检验医学 ›› 1999, Vol. 14 ›› Issue (2): 110-112.

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RT-PCR单管法检测庚型肝炎病毒RNA

贺波; 颜进   

  1. 青岛医学院附属医院检验科; 同济医科大学微生物教研室
  • 出版日期:1999-05-10 发布日期:2015-11-21

  • Online:1999-05-10 Published:2015-11-21

摘要: 探讨建立一种更简便,特异、灵敏的逆转录-巢式聚合酶链反应单管法检测庚型肝炎病毒HGVRNA。通过优化Mg2+、外引物浓度等实验参数,在一个Eppendof管中先后进行逆转录和巢式PCR扩增等三步反应。342bp扩增终产物核苷酸序列采用直接测序法测定。本方法可检出104~105倍稀释的标准阳性血清。用RT-PCR单管法与常规三步法比较检测了不同类型肝炎患者和职业献血员178份血清标本HGVRNA,两法符合率达96.6%。RT-PCR单管法检测HGVRNA灵敏度高,特异性强,具有省时省力,简单稳定,不易污染等优点。

关键词: 聚合酶链反应, 庚型肝炎病毒