3种检测乙型肝炎病毒YMDD变异方法的比较

检验医学 ›› 2012, Vol. 27 ›› Issue (7): 557-560.

3种检测乙型肝炎病毒YMDD变异方法的比较

柳文菊¹,江培学²,朱汝祥²

1.荆州市第一人民医院检验科，湖北荆州 434000；2.上海复星医学科技发展有限公司，上海 200444

收稿日期:2012-05-16 修回日期:2012-02-29 出版日期:2012-07-30 发布日期:2012-07-05
作者简介:柳文菊，女，1971年生，学士，主管技师，主要从事分子生物学研究。

Comparison on detection of YMDD mutation in hepatitis B virus by three methods

1.Department of Clinical Laboratory，Jingzhou First People′s Hospital，Hubei Jingzhou 434000，China；2.Shanghai Fosun Medical Technology Development Co.，Ltd.，Shanghai 200244，China

Received:2012-05-16 Revised:2012-02-29 Online:2012-07-30 Published:2012-07-05

摘要/Abstract

摘要： 目的　通过多种方法比较分析找到一种高灵敏的检测乙型肝炎病毒（HBV）YMDD变异的方法。方法　收集抗病毒治疗1年的慢性乙肝患者样本166例（116例采用拉米夫定治疗、50例采用替比夫定治疗），比较高温连接酶检测反应（LDR）、实时荧光聚合酶链反应（Real-time PCR）和测序3种方法检测HBV YMDD变异灵敏性。结果　LDR、Real-time PCR、测序的阳性率分别为23.49%、21.68%、19.27%。3种方法的特异性均为100%。采用拉米夫定治疗的患者中有38例变异，其中YIDD12例、YVDD26例；替比夫定只有1例YIDD变异。结论　LDR方法检测YMDD变异是非常适合临床应用的方案。YVDD变异较YIDD变异更为普遍。

null

关键词: 乙型肝炎病毒, 变异, 高温连接酶检测反应, 测序

Abstract: Objective　To analyze comparatively and find a sensitive detection method for hepatitis B virus（HBV） YMDD mutation. Methods　A total of 166 samples from patients with HBV infection were collected，including 116 cases treated by lamivudine for 1 year and 50 cases treated by telbivudine for 1 year. The comparison of 3 HBV YMDD mutation detection methods real-time polymerase chain reaction（PCR），high temperature ligase detection reaction（LDR） and sequencing was analyzed. In addition，the sensitivities of the 3 methods were detected. Results　The positive rates of LDR，real-time PCR and sequencing were 23.49%，21.68% and 19.27%. The specificities of the 3 methods were 100%. In the cases treated by lamivudine，there were 38 cases with mutation（12 YIDD and 26 YVDD）. There was only 1 case with YIDD mutation in the cases treated by telbivudine. Conclusions　The LDR for detecting YMDD mutation is suitable in clinical application，and YVDD mutation is more common than YIDD mutation.

Key words: Hepatitis B virus, Mutation, High temperature ligase detection reaction, Sequencing

柳文菊;江培学;朱汝祥. 3种检测乙型肝炎病毒YMDD变异方法的比较[J]. 检验医学, 2012, 27(7): 557-560.

LIU Wenju;JIANG Peixue;ZHU Ruxiang . Comparison on detection of YMDD mutation in hepatitis B virus by three methods[J]. , 2012, 27(7): 557-560.

参考文献

[1]中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病分会.病毒性肝炎防治方案[J].中华肝脏病杂志，2000，8（6）：324-329.
[2]刘传苗，张欣欣，陆志檬.拉米夫定治疗中乙型肝炎病毒YMDD野毒株和变异株的变化[J].肝脏，2004，9（2）：73-76.
[3]陈健康，肖敏敏，冯　岚.TaqMan MGB双探针法和通用模板PCR法检测慢性乙型肝炎病毒YMDD变异的比较[J].安徽医药，2010，14（8）：954-956.
[4]邱源旺，黄利华，蒋祥虎，等.慢性乙型肝炎YMDD变异后的治疗[J].世界华人消化杂志，2009，17（29）：3034-3037.
[5]张书楠，余文辉，周大桥，等.慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒耐药基因型研究[J].国际检验医学杂志，2011，32（16）：1797-1799.
[6]何洁静，曾兰兰，杨永泉，等.慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗后出现YMDD变异的相关因素分析[J].国际检验医学杂志，2011，32（13）：1434-1435.
[7]Kobayashi S，Ide T，Sata M. Detection of YMDD motif mutations in some lamivudine-untreated asymptomatic hepatitis B virus carriers[J]. J Hepatol，2001，34（4）：584-586.
[8]Shin YM，Heo J，Kim GH，et al. Natural YMDD motif mutations of HBV polymerase in the chronic hepatitis B virus infected patients[J]. Taehan Kan Hakhoe Chi，2003，9（1）：1-9.
[9]Chen CJ，Yang HI，Su J，et al. Risk of hepatocellular carcinoma across a biological gradient of scrum hepatitis B virus DNA level[J]. JAMA，2006，295（1）：65-73.
[10]Matthews SJ. Entecavir for the treatment of chronic hepatitis B virus infection[J].Clin Ther，2006，28（2）：184-203.
[11]Lok AS，McMahon BJ. Chronic hepatitis B[J]. Hepatolohy ，2007，45（2）：507-539.
[12]Xiao Z，Xiao J，Jiang Y.A novel method based on ligase detection reaction for low abundunt YIDD mutants detection in hepatitis B virus[J].Hepatol Res，2006，34（3）：150-155.
[13]Consolandi C.High-throughput multiplex HLA-typing by ligase detection reaction（LDR） and universal array（UA） approach[J]. Methods Mol Biol，2009，496：115-127.
[14]Wang YZ，Xiao JH，Ruan LH，et al. Detection of the rtA181V/T and rtN236T mutations associated with resistance to adefovir dipivoxil using a ligase detection reaction assay[J]. Clin Chim Acta，2009，408（1-2）：70-74.

