检验医学 ›› 2008, Vol. 23 ›› Issue (03): 305-307.

• 分子生物学检验论著 • 上一篇    下一篇

荧光定量聚合酶链反应检测胃癌let-7 MicroRNA

吴炳坤%唐永德   

  1. 浙江省桐庐县第二人民医院检验科,浙江,桐庐,311519;浙江省桐庐县中医院检验科,浙江,桐庐,311500
  • 收稿日期:2008-03-01 出版日期:2008-03-01 发布日期:2008-03-01
  • 通讯作者: 吴炳坤

  • Received:2008-03-01 Online:2008-03-01 Published:2008-03-01

摘要: 目的 建立一种快速、准确、特异、定量检测let-7 miRNA的方法并探讨其在胃癌发生发展中的意义.方法 提取20例胃癌及癌旁正常胃黏膜组织总RNA,采用颈环逆转录引物进行逆转录;以let-7a micro RNA为靶基因,设计合成引物和荧光(MGB)探针;建立荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测let-7 miRNA,并检测其在胃癌组织中的表达.结果 该方法检测let-7a miRNA的灵敏度为1.0×101拷贝;检测总RNA的下限为0.05ng.20例临床标本中,7例(35%,7/20)胃癌组织中let-7a miRNA表达明显低于其远癌端正常胃黏膜对照组织.结论 应用颈环逆转录引物及MGB探针技术荧光定量PCR方法能够准确、快速、特异、敏感地检测胃癌let-7miRNA,且其表达下调可能与胃癌的发生发展有密切关系.

关键词: 聚合酶链反应, 胃癌, MicroRNA

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