检验医学 ›› 1998, Vol. 13 ›› Issue (3): 144-146.

• 肝炎病毒论著 • 上一篇    下一篇

不同核酸抽提方法对HCV-RNA检测效果的影响

黄仰; 周元平; 姚春斓; 姚集鲁   

  1. 中山医科大学附属第三医院传染科!广州; 510630
  • 收稿日期:2015-11-21 修回日期:2015-11-21 出版日期:1998-09-10 发布日期:2015-11-21

  • Received:2015-11-21 Revised:2015-11-21 Online:1998-09-10 Published:2015-11-21

摘要: 采用TEK(0.2mol/LTris-HCLpH7.6.250mmol/LEDTA,200mg/L蛋白酶K)作为裂解剂处理样本,再用无水乙醇沉淀HCVRNA作为模板,用于多聚酶链反应检测HCVRNA,该法与AGPC法及TENS法比较,由于不使用SDS,避免TaqDNA多聚酶的强抑制原,省略了酚-氯抽提这一步骤,而又达到分高纯化RNA模板的目的。经对215例抗HCV阳性血清用上述三种方法进行比较分析,结果用三种方法制备的RNA模板进行多聚酶链反应,其HCVRNA阳性率无显著性差异.但TEK法较AGPC法及TENS法操作简单、稳定、不易污染,特异性好等优点,经用加挂生物素的合成寡核苷酸探针对HCVRNA逆转录PCR扩增产物作斑点杂交,显示有很好的特异性,具有明显的实用价值,批量测定在一个工作日可完成,此法的建立为制备RNA模板提供了方法及经验,适合标本量较大的临床单位使用,值得推广应用。

关键词: 丙型肝炎病毒, 多聚酶链反应, 模板制备