ALT催化活性测定中不同厂家或批号试剂不确定度的评定

doi:10.3969/j.issn.1673-8640.2015.11.021

摘要/Abstract

摘要： 目的

研究不同厂家或同一厂家不同批号的L-丙氨酸、α-酮戊二酸、还原型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸二钠盐(NADH)和三羟甲基氨基甲烷(Tris)对丙氨酸氨基转移酶(ALT)催化活性浓度的影响,评定ALT催化活性测定中不同厂家或批号试剂不确定度。

方法

按照国际临床化学和检验医学联合会推荐的ALT参考测量程序(37 ℃),分别测定S1~S5共5个浓度水平血清,用Bland-Altman法分析其一致性,并计算不同厂家或批号试剂间的不确定度。

结果

ALT试剂各成分(L-丙氨酸、α-酮戊二酸、NADH、Tris)不同厂家及批号的不确定度分别为0.90%、0.65%、0.58%、0.23%,对ALT催化活性浓度影响的扩展不确定度为2.54%(k=2)。

结论

要使各参考实验室所测定的ALT催化活性浓度结果更具可比性,应规定各使用试剂厂家及批号,并在不确定度评定中考虑不同厂家或批号试剂的不确定度。

关键词: 不确定度, 丙氨酸氨基转移酶, 催化活性, L-丙氨酸, α-酮戊二酸, 还原型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸二钠盐, 三羟甲基氨基甲烷

Abstract: Objective

To research the influence of L-alanine, alpha-ketoglutaric acid, beta-nicotinamide adenine dinucleotide reduced disodium salt hydrate(NADH) and Tris hydroxyl methyl aminomethane(Tris) coming from different manufacturers or different lot numbers on alanine aminotransferase (ALT) catalytic activity, and to evaluate the uncertainty of ALT catalytic activity with different manufacturers or different lot numbers.

Methods

The sera with 5 concentrations(S1-S5) were measured by the reference method (37 ℃) recommended by the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. The consistency was analyzed by Bland-Altman method, and the uncertainties of ALT with different manufacturers or lot numbers were calculated.

Results

The uncertainties of L-alanine, alpha-ketoglutaric acid, NADH and Tris were 0.90%, 0.65%, 0.58% and 0.23%. The expanded uncertainties of different manufacturers or lot numbers of reagents were 2.54%(k=2).

Conclusions

It is supposed to define every reagent manufacturer and lot number to make ALT catalytic activity measured by reference laboratories more comparable. When evaluating the uncertainty, we should consider the influence of reagents with different manufacturers or different lot numbers.

Key words: Uncertainty, Alanine aminotransferase, Catalytic activity, L-alanine, Alpha-ketoglutaric acid, Beta-nicotinamide adenine dinucleotide reduced disodium salt hydrate, Tris hydroxyl methyl aminomethane

中图分类号:

R446.1

顾文超, 王惠民, 季伙燕, 王建新, 张卫威, 孟舒婷, 许丽丽. ALT催化活性测定中不同厂家或批号试剂不确定度的评定[J]. 检验医学, 2015, 30(11): 1150-1156.

GU Wenchao, WANG Huimin, JI Huoyan, WANG Jianxin, ZHANG Weiwei, MENG Shuting, XU Lili. Estimation on the uncertainty of ALT catalytic activity with different manufacturers or different lot numbers[J]. Laboratory Medicine, 2015, 30(11): 1150-1156.

图/表 10

表1 不同厂家或批号L-丙氨酸测定ALT催化活性浓度

样本	项目	Sigma公司		亚科公司		TCI公司
样本	项目	批号1	批号2	批号1	批号2	TCI公司
S1	$x ?$	39.28	39.63	38.20	38.65	40.43
	s	0.30	0.57	0.24	0.81	0.22
	CV	0.76	1.45	0.64	2.09	0.55
S2	$x ?$	67.35	67.85	66.43	65.88	68.80
	s	0.24	0.26	0.22	0.65	0.24
	CV	0.35	0.39	0.33	0.99	0.36
S3	$x ?$	99.18	99.08	98.18	96.98	100.10
	s	0.40	0.34	1.02	0.35	0.39
	CV	0.41	0.34	1.04	0.36	0.39
S4	$x ?$	131.40	131.58	131.08	130.50	131.53
	s	0.42	0.29	1.32	1.42	0.43
	CV	0.32	0.22	1.01	1.09	0.33
S5	$x ?$	192.65	192.83	190.25	189.50	193.25
	s	0.82	0.36	0.50	1.22	0.58
	CV	0.43	0.19	0.26	0.65	0.30

表1 不同厂家或批号L-丙氨酸测定ALT催化活性浓度

样本	项目	Sigma公司		亚科公司		TCI公司
样本	项目	批号1	批号2	批号1	批号2	TCI公司
S1	$x ?$	39.28	39.63	38.20	38.65	40.43
	s	0.30	0.57	0.24	0.81	0.22
	CV	0.76	1.45	0.64	2.09	0.55
S2	$x ?$	67.35	67.85	66.43	65.88	68.80
	s	0.24	0.26	0.22	0.65	0.24
	CV	0.35	0.39	0.33	0.99	0.36
S3	$x ?$	99.18	99.08	98.18	96.98	100.10
	s	0.40	0.34	1.02	0.35	0.39
	CV	0.41	0.34	1.04	0.36	0.39
S4	$x ?$	131.40	131.58	131.08	130.50	131.53
	s	0.42	0.29	1.32	1.42	0.43
	CV	0.32	0.22	1.01	1.09	0.33
S5	$x ?$	192.65	192.83	190.25	189.50	193.25
	s	0.82	0.36	0.50	1.22	0.58
	CV	0.43	0.19	0.26	0.65	0.30

图1 不同厂家或批号L-丙氨酸对ALT催化活性浓度影响一致性的Bland-Altman图

表2 不同厂家或批号α-酮戊二酸测定ALT催化活性浓度

样本	项目	Sigma公司		亚科公司		TCI公司
样本	项目	批号1	批号2	批号1	批号2	TCI公司
S1	$x ?$	39.03	39.90	38.73	38.50	39.65
	s	0.51	0.32	0.75	0.43	0.34
	CV	1.30	0.79	1.93	1.12	0.86
S2	$x ?$	67.23	67.10	65.50	65.13	68.03
	s	0.62	0.62	0.75	0.43	0.22
	CV	0.92	0.93	1.15	0.67	0.33
S3	$x ?$	99.13	99.13	98.75	97.90	99.88
	s	0.49	0.36	1.00	0.95	0.77
	CV	0.49	0.36	1.01	0.97	0.77
S4	$x ?$	131.33	131.20	130.08	130.83	132.78
	s	0.31	0.37	0.35	0.83	0.73
	CV	0.24	0.29	0.27	0.63	0.55
S5	$x ?$	192.03	191.73	190.35	190.10	192.70
	s	0.54	0.22	0.79	0.38	0.59
	CV	0.28	0.12	0.41	0.20	0.31

表2 不同厂家或批号α-酮戊二酸测定ALT催化活性浓度

样本	项目	Sigma公司		亚科公司		TCI公司
样本	项目	批号1	批号2	批号1	批号2	TCI公司
S1	$x ?$	39.03	39.90	38.73	38.50	39.65
	s	0.51	0.32	0.75	0.43	0.34
	CV	1.30	0.79	1.93	1.12	0.86
S2	$x ?$	67.23	67.10	65.50	65.13	68.03
	s	0.62	0.62	0.75	0.43	0.22
	CV	0.92	0.93	1.15	0.67	0.33
S3	$x ?$	99.13	99.13	98.75	97.90	99.88
	s	0.49	0.36	1.00	0.95	0.77
	CV	0.49	0.36	1.01	0.97	0.77
S4	$x ?$	131.33	131.20	130.08	130.83	132.78
	s	0.31	0.37	0.35	0.83	0.73
	CV	0.24	0.29	0.27	0.63	0.55
S5	$x ?$	192.03	191.73	190.35	190.10	192.70
	s	0.54	0.22	0.79	0.38	0.59
	CV	0.28	0.12	0.41	0.20	0.31

图2 不同厂家或批号α-酮戊二酸对ALT催化活性浓度影响一致性的Bland-Altman图

表3 不同厂家或批号NADH测定ALT催化活性浓度

样本	项目	Sigma公司		亚科公司		TCI公司
样本	项目	批号1	批号2	批号1	批号2	TCI公司
S1	$x ?$	39.28	38.98	38.50	38.60	39.78
	s	0.30	0.36	0.62	0.39	0.40
	CV	0.76	0.92	1.62	1.01	1.01
S2	$x ?$	67.35	67.15	66.35	66.50	67.78
	s	0.24	0.29	0.79	0.52	0.39
	CV	0.35	0.43	1.18	0.78	0.57
S3	$x ?$	99.18	99.23	97.93	98.03	100.11
	s	0.40	0.68	0.69	0.67	0.21
	CV	0.41	0.69	0.71	0.68	0.21
S4	$x ?$	131.33	132.05	129.55	129.23	133.35
	s	0.31	0.64	1.03	0.63	0.39
	CV	0.24	0.48	0.80	0.49	0.29
S5	$x ?$	192.03	192.18	190.03	189.50	192.88
	s	0.54	0.76	1.09	0.37	0.22
	CV	0.28	0.40	0.57	0.20	0.11

