检验医学 ›› 2003, Vol. 18 ›› Issue (06): 347-349.

• 分子生物学论著 • 上一篇    下一篇

荧光偏振检测HBV DNA前C区nt1896位点突变

郭晏海%吕贯庭%白玉洁%赵锦荣%张菊%闫小君   

  1. 第四军医大学全军基因诊断技术研究所,陕西,西安,710033
  • 收稿日期:2003-06-01 出版日期:2003-06-01 发布日期:2003-06-01
  • 通讯作者: 郭晏海

Detection of the nt1896 mutation of HBV preC gene by fluorescence polarization

  • Received:2003-06-01 Online:2003-06-01 Published:2003-06-01

摘要: 目的建立简便的HBV DNA前C区nt1896位点突变的检测方法.方法采用终点终止法和偏振光检测技术进行点突变的检测.首先对HBV DNA前C区基因进行PCR扩增,然后用特异探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交,使探针的3'端可以在DNA聚合酶的作用下,依据其互补链上的待测核苷酸连接上一个标有特定荧光素的ddNTP,然后检测该3'端带有荧光素探针的偏振光值,根据检测得到的荧光素种类及其偏振光的强度可以判定待测点是何种核苷酸.结果该方法可以检测出HBV基因序列中nt1896的核苷酸类型,最低可检出的突变模板量为1×101拷贝.结论该技术可以对血清中HBV DNA前C区nt1896位点突变以及其他基因突变进行检测.

关键词: 荧光偏振, 突变, HBV DNA

中图分类号: