尿液中大肠埃希菌实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立

检验医学 ›› 2011, Vol. 26 ›› Issue (06): 368-371.

尿液中大肠埃希菌实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立

华玲;吴蓉;张隆;戴俊华;刘丽丽;康向东

上海市浦东新区公利医院检验科,上海,200135;上海中医药大学附属普陀医院检验科,上海,200062

收稿日期:2011-06-01 出版日期:2011-06-01 发布日期:2011-06-01
通讯作者: 吴蓉

The establishment of real-time fluorescent quantitation polymerase chain reaction for detection of Escherichia coli in urine

HUA Ling;WU Rong;ZHANG Long;DAI Junhua;LIU Lili;KANG Xiangdong

Received:2011-06-01 Online:2011-06-01 Published:2011-06-01

摘要/Abstract

摘要： 目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR) 检测大肠埃希菌的方法,检测泌尿道感染患者尿液样本,评估应用RQ-PCR法在检测大肠埃希菌尿路感染的意义.方法选择大肠埃希菌β-右旋半乳糖苷酶基因作为检测靶基因设计引物,建立SYBR GREEN I RQ-PCR检测体系.结果引物特异性好,标准曲线相关系数在0.990 ～0.996 之间.熔解曲线显示产物特异性较强,无非目的条带和二聚体产生.在最低检测限(102拷贝/μL)以上,能对大肠埃希菌样本进行检测,且重复性好.结论 RQ-PCR是一种快速、敏感、特异、重复性好的定量检测大肠埃希菌质粒DNA方法,可用于定量检测临床患者尿液样本中大肠埃希菌含量.

关键词: 大肠埃希菌, DNA, 质粒, 尿液, 实时定量聚合酶链反应

中图分类号:

R446.5

华玲;吴蓉;张隆;戴俊华;刘丽丽;康向东. 尿液中大肠埃希菌实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立[J]. 检验医学, 2011, 26(06): 368-371.

HUA Ling;WU Rong;ZHANG Long;DAI Junhua;LIU Lili;KANG Xiangdong. The establishment of real-time fluorescent quantitation polymerase chain reaction for detection of Escherichia coli in urine[J]. , 2011, 26(06): 368-371.

[1]	宋珊珊, 徐黎明, 王学, 郭杰, 王倩, 李玉斌, 孙璇, 董楚瑶, 张姗姗, 陈燕. 尿液分析系统智能审核规则的建立和验证[J]. 检验医学, 2025, 40(9): 914-917.
[2]	马晓路, 郭林, 卢仁泉. 原发性肝细胞肝癌患者外周血指标的临床价值及其应用前景[J]. 检验医学, 2025, 40(4): 309-316.
[3]	王利民, 刘善凤, 王平. 心脏移植患者术后尿液管型阳性率及其影响因素[J]. 检验医学, 2024, 39(9): 900-904.
[4]	王娟, 赵宏伟. 山西长治地区女性HPV感染现状以及不同方法筛查宫颈癌的效能[J]. 检验医学, 2024, 39(9): 908-912.
[5]	彭瑞, 王芳, 丛祥凤, 苏建荣, 陈曦. DNase Ⅰ预处理和样本储存时间对血浆中性粒细胞胞外诱捕网相关指标检测结果的影响[J]. 检验医学, 2024, 39(2): 181-184.
[6]	刘俊汝, 李萌, 徐阳, 郑伟英. 尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c在早期糖尿病肾病诊断中的价值[J]. 检验医学, 2024, 39(11): 1053-1059.
[7]	刘建星, 王金鹏, 耿新龙, 王珊. 尿液外泌体miR-214表达在透明细胞肾细胞癌诊断和预后评估中的价值[J]. 检验医学, 2024, 39(10): 969-974.
[8]	周韵斓, 沈立松. 液体活检标志物在非小细胞肺癌中的临床应用和挑战[J]. 检验医学, 2023, 38(9): 807-811.
[9]	王慧英, 汤昱, 董利利, 王静. 肺炎支原体RNA检测用于肺炎患儿疾病诊断和疗效监测[J]. 检验医学, 2023, 38(9): 865-869.
[10]	梁栋, 梅月, 王腾蛟, 喻东. 基于cfDNA的NGS技术探究术后脓毒症患者血液微生物群特征[J]. 检验医学, 2023, 38(8): 753-759.
[11]	潘信, 吕颖, 李阳, 李荣国. miR-24-3p靶向CHD5影响甲状腺癌细胞迁移能力、侵袭能力和放射敏感性[J]. 检验医学, 2023, 38(7): 640-646.
[12]	高锋. 新型肿瘤标志物的临床应用——前景与挑战[J]. 检验医学, 2023, 38(4): 303-306.
[13]	吴炯, 胡嘉华, 施美芳, 刘涛, 戴洁, 卢忻怡, 邹政. 前列腺癌生物标志物研究进展[J]. 检验医学, 2023, 38(2): 190-195.
[14]	陈馨宁, 黄斐, 姜惠琴, 沈敏娜, 潘柏申, 王蓓丽, 郭玮. 非小细胞肺癌患者血浆EGFR基因c.2572_2573delinsAG位点突变1例报道[J]. 检验医学, 2023, 38(10): 1003-1005.
[15]	王刚强, 刁艳君, 何娟, 杨若凡, 闫宏斌, 汪沛, 卢佩, 李程华, 肖凤静, 郑善銮, 郝晓柯, 程翔, 刘家云. 尿液分析自动审核规则的建立、验证和临床应用[J]. 检验医学, 2023, 38(10): 957-966.