L，3组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　丙肝患者体内25（OH）D浓度明显低于健康对照人群，建议对该类人群进行维生素D的补充。丙肝患者25（OH）D浓度与HCV RNA载量及肝纤维化的严重程度并不明显相关。

缺血修饰白蛋白在急性冠状动脉综合征早期诊断中的应用价值研究

张平, 周洪兴, 白阳, 徐哲, 孙颖昕, 王新, 王苏建, 张红

2015, 30(6):  581-584.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.008

摘要 ( 228 )   HTML ( 0)   PDF (557KB) ( 500 )  

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观察急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清缺血修饰白蛋白(IMA)水平的变化,探讨IMA在ACS早期诊断中的价值。

连续监测97例ACS患者[包括急性心肌梗死(AMI)43例、不稳定型心绞痛(UAP)54例]急性胸痛发作后2、6、12、24、48 h血清IMA、肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平的变化,并与42例疑似ACS最终确诊排除诊断的患者(对照组)比较;评价各项标志物在ACS早期诊断中的应用价值。

UAP及AMI患者发病后2 h血清IMA水平明显高于对照组(P<0.05),AMI患者发病12 h时达高峰,24 h时下降到和对照组水平基本持平。UAP患者CK-MB及cTnT各检测时间点与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示AMI患者发病2 h时,IMA、CK-MB、cTnT诊断AMI的曲线下面积(AUC)分别为0.812、0.781、0.648。

IMA可作为ACS心肌缺血的敏感标志物,可用于早期诊断AMI。

急性心肌梗死患者血清脂联素检测的临床意义

蒋小红

2015, 30(6):  585-587.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.009

摘要 ( 269 )   HTML ( 3)   PDF (356KB) ( 268 )  

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探讨急性心肌梗死(AMI)患者血清脂联素(APN)检测的临床意义。

选择AMI患者、不稳定型心绞痛(UAP)患者、稳定型心绞痛(SAP)患者各40例,以40名健康体检者作为正常对照组,比较各组血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)及APN水平;根据APN中位数将AMI患者分为高APN组和低APN组,比较2组主要心血管事件发生情况。

正常对照组、SAP组、UAP组和AMI组血清APN水平依次降低,hs-CRP和cTnI依次升高,各组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。AMI组APN水平与hs-CRP、cTnI水平均呈明显负相关(r值分别为-0.599、-0.527, P均<0.05);随访12个月,低APN组AMI患者主要心血管事件发生率明显高于高APN组(P<0.05)。

血清APN水平可能与AMI的发生、发展有关。监测血清APN水平对AMI诊治及预后判断具有一定的临床意义。

尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在糖尿病肾病早期诊断中的作用

蔡雷鸣, 厉倩, 谭龙益

2015, 30(6):  588-590.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.010

摘要 ( 318 )   HTML ( 2)   PDF (375KB) ( 530 )  

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探讨尿中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白(NGAL)检测在糖尿病肾病(DN)诊断中的价值。

收集糖尿病患者120例,根据24 h尿白蛋白排泄率(UAER)分为正常白蛋白尿(NA)组46例、微量蛋白尿(MA)组39例和临床肾病(CA)组35例;同期随机选取健康体检者50名作为正常对照(NC)组。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清NGAL浓度,同时用碱性苦味酸法检测血清肌酐(SCr)浓度,用胶乳增强免疫浊度法检测血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)浓度,并进行比对分析。

NA组尿NGAL水平明显高于NC组(P<0.05),而血清Cys C、SCr浓度2组之间差异无统计学意义(P>0.05)。MA组尿NGAL、血清Cys C水平明显高于NC组(P<0.05),SCr浓度2组之间差异无统计学意义(P>0.05)。CA组尿NGAL、血清Cys C、SCr水平均明显高于NC组(P<0.05)。

尿NGAL是反映糖尿病早期肾损伤的良好指标。

慢性心力衰竭患者BNP、hs-CRP水平检测的临床意义

原永明, 王慧, 尹良平, 璩斌

2015, 30(6):  591-592.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.011

摘要 ( 241 )   HTML ( 1)   PDF (288KB) ( 408 )  

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探讨B型钠尿肽(BNP)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)联合检测对慢性心力衰竭(CHF)患者的价值。

将194例CHF患者按美国纽约心脏病学会(NYHA)心功能分级标准分为Ⅰ级38例、Ⅱ级56例、Ⅲ级59例、Ⅳ级41例,以60名健康体检者作为正常对照组,检测各组血清BNP及hs-CRP水平。

CHF组hs-CRP及BNP均明显高于正常对照组(P<0.05、P<0.01)。CHF组NYHAⅠⅣ级BNP水平逐渐升高,各级间比较差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01);hs-CRP各级间差异均无统计学意义(P>0.05)。

检测CHF患者血清BNP和hs-CRP对了解CHF病情严重程度、预后判断具有一定的指导意义。

甲状腺功能减退患者血清同型半胱氨酸水平监测的意义

陈宝炳, 陈松, 滕勇, 朱伊钒

2015, 30(6):  593-594.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.012

摘要 ( 323 )   HTML ( 2)   PDF (279KB) ( 425 )  

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探讨监测甲减患者血清同型半胱氨酸(Hcy)水平的意义。

分别用酶法测定35例甲状腺功能减退患者(简称甲减组)及35名正常体检者(正常对照组)Hcy、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、维生素B12(Vit B12)和叶酸(FA)水平。

甲减组Hcy及LDL-C水平明显高于正常对照组(P<0.01),FA水平明显低于正常对照组(P<0.01);而Vit B12两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。

甲减患者的高Hcy血症可能是其易并发心血管疾病的一个因素。监测甲减患者的Hcy水平对预防心血管疾病的发生有一定的意义。

技术研究与评价·论著

上海地区人乳头瘤病毒基因芯片法分型检测的临床意义

缪应新, 甘洁民, 陈洁, 施泓, 姜文容, 赵虎

2015, 30(6):  595-598.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.013

摘要 ( 391 )   HTML ( 0)   PDF (434KB) ( 456 )  

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了解上海地区人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及其亚型分布频率,探讨HPV感染亚型、单一感染和多重感染与宫颈上皮内病变的关系。

选取846例门诊及体检妇女,收集宫颈上皮脱落细胞,采用基因芯片技术进行HPV 26种亚型的分型检测,同时进行超薄液基细胞学检测(TCT),对细胞学结果为较高级别病变的妇女进一步做阴道镜活检。

846例研究对象中HPV总阳性率达29.55%,大多为单一高危型HPV感染;共检出HPV亚型24种,检出率排在前6位的是HPV52、58、16、53、51、55;HPV18、68和59等在单一感染和多重感染中的出现频率不一致;在高级别宫颈上皮内病变组[包括宫颈鳞状细胞癌或腺癌、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)3、CIN2,简称为≥CIN2组]中共检出13种高危型HPV和1种低危型HPV,HPV16在≥CIN2组中的感染率为46.88%,远远高于低级别宫颈上皮内病变组(包括不明意义的非典型鳞状细胞增生、正常及CIN1,简称为<CIN2组)(9.63%, P<0.05)。

上海地区HPV感染亚型以HPV52、58、16为最常见,但在≥CIN2组则以HPV16为最多,HPV16感染是最重要的导致高级别宫颈上皮病变的危险因素。

一种肺炎链球菌常见血清型多重PCR分型方案的评估

潘芬, 赵声远, 秦惠宏, 祝俊英, 肖淑珍, 张泓

2015, 30(6):  599-602.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.014

摘要 ( 227 )   HTML ( 0)   PDF (470KB) ( 378 )  

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评估一种肺炎链球菌常见血清型多重聚合酶链反应(PCR)分型方案的分型能力。

以传统荚膜肿胀试验为参考,采用多重PCR分型方案对50株肺炎链球菌进行血清分型。

50株肺炎链球菌经传统荚膜肿胀试验分为19F型9株、 19A型9株、 23F型9株、 6A/B型9株、 14型9株和15B/C型5株;而多重PCR分型方案结果为 19F型8株、 19A型10株、 23F型9株、 6A/B型9株、 14型10株和15B/C型4株,2种方法符合率为96%,Kappa值为0.952。

多重PCR分型技术与常规方法一致性好,具有简便、快速、成本相对较低等优点,能用于监测临床肺炎链球菌流行血清型。

科宝Palio 300型尿生化分析系统检测5种尿微量蛋白的性能评估

黄燕, 徐晓嵘, 张珏

2015, 30(6):  603-606.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.015

摘要 ( 422 )   HTML ( 4)   PDF (820KB) ( 592 )  

