尿液中大肠埃希菌实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立

检验医学 ›› 2011, Vol. 26 ›› Issue (06): 368-371.

尿液中大肠埃希菌实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立

华玲;吴蓉;张隆;戴俊华;刘丽丽;康向东

上海市浦东新区公利医院检验科,上海,200135;上海中医药大学附属普陀医院检验科,上海,200062

收稿日期:2011-06-01 出版日期:2011-06-01 发布日期:2011-06-01
通讯作者: 吴蓉

The establishment of real-time fluorescent quantitation polymerase chain reaction for detection of Escherichia coli in urine

HUA Ling;WU Rong;ZHANG Long;DAI Junhua;LIU Lili;KANG Xiangdong

Received:2011-06-01 Online:2011-06-01 Published:2011-06-01

摘要/Abstract

摘要： 目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR) 检测大肠埃希菌的方法,检测泌尿道感染患者尿液样本,评估应用RQ-PCR法在检测大肠埃希菌尿路感染的意义.方法选择大肠埃希菌β-右旋半乳糖苷酶基因作为检测靶基因设计引物,建立SYBR GREEN I RQ-PCR检测体系.结果引物特异性好,标准曲线相关系数在0.990 ～0.996 之间.熔解曲线显示产物特异性较强,无非目的条带和二聚体产生.在最低检测限(102拷贝/μL)以上,能对大肠埃希菌样本进行检测,且重复性好.结论 RQ-PCR是一种快速、敏感、特异、重复性好的定量检测大肠埃希菌质粒DNA方法,可用于定量检测临床患者尿液样本中大肠埃希菌含量.

关键词: 大肠埃希菌, DNA, 质粒, 尿液, 实时定量聚合酶链反应

中图分类号:

R446.5

华玲;吴蓉;张隆;戴俊华;刘丽丽;康向东. 尿液中大肠埃希菌实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立[J]. 检验医学, 2011, 26(06): 368-371.

HUA Ling;WU Rong;ZHANG Long;DAI Junhua;LIU Lili;KANG Xiangdong. The establishment of real-time fluorescent quantitation polymerase chain reaction for detection of Escherichia coli in urine[J]. , 2011, 26(06): 368-371.

[1]	周韵斓, 沈立松. 液体活检标志物在非小细胞肺癌中的临床应用和挑战[J]. 检验医学, 2023, 38(9): 807-811.
[2]	王慧英, 汤昱, 董利利, 王静. 肺炎支原体RNA检测用于肺炎患儿疾病诊断和疗效监测[J]. 检验医学, 2023, 38(9): 865-869.
[3]	梁栋, 梅月, 王腾蛟, 喻东. 基于cfDNA的NGS技术探究术后脓毒症患者血液微生物群特征[J]. 检验医学, 2023, 38(8): 753-759.
[4]	潘信, 吕颖, 李阳, 李荣国. miR-24-3p靶向CHD5影响甲状腺癌细胞迁移能力、侵袭能力和放射敏感性[J]. 检验医学, 2023, 38(7): 640-646.
[5]	高锋. 新型肿瘤标志物的临床应用——前景与挑战[J]. 检验医学, 2023, 38(4): 303-306.
[6]	吴炯, 胡嘉华, 施美芳, 刘涛, 戴洁, 卢忻怡, 邹政. 前列腺癌生物标志物研究进展[J]. 检验医学, 2023, 38(2): 190-195.
[7]	陈馨宁, 黄斐, 姜惠琴, 沈敏娜, 潘柏申, 王蓓丽, 郭玮. 非小细胞肺癌患者血浆EGFR基因c.2572_2573delinsAG位点突变1例报道[J]. 检验医学, 2023, 38(10): 1003-1005.
[8]	王刚强, 刁艳君, 何娟, 杨若凡, 闫宏斌, 汪沛, 卢佩, 李程华, 肖凤静, 郑善銮, 郝晓柯, 程翔, 刘家云. 尿液分析自动审核规则的建立、验证和临床应用[J]. 检验医学, 2023, 38(10): 957-966.
[9]	杨思敏, 轩乾坤, 羽晓瑜, 温冬华, 李广波. 国产某品牌大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌及3种碳青霉烯耐药基因试剂性能验证[J]. 检验医学, 2023, 38(1): 56-59.
[10]	吴亚婷, 李卓林, 雷艳, 贾如雪, 张胜行, 王水良. 尿液中miRNA作为常见恶性肿瘤生物标志物研究进展[J]. 检验医学, 2023, 38(1): 94-99.
[11]	王芮, 李朝燕, 赵爱光. 循环肿瘤DNA检测在胃癌诊疗中的应用现状[J]. 检验医学, 2022, 37(9): 877-881.
[12]	罗国菊, 金晶, 徐佳, 郝英英, 汪晓巍, 郭野. UF-5000全自动尿液分析仪健康成人全参数参考区间分析[J]. 检验医学, 2022, 37(8): 751-753.
[13]	王筱雨, 色米热·艾尼瓦尔, 李士军. 样本状态对血浆EB病毒DNA检测结果准确性的影响[J]. 检验医学, 2022, 37(7): 615-617.
[14]	潘芬, 潘雨萱, 石迎迎, 于方圆, 张泓. UroQuick尿液快速培养技术在儿童尿路感染诊断中的应用[J]. 检验医学, 2022, 37(7): 652-656.
[15]	朱赟洁, 马峥尧, 沈敏娜, 周琰, 黄斐, 陈馨宁, 张春燕, 王蓓丽, 郭玮. 结直肠癌患者血浆cfDNA检测方法的建立及临床应用评估[J]. 检验医学, 2022, 37(6): 561-567.