3种检测乙型肝炎病毒YMDD变异方法的比较

检验医学 ›› 2012, Vol. 27 ›› Issue (7): 557-560.

3种检测乙型肝炎病毒YMDD变异方法的比较

柳文菊¹,江培学²,朱汝祥²

1.荆州市第一人民医院检验科，湖北荆州 434000；2.上海复星医学科技发展有限公司，上海 200444

收稿日期:2012-05-16 修回日期:2012-02-29 出版日期:2012-07-30 发布日期:2012-07-05
作者简介:柳文菊，女，1971年生，学士，主管技师，主要从事分子生物学研究。

Comparison on detection of YMDD mutation in hepatitis B virus by three methods

1.Department of Clinical Laboratory，Jingzhou First People′s Hospital，Hubei Jingzhou 434000，China；2.Shanghai Fosun Medical Technology Development Co.，Ltd.，Shanghai 200244，China

Received:2012-05-16 Revised:2012-02-29 Online:2012-07-30 Published:2012-07-05

摘要/Abstract

摘要： 目的　通过多种方法比较分析找到一种高灵敏的检测乙型肝炎病毒（HBV）YMDD变异的方法。方法　收集抗病毒治疗1年的慢性乙肝患者样本166例（116例采用拉米夫定治疗、50例采用替比夫定治疗），比较高温连接酶检测反应（LDR）、实时荧光聚合酶链反应（Real-time PCR）和测序3种方法检测HBV YMDD变异灵敏性。结果　LDR、Real-time PCR、测序的阳性率分别为23.49%、21.68%、19.27%。3种方法的特异性均为100%。采用拉米夫定治疗的患者中有38例变异，其中YIDD12例、YVDD26例；替比夫定只有1例YIDD变异。结论　LDR方法检测YMDD变异是非常适合临床应用的方案。YVDD变异较YIDD变异更为普遍。

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关键词: 乙型肝炎病毒, 变异, 高温连接酶检测反应, 测序

Abstract: Objective　To analyze comparatively and find a sensitive detection method for hepatitis B virus（HBV） YMDD mutation. Methods　A total of 166 samples from patients with HBV infection were collected，including 116 cases treated by lamivudine for 1 year and 50 cases treated by telbivudine for 1 year. The comparison of 3 HBV YMDD mutation detection methods real-time polymerase chain reaction（PCR），high temperature ligase detection reaction（LDR） and sequencing was analyzed. In addition，the sensitivities of the 3 methods were detected. Results　The positive rates of LDR，real-time PCR and sequencing were 23.49%，21.68% and 19.27%. The specificities of the 3 methods were 100%. In the cases treated by lamivudine，there were 38 cases with mutation（12 YIDD and 26 YVDD）. There was only 1 case with YIDD mutation in the cases treated by telbivudine. Conclusions　The LDR for detecting YMDD mutation is suitable in clinical application，and YVDD mutation is more common than YIDD mutation.

Key words: Hepatitis B virus, Mutation, High temperature ligase detection reaction, Sequencing

柳文菊;江培学;朱汝祥. 3种检测乙型肝炎病毒YMDD变异方法的比较[J]. 检验医学, 2012, 27(7): 557-560.

LIU Wenju;JIANG Peixue;ZHU Ruxiang . Comparison on detection of YMDD mutation in hepatitis B virus by three methods[J]. , 2012, 27(7): 557-560.

参考文献

[1]中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病分会.病毒性肝炎防治方案[J].中华肝脏病杂志，2000，8（6）：324-329.
[2]刘传苗，张欣欣，陆志檬.拉米夫定治疗中乙型肝炎病毒YMDD野毒株和变异株的变化[J].肝脏，2004，9（2）：73-76.
[3]陈健康，肖敏敏，冯　岚.TaqMan MGB双探针法和通用模板PCR法检测慢性乙型肝炎病毒YMDD变异的比较[J].安徽医药，2010，14（8）：954-956.
[4]邱源旺，黄利华，蒋祥虎，等.慢性乙型肝炎YMDD变异后的治疗[J].世界华人消化杂志，2009，17（29）：3034-3037.
[5]张书楠，余文辉，周大桥，等.慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒耐药基因型研究[J].国际检验医学杂志，2011，32（16）：1797-1799.
[6]何洁静，曾兰兰，杨永泉，等.慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗后出现YMDD变异的相关因素分析[J].国际检验医学杂志，2011，32（13）：1434-1435.
[7]Kobayashi S，Ide T，Sata M. Detection of YMDD motif mutations in some lamivudine-untreated asymptomatic hepatitis B virus carriers[J]. J Hepatol，2001，34（4）：584-586.
[8]Shin YM，Heo J，Kim GH，et al. Natural YMDD motif mutations of HBV polymerase in the chronic hepatitis B virus infected patients[J]. Taehan Kan Hakhoe Chi，2003，9（1）：1-9.
[9]Chen CJ，Yang HI，Su J，et al. Risk of hepatocellular carcinoma across a biological gradient of scrum hepatitis B virus DNA level[J]. JAMA，2006，295（1）：65-73.
[10]Matthews SJ. Entecavir for the treatment of chronic hepatitis B virus infection[J].Clin Ther，2006，28（2）：184-203.
[11]Lok AS，McMahon BJ. Chronic hepatitis B[J]. Hepatolohy ，2007，45（2）：507-539.
[12]Xiao Z，Xiao J，Jiang Y.A novel method based on ligase detection reaction for low abundunt YIDD mutants detection in hepatitis B virus[J].Hepatol Res，2006，34（3）：150-155.
[13]Consolandi C.High-throughput multiplex HLA-typing by ligase detection reaction（LDR） and universal array（UA） approach[J]. Methods Mol Biol，2009，496：115-127.
[14]Wang YZ，Xiao JH，Ruan LH，et al. Detection of the rtA181V/T and rtN236T mutations associated with resistance to adefovir dipivoxil using a ligase detection reaction assay[J]. Clin Chim Acta，2009，408（1-2）：70-74.