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探讨科宝Palio 300型尿全自动生化分析仪(简称Palio 300)对于5种尿微量蛋白项目的检测性能。

同时采用Palio 300和西门子BN-prospec特定蛋白仪(简称BN-prospec)检测120例患者尿微量白蛋白(mAlb)、尿α₁微球蛋白(α₁-MG)、尿β₂微球蛋白(β₂-MG)、尿转铁蛋白(TRF)、尿免疫球蛋白G(IgG),比较各项测定结果。按照项目分别配置中值及高值混合尿液,充分混匀后每份样本在Palio 300上重复测定20次,计算这5个项目的变异系数(CV)。

Palio 300上5个项目除β₂-MG CV为8.66%外,其余4项CV均<6.00%;且与BN-prospec的检测结果一致性较好,5个项目的r均>0.9(其中mAlb为0.953、 α₁-MG为0.915、β₂-MG为0.927、TRF为0.918、IgG为0.935, P均<0.001)。

Palio 300具有较好的重复性,在测定5种尿mAlb项目时,与BN-prospec相关性良好。

基础研究·论著

devR基因调控的结核分枝杆菌细胞毒性的研究

旦正尖措, 马越云, 周磊, 付晓蕊, 苏明权, 郝晓柯

2015, 30(6):  607-612.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.016

摘要 ( 400 )   HTML ( 2)   PDF (1147KB) ( 451 )  

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阐明devR基因表达对分枝杆菌生长及感染能力的影响。

确认野生型牛分支杆菌卡介苗(M.bovis BCG,简称BCG)、devR基因敲除的BCG菌株(简称ΔdevR)和devR基因回补的BCG菌株(简称devR.com) 的devR序列正确;在不同时间点测定600 nm下的吸光度(A)值,绘制3种细菌的生长曲线;以感染复数(MOI)=10感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549(简称A549细胞)和小鼠巨噬细胞Raw264.7(简称Raw264.7细胞),分别采用流式细胞仪和酶联免疫吸附试验于0、24、48、72 h测定细胞凋亡率和乳酸脱氢酶(LDH)释放水平;采用实时定量PCR(RT-PCR)测定凋亡相关基因bcl-2和bad的表达水平。

ΔdevR菌株在早期(培养2~10 d)生长较BCG菌株和 devR.com菌株明显加快(P<0.01)。ΔdevR菌株感染A549细胞和Raw264.7细胞后,细胞的凋亡和坏死效应明显增加,与BCG菌株和devR.com菌株比较差异有统计学意义(P<0.05)。3种菌株感染A549细胞均导致凋亡相关基因bcl-2表达上调,且ΔdevR菌株感染组bcl-2基因表达明显高于BCG和devR.com菌株感染组;3种菌株感染Raw264.7细胞均导致凋亡相关基因bad表达上调,且ΔdevR菌株感染组bad基因表达明显高于BCG和devR.com菌株感染组。

devR基因敲除的BCG菌株毒力明显增强。

铜绿假单胞菌16S rRNA甲基化酶基因和氨基糖苷修饰酶基因的研究

彭敬红, 侯彦强, 谢多双, 刘军, 郑蓉

2015, 30(6):  613-616.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.017

摘要 ( 258 )   HTML ( 0)   PDF (423KB) ( 282 )  

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了解氨基糖苷类抗菌药物耐药的铜绿假单胞菌16S rRNA甲基化酶基因和氨基糖苷修饰酶基因的携带情况,探讨铜绿假单胞菌对氨基糖苷类药物的耐药机制。

收集临床分离的氨基糖苷类抗菌药物耐药的铜绿假单胞菌35株,采用VITEK 2 Compact 全自动微生物分析系统进行鉴定及体外药物敏感性试验,聚合酶链反应(PCR)检测arm-A、rmt-A、rmt-B、rmt-C、rmt-D 5种16S rRNA甲基化酶基因和aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅰb、aac(6')-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ 6种氨基糖苷修饰酶基因。

对氨基糖苷类药物耐药的铜绿假单胞菌同时对多种其他抗菌药物耐药,仅碳青霉烯类的亚胺培南耐药率较低,为5.7%。21 株检出rmt-B 16S rRNA甲基化酶基因,占60.0%;30株检出氨基糖苷修饰酶基因,占85.7%,其中28 株检出aac(3)-Ⅱ基因,占80.0%,18株检出ant(3″)-Ⅰ基因,占51.4%,其余8种基因未检出。

在铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗菌药物耐药的菌株中,检测出rmt-B 16S rRNA甲基化酶基因和aac(3)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ氨基糖苷修饰酶基因,铜绿假单胞菌多重耐药现象严重。

产志贺毒素大肠埃希菌生物被膜形成能力与毒力基因表达的关系

解范迪, 牛术孟, 施锦杰, 张雯雁

2015, 30(6):  617-621.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.018

摘要 ( 206 )   HTML ( 1)   PDF (582KB) ( 399 )  

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探讨临床腹泻患者产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)生物被膜形成能力与致病毒力基因表达的关系。

收集从520例临床腹泻患者标本中检测分离到的STEC,进行体外药敏试验和生物被膜形成能力定量分析;应用多重聚合酶链反应(PCR)检测产志贺毒素相关基因stx1、stx2,实时定量逆转录PCR(RT-PCR)检测eae、ehxA基因表达。以健康体检人群粪便标本中分离的98株大肠埃希菌作为对照菌株。

从520例腹泻患者标本中分离出328株大肠埃希菌,其中stx1、stx2基因阳性菌(即STEC)78株(23.8%)。78株STEC中产生物被膜菌57株(73.1%),eae和ehxA基因的相对表达量分别为6.57(2.82~27.8)、1.81(1.07~5.28);不产生物被膜菌21株(26.9%),eae和ehxA基因的相对表达量分别为3.41(0.96~12.1)、1.76(0.89~6.06);另分离出副溶血弧菌18株[其中产生物被膜菌10株(55.6%)]、奇异变形杆菌3株。98株对照菌中产生物被膜菌39株(39.7%),eae和ehxA基因的相对表达量分别为1.02(0.86~3.47)、1.03(0.88~3.03)。产生物被膜STEC对氨苄西林/舒巴坦、复方磺胺甲噁唑、环丙沙星的耐药率明显高于不产生物被膜STEC和对照菌株。

STEC生物被膜形成率明显高于健康人群定植大肠埃希菌,产生物被膜STEC的eae基因表达明显提高;ehxA基因表达与不产生物被膜的STEC比较无明显变化。

质粒介导的革兰阴性杆菌磷霉素耐药基因的研究

蔡红妹, 唐瑜, 蒋晓飞

2015, 30(6):  622-625.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.019

摘要 ( 288 )   HTML ( 10)   PDF (455KB) ( 428 )  

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了解质粒介导的磷霉素耐药基因在革兰阴性杆菌中的流行情况,并分析其与耐药性的关系。

收集临床分离的133株革兰阴性杆菌,其中大肠埃希菌52株(39.1%)、铜绿假单胞菌36株(27.1%)、肺炎克雷伯菌31株(23.3%)、鲍曼不动杆菌14株(10.5%)。采用K-B纸片法进行药敏试验,通过聚合酶链反应(PCR)检测质粒介导的磷霉素耐药基因fosA、fosA3、fosC2,分析其与耐药性的关系。

大肠埃希菌对磷霉素的耐药率为9.6%(5/52),铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌的耐药率分别为36.1%(13/36)、74.2%(23/31)和64.3%(9/14)。磷霉素耐药基因fosA、fosA3阳性各5株,均为大肠埃希菌或肺炎克雷伯菌,未检出fosC2基因。10株质粒介导磷霉素耐药基因阳性菌株中,7株对磷霉素表现出耐药,其余3株表现为敏感。

铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌对磷霉素的耐药率均远高于大肠埃希菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌发现有fosA和fosA3基因,铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌未见,尚不能解释表型试验结果,因此有必要进行更全面的耐药基因研究。

耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶、整合酶基因型研究

卜劲松, 王勇

2015, 30(6):  626-630.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.020

摘要 ( 224 )   HTML ( 0)   PDF (1605KB) ( 339 )  

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研究碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶、整合酶基因型情况。

收集93株碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌和16株碳青霉烯类敏感的鲍曼不动杆菌,采用改良Hodge实验检测碳青霉烯酶,EDTA协同试验检测金属β-内酰胺酶;采用聚合酶链反应(PCR)扩增和测序分析碳青霉烯酶和整合子基因。

