多种方法联合检测附红细胞体的应用

doi:10.3969/j.issn.1673-8640.2019.04.014

检验医学 ›› 2019, Vol. 34 ›› Issue (4): 351-354.DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2019.04.014

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多种方法联合检测附红细胞体的应用

路凌怡¹, 王剑飚², 姚玉峰¹()

1.上海交通大学医学院基础医学院,上海 200025
2.上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科,上海 200025

收稿日期:2018-03-15 出版日期:2019-04-30 发布日期:2019-05-17
作者简介:null
作者简介：路凌怡,男,1988年生,学士,技师,主要从事医学检验研究。

Application of multiple methods for Eperythrozoon determination

LU Lingyi¹, WANG Jianbiao², YAO Yufeng¹()

1. Institute of Medical Sciences,Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai 200025,China
2. Department of Clinical Laboratory,Ruijin Hospital,Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai 200025,China

Received:2018-03-15 Online:2019-04-30 Published:2019-05-17

摘要/Abstract

摘要：

目的通过多种方法联合检测以提高人附红细胞体检测的特异性。方法选取223例血液病患者,分别用瑞氏-吉姆萨染色和吖啶橙荧光染色检测附红细胞体,比较2种方法的附红细胞体检出率。对2种方法检测结果均阳性的标本进行聚合酶链反应（PCR）检测,并对PCR检测结果阳性的标本进行基因测序和GenBank比对分析。结果瑞氏-吉姆萨染色附红细胞体的检出率为46.19%,吖啶橙荧光染色附红细胞体的检出率为28.25%。2种方法检测结果均阳性的40例标本中有10例PCR检测结果阳性,取其中1例条带较深的标本进行基因测序,测序结果与猪附红细胞体、牛附红细胞体和羊附红细胞体16S rRNA基因序列的同源性分别为95.84%、86.84%和87.33%。结论多种方法联合检测可提高附红细胞体检测的特异性。

关键词: 附红细胞体, 瑞氏-吉姆萨染色, 吖啶橙荧光染色, 聚合酶链反应

Abstract:

Objective To improve the determination specificity of human Eperythrozoon through multiple methods. Methods A total of 223 patients with blood diseases were enrolled. Eperythrozoon was determined by Wright-Giemsa staining and acridine staining. The determination rates were compared between the 2 methods. The cases with both positive results were determined by polymerase chain reaction（PCR）. The positive results of PCR were analyzed by sequencing and GenBank comparison. Results The positive rates were 46.19% and 28.25% by Wright-Giemsa staining and acridine staining,respectively. In 40 cases with both positive results,10 cases were positive by PCR,and 1 case with dark stripe was sequenced. The homology of 16S rRNA sequences between this case and Mycoplasma suis was 95.84%,that for Mycoplasma bovis was 86.84%,and that for Mycoplasma capricolum was 87.33%. Conclusions The multiple methods for Eperythrozooncould improve determination specificity.

Key words: Eperythrozoon, Wright-Giemsa staining, Acridine staining, Polymerase chain reaction

中图分类号:

R446.1

路凌怡, 王剑飚, 姚玉峰. 多种方法联合检测附红细胞体的应用[J]. 检验医学, 2019, 34(4): 351-354.

LU Lingyi, WANG Jianbiao, YAO Yufeng. Application of multiple methods for Eperythrozoon determination[J]. Laboratory Medicine, 2019, 34(4): 351-354.

图/表 5

表1 瑞氏-吉姆萨和吖啶橙荧光染色检出率比较[例（%）]

吖啶橙荧光染色	瑞氏-吉姆萨染色		合计
吖啶橙荧光染色	阳性	阴性	合计
阳性	40（17.94）	23（10.31）	63（28.25）
阴性	63（28.25）	97（43.50）	160（71.75）
合计	103（46.19）	120（53.81）	223（100.00）

图1 瑞氏-吉姆萨染色（×1 000）注：（a）阴性;（b）阳性

图2 吖啶橙荧光染色（×1 000）注：（a）阴性;（b）阳性

图3 PCR扩增结果注：1为空白对照;2为阴性对照;3为阳性对照;4为患者标本;M为Marker6000

图4 GenBank比对结果

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