应用16S rRNA宽范围聚合酶链反应快速检测临床无菌体液感染

检验医学 ›› 2011, Vol. 26 ›› Issue (12): 865-868.

应用16S rRNA宽范围聚合酶链反应快速检测临床无菌体液感染

汪峰;刘彩林;廖亚龙;汪月;孙自镛

华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科,湖北武汉430030

收稿日期:2011-12-01 出版日期:2011-12-01 发布日期:2011-12-01
通讯作者: 汪峰

Application of 16S rRNA broad range polymerase chain reaction for the rapid detection of bacterial infection in clinical body fluid

WANG Feng;LIU Cailin;LIAO Yalong;WANG Yue;SUN Ziyong

Received:2011-12-01 Online:2011-12-01 Published:2011-12-01

摘要/Abstract

摘要： 目的应用16S rRNA宽范围聚合酶链反应(PCR)快速检测临床无菌体液感染,并与传统培养方法进行比较分析.方法收集94份临床无菌体液(血液、脑脊液、胸腹水、关节液)标本,提取细菌基因组DNA,应用16S rRNA宽范围PCR扩增,并将PCR阳性产物测序,然后将测序结果在美国国家生物技术信息中心(NCBI)上进行BLAST比对,从而确定菌种.同时,应用常规培养方法检测94份无菌体液标本,并对2种方法的结果进行比较.结果 16S rRNA宽范围PCR敏感性高,最低扩增浓度为103 CFU/mL,且该技术特异性高,其阳性扩增产物经测序比对后结果和培养结果完全吻合.另外,94例临床标本中应用培养方法培养出阳性例数为9例,阳性率为9.6％,而应用宽范围PCR,除培养阳性的9例均为阳性外,另外扩增出6例阳性标本,阳性率为15.9％,而此6例经测序证实分别为4株铜绿假单胞菌、1株黏质沙雷菌、1株肺炎链球菌.结论 16S rRNA宽范围PCR与培养技术比较起来,敏感性高,特异性强,有望成为临床无菌体液病原体感染快速筛查的方法.

关键词: 宽范围聚合酶链反应, 16S rRNA, 体液, 感染, 培养检测

中图分类号:

R446.61

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