耐药株碳青霉烯酶表型检测阳性率为62.4%,金属酶表型检测均为阴性;PCR结果显示耐药菌中OXA-23、Int1检出率为100%,OXA-51检出率为96.8%,OXA-58检出率为1.1%,未检出OXA-24、VIM、IMP和Int2,敏感株除Int1检出率为37.5%外,其余基因均未检出。

临床分离的碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌主要携带OXA-23、OXA-51碳青霉烯酶基因型,并且均携带Ⅰ类整合酶基因。

蛇床子素联合顺铂对人肺癌细胞的杀伤效应及机制

程丽霞, 张本宏

2015, 30(6):  631-634.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.021

摘要 ( 234 )   HTML ( 2)   PDF (603KB) ( 450 )  

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探讨蛇床子素联合顺铂对人肺癌细胞NCI-H460的杀伤效应及机制。

采用噻唑蓝(MTT)法检测蛇床子素(50、100、200 μmol/L)、顺铂(1.5、3.0、6.0 μmol/L)及两者联合(50 μmol/L蛇床子素+1.5 μmol/L顺铂)对NCI-H460细胞增殖的影响。采用膜联蛋白(Annexin Ⅴ)/碘化丙啶(PI)染色法、二氢乙啶(DHE)染色法检测蛇床子素(50 μmol/L)、顺铂(1.5 μmol/L)及两者联合(50 μmol/L蛇床子素+1.5 μmol/L顺铂)对NCI-H460细胞凋亡及活性氧簇(ROS)的影响。用ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)进行预处理,然后检测蛇床子素(50 μmol/L)、顺铂(1.5 μmol/L)及两者联合(50 μmol/L蛇床子素+1.5 μmol/L顺铂)对NCI-H460细胞的凋亡诱导能力。以未加药物的NCI-H460细胞作为对照组。

蛇床子素和顺铂均呈剂量依赖性地抑制NCI-H460细胞的增殖。50 μmol/L蛇床子素联合1.5 μmol/L顺铂可明显抑制NCI-H460细胞的增殖并诱导其发生凋亡。 与蛇床子素及顺铂单独作用比较,二者联合作用后ROS阳性细胞明显增加(P<0.05)。与对照组(未用NAC预处理)比较,用NAC预处理过的NCI-H460细胞在用蛇床子素联合顺铂作用后产生的ROS明显降低(P<0.05),且凋亡率和对细胞增殖的抑制作用也同样明显降低(P<0.05)。

蛇床子素联合顺铂可通过诱导ROS的产生,引起人肺癌细胞NCI-H460发生凋亡。

miR-29c通过Tiam1抑制人食管鳞状细胞癌侵袭和转移的研究

褚庆华, 张婕, 孙奋勇

2015, 30(6):  635-640.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.022

摘要 ( 411 )   HTML ( 0)   PDF (1521KB) ( 523 )  

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研究微小RNA(miR)-29c通过靶向T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)基因对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭和迁移的影响。

通过细胞划痕和transwell实验观察miR-29c过表达的ESCC细胞侵袭迁移能力的变化;通过免疫印迹法和sensor reporter实验研究miR-29c对Tiam1的调控作用和靶标位点;在细胞“拯救”实验中通过免疫印迹法检测相关蛋白表达量的变化以及用免疫荧光-激光共聚焦显微镜观察细胞形态的改变,研究miR-29c抑制ESCC细胞侵袭迁移的调节机制。

细胞划痕实验和transwell实验显示miR-29c能抑制ESCC细胞的侵袭迁移;通过生物信息学方法预测miR-29c的靶基因是Tiam1;免疫印迹法和sensor reporter检测结果显示miR-29c通过与Tiam1 3'-非翻译区(UTR)结合降解Tiam1;细胞功能“拯救”实验的细胞划痕、免疫印迹法和免疫荧光结果显示miR-29c能抑制Tiam1的表达,导致激活态Rac1-三磷酸鸟苷(GTP)减少,致使细胞运动状态改变,迁移能力减弱;而人工合成的针对Tiam1的特异siRNA分子siTiam1的干涉作用能“拯救”miR-29C对ESCC细胞迁移能力的抑制。

miR-29C通过降解Tiam1 mRNA,下调了Rac1的激活水平,导致细胞运动状态变化,从而抑制ESCC细胞的侵袭迁移。

实验室管理·论著

红细胞和白细胞计数参考方法的实验初探

许蕾, 王青, 缪颖波, 宋颖, 王国飞, 诸佩超, 郭晓俊

2015, 30(6):  641-645.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.023

摘要 ( 317 )   HTML ( 1)   PDF (596KB) ( 608 )  