[1]	王薇, 张志新, 张传宝, 周伟燕, 王治国. 22个内分泌检验项目允许总误差、允许不精密度和允许偏移的设定[J]. 检验医学, 2023, 38(8): 707-712.
[2]	冯暄, 张庆华, 王兴, 何静, 梁济慈, 贾春暘, 蔺朋武, 朱韶华, 郝胜菊. 扩展性无创产前筛查技术在染色体拷贝数变异检测中的临床应用效果评价[J]. 检验医学, 2023, 38(8): 730-737.
[3]	韩雪, 闻柳, 宛杨. 唐氏筛查临界或高风险孕妇羊水染色体核型和基因组拷贝数变异结果分析[J]. 检验医学, 2023, 38(6): 548-552.
[4]	张楚, 王建红, 李瑞, 肖艳华, 王恒, 张品肖, 徐凝馨, 夏半半. 5 696例孕妇拓展性无创产前基因检测结果[J]. 检验医学, 2023, 38(6): 553-558.
[5]	张莹, 景丽娟, 李丽. HBV携带者外周血单个核细胞miR-138表达与病毒增殖的关系[J]. 检验医学, 2023, 38(6): 559-562.
[6]	沈蕙颖, 唐怡珺, 陈瑶, 李怀远, 王秀敏. 卡尔曼综合征1例报道并文献复习[J]. 检验医学, 2023, 38(6): 603-606.
[7]	卢小娟, 罗秋平, 汪红艳, 汪俊, 高婧, 孟伟伟. 深圳市宝安地区HBV阳性孕妇HLA-DQ基因多态性与HBV宫内感染的相关性[J]. 检验医学, 2023, 38(4): 382-384.
[8]	李卫滨, 李瑞斌, 张胜行. 新型冠状病毒变异株生物学特性及其检测方法[J]. 检验医学, 2023, 38(4): 394-398.
[9]	陈榕方, 吴雁, 李德生, 朱林敏, 闫莉, 张祺. 豚鼠耳炎诺卡菌感染吸入性肺炎1例报道[J]. 检验医学, 2023, 38(4): 399-402.
[10]	郁婷婷, 王剑. 罕见病诊疗进展与挑战[J]. 检验医学, 2023, 38(2): 103-105.
[11]	蔡潇艺, 娄丹, 杨兴鸽, 王剑. 15例疑似假肥大性肌营养不良患儿遗传学分析[J]. 检验医学, 2023, 38(2): 106-111.
[12]	童文佳, 宋从磊, 许愿愿, 李敏, 金丹群. Poirier-Bienvenu神经发育综合征遗传学分析[J]. 检验医学, 2023, 38(2): 112-116.
[13]	蔡春艳, 上官华坤, 吴文涌, 张莹, 袁欣, 陈瑞敏. HUWE1基因变异致X连锁智力障碍临床表型和遗传学分析[J]. 检验医学, 2023, 38(2): 117-123.
[14]	程欢欢, 赵钰玮. 2例MYH3基因变异致远端关节挛缩综合征患儿临床特征和基因检测结果分析[J]. 检验医学, 2023, 38(2): 124-129.
[15]	王忻, 邓茜, 王娟娟, 蔡文娟, 高健, 韩艳平, 胡克非, 陈雨青. CANT1基因变异导致Desbuquois发育不良Kim变异型临床特征与遗传学分析[J]. 检验医学, 2023, 38(2): 130-136.