1个复合杂合突变导致的凝血因子Ⅺ缺陷症家系表型及基因型分析

doi:10.3969/j.issn.1673-8640.2020.10.016

摘要/Abstract

摘要：

目的研究1个遗传性凝血因子（F）Ⅺ缺陷症家系的表型和基因型,探讨其分子致病机制。方法抽取先证者及家系（共3代8人）外周血,分离上层血浆,检测凝血相关指标;采用聚合酶链反应（PCR）扩增F11基因的13个外显子及5'端非翻译区,测序分析发现突变位点后采用反向测序验证。采用生物信息学软件（PolyPhen-2、Mutation Taster和SIFT）分析突变位点对蛋白质的影响。结果先证者活化部分凝血活酶时间（APTT）为162 s,FⅪ活性（FⅪ:C）为2%,FⅪ抗原（FⅪ:Ag）为3.6%,其父亲、母亲、姐姐及儿子APTT均明显延长,FⅪ:C和FⅪ:Ag均明显下降。先证者F11基因存在cDNA.1640G>A和cDNA.2183G>A复合杂合突变,分别来自于父亲和母亲。生物信息学软件预测结果表明,该突变可影响蛋白质功能并导致相应疾病的发生。结论 F11基因存在cDNA.1640G>A和cDNA.2183G>A复合杂合突变,可能是导致患者FⅪ:C下降的原因。

关键词: 凝血因子Ⅺ缺陷症, 表型, 基因型, 分子机制

Abstract:

Objective To analyze the phenotype and genotype of a family with congenital coagulation factor（F） Ⅺ deficiency,and to investigate its molecular pathogenesis. Methods Peripheral blood samples of proband and family members（8 persons in 3 generations） were collected,and coagulation-related indicators in upper plasma were determined. Totally,13 exons and 5' non-translation regions of F11 were amplified by polymerase chain reaction（PCR）,and sequencing analysis was performed. The corresponding mutation sites of family members were detected. The segment with mutation was sequenced backward. The effects of mutation sites on proteins were analyzed by bioinformatics softwares（PolyPhen-2,Mutation Taster and SIFT）. Results The activated partial thromboplastin time（APTT） of proband was 162 s,FⅪ activity was 2%,and FⅪ antigen was 3.6%. His father,mother,sister and son all presented prolonged APTT with markedly decreased values of FⅪ activity and FⅪ antigen. Sequencing analysis showed cDNA.1640G>A and cDNA.2183G>A compound heterozygous mutations in F11 gene were from his father and mother,respectively. The results of bioinformatics softwares showed that the mutations could affect the function of protein and lead to the occurrence of corresponding diseases. Conclusions The compound heterozygous mutations of cDNA.1640G>A and cDNA.2183G>A in F11 gene may cause the decreased FⅪ activity in the patient.

Key words: Coagulation factor Ⅺ deficiency, Phenotype, Genotype, Molecular mechanism

中图分类号:

R446.1

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图/表 5

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家系成员	PT/s	APTT/s	FⅪ:C/%	FⅪ:Ag/%	TT/s	DD/（mg/L）	FDP/（mg/L）
先证者（Ⅱ3）	14.0	162	2	3.6	16.7	1.34	1.23
父亲（Ⅰ1）	14.2	86.5	25	25	17.2	0.23	0.34
母亲（Ⅰ2）	13.3	78.6	31	31	16.9	0.43	0.34
妻子（Ⅱ4）	13.8	40.2	98	100	15.8	0.26	0.34
儿子（Ⅲ2）	14.0	76.6	39	35	17.2	0.24	0.34
姐姐（Ⅱ2）	3.8	78.9	40	37	17.0	0.85	0.34
姐夫（Ⅱ1）	13.3	40.2	99	99	15.6	0.23	0.23
外甥女（Ⅲ1）	13.2	41.7	102	102	15.8	0.43	2.36
家系成员	FⅡ:C/%	FⅤ:C/%	FⅦ:C/%	FⅩ:C/%	FⅧ:C/%	FⅨ:C/%	FⅫ:C/%
先证者（Ⅱ3）	100	89	87	88	102	89	89
父亲（Ⅰ1）	99	95	99	89	95	95	103
母亲（Ⅰ2）	89	89	102	95	104	90	99
妻子（Ⅱ4）	95	95	89	105	88	90	95
儿子（Ⅲ2）	90	98	95	90	100	101	104
姐姐（Ⅱ2）	88	100	90	95	98	105	95
姐夫（Ⅱ1）	97	102	88	90	90	89	89
外甥女（Ⅲ1）	98	89	102	102	95	89	95

家系成员	PT/s	APTT/s	FⅪ:C/%	FⅪ:Ag/%	TT/s	DD/（mg/L）	FDP/（mg/L）
先证者（Ⅱ3）	14.0	162	2	3.6	16.7	1.34	1.23
父亲（Ⅰ1）	14.2	86.5	25	25	17.2	0.23	0.34
母亲（Ⅰ2）	13.3	78.6	31	31	16.9	0.43	0.34
妻子（Ⅱ4）	13.8	40.2	98	100	15.8	0.26	0.34
儿子（Ⅲ2）	14.0	76.6	39	35	17.2	0.24	0.34
姐姐（Ⅱ2）	3.8	78.9	40	37	17.0	0.85	0.34
姐夫（Ⅱ1）	13.3	40.2	99	99	15.6	0.23	0.23
外甥女（Ⅲ1）	13.2	41.7	102	102	15.8	0.43	2.36
家系成员	FⅡ:C/%	FⅤ:C/%	FⅦ:C/%	FⅩ:C/%	FⅧ:C/%	FⅨ:C/%	FⅫ:C/%
先证者（Ⅱ3）	100	89	87	88	102	89	89
父亲（Ⅰ1）	99	95	99	89	95	95	103
母亲（Ⅰ2）	89	89	102	95	104	90	99
妻子（Ⅱ4）	95	95	89	105	88	90	95
儿子（Ⅲ2）	90	98	95	90	100	101	104
姐姐（Ⅱ2）	88	100	90	95	98	105	95
姐夫（Ⅱ1）	97	102	88	90	90	89	89
外甥女（Ⅲ1）	98	89	102	102	95	89	95

家系成员	突变基因		基因型
家系成员	Ala430Thr	Val611Met	基因型
先证者（Ⅱ3）	+	+	复合杂合型
父亲（Ⅰ1）	+	-	杂合型
母亲（Ⅰ2）	-	+	杂合型
妻子（Ⅱ4）	-	-	-
儿子（Ⅲ2）	-	-	-
姐姐（Ⅱ2）	-	+	杂合型
姐夫（Ⅱ1）	-	-	-
外甥女（Ⅲ1）	-	-	-

家系成员	突变基因		基因型
家系成员	Ala430Thr	Val611Met	基因型
先证者（Ⅱ3）	+	+	复合杂合型
父亲（Ⅰ1）	+	-	杂合型
母亲（Ⅰ2）	-	+	杂合型
妻子（Ⅱ4）	-	-	-
儿子（Ⅲ2）	-	-	-
姐姐（Ⅱ2）	-	+	杂合型
姐夫（Ⅱ1）	-	-	-
外甥女（Ⅲ1）	-	-	-

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