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应用红细胞(RBC)和白细胞(WBC)计数参考方法,建立规范的检测平台,为开展血细胞计数正确度验证试验提供技术保障。

按照国际血液学标准化委员会和中华人民共和国卫生行业标准(WS/T 245-2005)RBC和WBC计数参考方法要求,在Z2颗粒计数仪上分别使用S-CAL全血校准品、5C细胞质控品、浓度质控品、弱固定处理的新鲜全血标本和新鲜全血标本进行RBC、WBC等批内批间精密度、重合计数校正、稳定性和仪器间可比性等实验。

RBC、WBC和浓度质控品批内精密度CV<1%,批间精密度符合美国临床实验室标准化委员会(CLSI) H26-A2文件的要求;Z2颗粒计数仪校正RBC和WBC的重合计数偏倚<1%;弱固定处理的新鲜全血标本RBC、WBC大多可稳定5 d以上;BECKMAN-COULTER ACT diff Ⅱ血液分析仪、BECKMAN-COULTER LH-750血液分析仪、SYSMEX K-4500血液分析仪和SYSMEX XE-2100血液分析仪测定RBC、WBC与Z2颗粒计数仪的偏倚分别为≤±2%和≤±4%。

用Z2颗粒计数仪进行RBC和WBC计数的精密度、准确度、重合计数校正和弱固定处理的新鲜全血标本的稳定性均符合要求,与其他厂商的常规血液分析仪检测结果间具有可比性,为进一步开展血细胞计数正确度验证试验提供了技术保障。

综述与讲座

HIV感染疾病进程相关免疫因素研究进展

韦善求

2015, 30(6):  646-649.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.024

摘要 ( 286 )   HTML ( 0)   PDF (497KB) ( 481 )  

参考文献 | 相关文章 | 计量指标

宿主免疫应答是决定人类免疫缺陷病毒(HIV)感染疾病进展的重要因素之一。不同免疫细胞或免疫因子在疾病进程中的作用可能不一致,甚至是相反的结果。至今,人们对影响HIV感染疾病进展及临床转归的关键因素仍未解明。文章对这一领域的热点研究进行综述。

纳米场效应晶体管生物传感器在医学检测中的应用

蔡冰洁, 张国军

2015, 30(6):  650-654.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.025

摘要 ( 269 )   HTML ( 3)   PDF (1544KB) ( 1017 )  

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

通过纳米材料与生物传感元件结合来选择性地识别生物分子推动了纳米生物传感器的发展。纳米场效应晶体管生物传感器是近年来发展起来的一种新型生物传感平台,与传统的检测技术相比,它具有以下几个重要的优势,如灵敏度和选择性高、分析速度快、免标记、操作简单等。文章概述了基于石墨烯、硅纳米线和碳纳米管等纳米材料的场效应晶体管生物传感器的工作原理、制备方法及其在医学检测中的应用。

经验交流

急性心肌梗死患者甲状腺功能结果分析

袁丽莉, 袁丽艳, 郑俊中, 孙晓霞, 高秀梅, 常秀娜

2015, 30(6):  655-656.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.026

摘要 ( 213 )   HTML ( 0)   PDF (283KB) ( 378 )  

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手足口病患儿三种急性时相反应蛋白的变化

何俊英, 刘艳, 周志斌, 洪丹, 周霞

2015, 30(6):  657-658.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.027

摘要 ( 245 )   HTML ( 0)   PDF (297KB) ( 418 )  

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不规则抗体筛查试验在临床上的应用

曹雅青

2015, 30(6):  659-660.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.028

摘要 ( 261 )   HTML ( 1)   PDF (156KB) ( 373 )  

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病例报道

慢性粒细胞白血病转为AML-M6b一例报告

邓虎重, 王晓荣, 李彦涛, 石庆芳

2015, 30(6):  660-662.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.06.029

摘要 ( 291 )   HTML ( 0)   PDF (1331KB) ( 365 )  

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