表3 不同厂家或批号NADH测定ALT催化活性浓度

样本	项目	Sigma公司		亚科公司		TCI公司
样本	项目	批号1	批号2	批号1	批号2	TCI公司
S1	$x ?$	39.28	38.98	38.50	38.60	39.78
	s	0.30	0.36	0.62	0.39	0.40
	CV	0.76	0.92	1.62	1.01	1.01
S2	$x ?$	67.35	67.15	66.35	66.50	67.78
	s	0.24	0.29	0.79	0.52	0.39
	CV	0.35	0.43	1.18	0.78	0.57
S3	$x ?$	99.18	99.23	97.93	98.03	100.11
	s	0.40	0.68	0.69	0.67	0.21
	CV	0.41	0.69	0.71	0.68	0.21
S4	$x ?$	131.33	132.05	129.55	129.23	133.35
	s	0.31	0.64	1.03	0.63	0.39
	CV	0.24	0.48	0.80	0.49	0.29
S5	$x ?$	192.03	192.18	190.03	189.50	192.88
	s	0.54	0.76	1.09	0.37	0.22
	CV	0.28	0.40	0.57	0.20	0.11

图3 不同厂家或批号NADH对ALT催化活性浓度影响一致性的Bland-Altman图

表4 不同厂家或批号Tris测定ALT催化活性浓度

样本	项目	Sigma公司		亚科公司		TCI公司
样本	项目	批号1	批号2	批号1	批号2	TCI公司
S1	$x ?$	39.28	39.63	39.75	39.50	39.45
	s	0.30	0.34	0.34	0.24	0.21
	CV	0.76	0.86	0.86	0.62	0.53
S2	$x ?$	67.35	67.43	67.18	67.23	67.58
	s	0.24	0.36	0.25	0.17	0.29
	CV	0.35	0.53	0.37	0.25	0.43
S3	$x ?$	99.18	98.83	98.68	99.03	99.30
	s	0.40	0.34	0.41	0.57	0.36
	CV	0.41	0.34	0.42	0.57	0.36
S4	$x ?$	131.33	131.60	130.73	131.23	131.30
	s	0.31	0.32	0.43	0.48	0.39
	CV	0.24	0.24	0.33	0.36	0.30
S5	$x ?$	192.03	191.68	190.08	190.63	191.45
	s	0.54	0.30	0.72	0.39	0.60
	CV	0.28	0.16	0.38	0.20	0.31

表4 不同厂家或批号Tris测定ALT催化活性浓度

样本	项目	Sigma公司		亚科公司		TCI公司
样本	项目	批号1	批号2	批号1	批号2	TCI公司
S1	$x ?$	39.28	39.63	39.75	39.50	39.45
	s	0.30	0.34	0.34	0.24	0.21
	CV	0.76	0.86	0.86	0.62	0.53
S2	$x ?$	67.35	67.43	67.18	67.23	67.58
	s	0.24	0.36	0.25	0.17	0.29
	CV	0.35	0.53	0.37	0.25	0.43
S3	$x ?$	99.18	98.83	98.68	99.03	99.30
	s	0.40	0.34	0.41	0.57	0.36
	CV	0.41	0.34	0.42	0.57	0.36
S4	$x ?$	131.33	131.60	130.73	131.23	131.30
	s	0.31	0.32	0.43	0.48	0.39
	CV	0.24	0.24	0.33	0.36	0.30
S5	$x ?$	192.03	191.68	190.08	190.63	191.45
	s	0.54	0.30	0.72	0.39	0.60
	CV	0.28	0.16	0.38	0.20	0.31