[1]	杨舒, 杨丽华, 盛峰松, 姜永根, 乔雪飞, 朱添玥, 郁子凡, 唐益明. 基于全基因组测序技术分析101株弯曲菌耐药基因、毒力基因和分子分型特征[J]. 检验医学, 2025, 40(7): 673-679.
[2]	彭晓, 王进伟. 儿童呼吸道感染微生物学特征[J]. 检验医学, 2025, 40(7): 713-719.
[3]	马镜云, 王萌萌, 熊博钰, 戴卓文, 潘月月, 王琼. 变异型急性早幼粒细胞白血病表型特征和治疗效果评估相关进展[J]. 检验医学, 2025, 40(6): 606-614.
[4]	柳敏, 孙恒娟, 杜成坎, 夏敏, 姜林林, 翁文浩, 张泓. 6例急性巨核细胞白血病患儿实验室诊断分析[J]. 检验医学, 2025, 40(5): 484-488.
[5]	郭婷婷, 娄欢, 胡航展, 杨小风. 孕早期自然流产遗传学病因及其相关因素分析[J]. 检验医学, 2025, 40(4): 383-387.
[6]	蒋圆玲, 骆嘉欢, 尹欣科. 多重PCR靶向测序技术检测BRCA1基因假阴性1例报道[J]. 检验医学, 2025, 40(4): 404-408.
[7]	廖亚龙, 温魏棋, 姚亚男, 李文敏. 宏基因组高通量测序技术快速诊断惠普尔养障体肺部感染1例报道[J]. 检验医学, 2025, 40(4): 409-412.
[8]	郭玮. 基因检测技术在罕见病诊疗中的应用前景及挑战[J]. 检验医学, 2025, 40(2): 105-108.
[9]	王妍格, 杨季云, 周玉, 蒋黎. 胚系突变高通量测序质量控制流程和能力验证方法[J]. 检验医学, 2025, 40(2): 114-120.
[10]	章霞, 尹燕军, 付志璇, 柯江维. 染色体微阵列分析技术对1例携带额外小标记染色体患儿的遗传学分析[J]. 检验医学, 2025, 40(2): 131-134.
[11]	黄冰怡, 赵芹, 庾冬兰, 王曼伊, 朱春江. 1例18号环状染色体患儿遗传学分析及文献复习[J]. 检验医学, 2025, 40(2): 135-141.
[12]	高姚怡, 张丽, 魏志英, 沈敏娜, 张华阳, 张春燕, 潘柏申, 王蓓丽, 郭玮. 全基因组测序技术在体检人群健康管理中的应用[J]. 检验医学, 2025, 40(2): 148-153.
[13]	卢亚亚, 王亚琼, 彭慧芳, 娄丹. Ⅰ型神经纤维瘤病合并CDK13相关疾病1例报道并文献复习[J]. 检验医学, 2025, 40(2): 154-159.
[14]	鲍芸, 郁婷婷, 权静, 尹刘翻, 张芃胤, 肖艳群. 上海地区遗传病基因变异高通量测序项目室间质量评价分析[J]. 检验医学, 2025, 40(2): 160-164.
[15]	周嘉宽, 郭平, 蔡祺, 杨铭康, 黄之玺, 薛伊伦, 华任翔, 林瀚, 李佳明, 王剑飚. 外周血口形红细胞增多伴巨大血小板患者分子流行病学分析[J]. 检验医学, 2025, 40(2): 171-177.