图4 不同厂家或批号Tris对ALT催化活性浓度影响一致性的Bland-Altman图

图5 2013年低值ALT催化活性浓度测定RELA比对结果

图6 2013年低值ALT催化活性浓度测定RELA比对结果

参考文献 8

[1]	迟珊,沈默,张曼. γ-谷氨酰基转移酶国际室间比对计划结果分析[J].检验医学,2011,26(8):540-543.
[2]	International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. RELA--IFCC external quality assessment scheme for reference laboratories in laboratory medicine[EB/OL]. (2015-01-14)[2015-01-14]. .
[3]	International Organization for Standardization. General requirements for the competence of reference material producers[S].ISO Guide 34,ISO,2009.
[4]	SIEKMANN L,BONORA R,BURTIS CA,et al.IFCC primary reference procedures for the measurement of catalytic activity concentrations of enzymes at 37 degrees C. International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. Part 7. Certification of four reference materials for the determination of enzymatic activity of gamma-glutamyltransferase, lactate dehydrogenase, alanine aminotransferase and creatine kinase accord[J]. Clin Chem Lab Med,2002,40(7):739-745.
[5]	LUDBROOK J.Confidence in Altman-Bland plots: a critical review of the method of differences[J]. Clin Exp Pharmacol Physiol,2010,37(2):143-149.
[6]	陈卉. Bland-Altman分析在临床测量方法一致性评价中的应用[J].中国卫生统计,2007,24(3): 308-309.
[7]	陈宝荣,孙慧颖,邵燕,等.四种血清a-淀粉酶厂家系统测量结果的正确性评价[J].中华检验医学杂志,2012,35(4):309-316.
[8]	BLAND JM,ALTMAN DG.Statistical methods for assessing agreement between two methods of clinical measurement[J] . Lancet,1986,1(8476): 307-310.

[1]	孟舒婷, 周卫平, 戴绘芬, 董德平, 董业峰, 葛仁美, 王惠民. 蒙特卡洛法对校准曲线法测定总胆红素浓度的不确定度评定[J]. 检验医学, 2022, 37(7): 674-679.
[2]	王志方, 李亚博, 梁曼, 安舒琪, 韩艳林. 自适应蒙特卡洛法在自上而下评定测量不确定度中的应用[J]. 检验医学, 2022, 37(4): 382-386.
[3]	张卫威, 景蓉蓉, 季伙燕, 王建新, 王峰, 王惠民. 同位素稀释质谱法测定血清肌酐浓度的不确定度评定[J]. 检验医学, 2021, 36(3): 263-269.
[4]	于书平, 袁丹丹, 崔明, 景蓉蓉, 王惠民. BCR-ABL1候选参考物质的研制及测量不确定度评定[J]. 检验医学, 2019, 34(8): 752-757.
[5]	周卫平, 戴绘芬, 陶赟, 王惠民, 王建新, 季伙燕, 陈峰. GUF评定血清TB参考测量程序测量不确定度初探[J]. 检验医学, 2019, 34(11): 1032-1037.
[6]	刘文慧, 白金娥, 张慧. 血清丙氨酸氨基转移酶及γ-谷氨酰基转移酶水平与2型糖尿病的关系[J]. 检验医学, 2018, 33(1): 20-25.
[7]	欧元祝, 虞啸炫, 唐立萍, 居漪, 王美娟, 刘文彬, 金中淦. ALT正确度控制品稳定性研究及调查结果分析[J]. 检验医学, 2017, 32(8): 713-717.
[8]	潘锡龙, 刘小冬, 黄绍芬. 医学实验室血清K⁺、Na⁺、Cl^-测量不确定度评估及检测质量改进分析[J]. 检验医学, 2017, 32(7): 642-646.
[9]	孙斌, 王姗, 钱俊, 唐振华. 63 109例上海地区孕妇部分产前筛查指标分析[J]. 检验医学, 2017, 32(5): 386-389.
[10]	郭晓俊, 朱岭峰, 徐翀, 居漪. 传统统计法与稳健统计法评价医学检验实验室能力验证结果比较[J]. 检验医学, 2017, 32(5): 435-439.
[11]	冯仁丰. 临床实验室检测系统分析性能采用σ验证的必要性[J]. 检验医学, 2017, 32(10): 837-843.
[12]	田洪伦, 尹科, 何军, 雷文美, 张子萍. 东芝TBA-120FR全自动生化分析仪FLEX模式在高浓度酶样本检测中的应用[J]. 检验医学, 2016, 31(8): 684-687.
[13]	戴绘芬, 王惠民, 王建新, 季伙燕, 孟舒婷. 参考测量程序测定血清总胆红素浓度的不确定度评定[J]. 检验医学, 2016, 31(5): 368-372.
[14]	韩根良, 徐锋, 徐玲, 沈敏, 郭慧涛, 张宏. 改良尿酸酶法测量程序的性能评价[J]. 检验医学, 2016, 31(5): 399-404.
[15]	贾江花, 屠敏敏, 沈敏, 邹继华, 张曼. 基于离子色谱技术的血清电解质参考测量程序测定结果的不确定度评定[J]. 检验医学, 2016, 31(12): 1087-1092.