乳腺癌组织中ZEB2、E-Cad表达与患者预后的关系

doi:10.3969/j.issn.1673-8640.2022.09.003

摘要/Abstract

摘要：

目的探讨E盒结合锌指蛋白2（ZEB2）和上皮型钙黏蛋白（E-Cad）在乳腺癌组织中的表达及其在患者预后评估中的价值。方法收集80例乳腺癌患者的癌组织样本及对应的癌旁组织（距癌组织≤3 cm）样本。采用免疫组化法和实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测癌组织和癌旁组织中ZEB2和E-Cad蛋白及mRNA的表达。收集所有患者的临床病历资料。对所有患者随访5年,记录生存情况。采用Kaplan-Meier生存曲线分析ZEB2、E-Cad表达与乳腺癌患者生存率之间的关系。采用Cox比例风险模型分析乳腺癌患者5年生存率的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析ZEB2和E-Cad判断乳腺癌预后的效能。结果癌组织ZEB2阳性率显著高于癌旁组织（P<0.05）,E-Cad阳性率显著低于癌旁组织（P<0.05）。乳腺癌组织ZEB2表达与E-Cad表达呈负相关（r=-0.265,P=0.018）。癌组织ZEB2 mRNA相对表达量显著高于癌旁组织（P<0.05）,E-Cad mRNA相对表达量显著低于癌旁组织（P<0.05）。ZEB2表达与肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期、人表皮生长因子受体2（HER-2）表达有关（P<0.05）,E-Cad表达与淋巴结转移、TNM分期、雌激素受体（ER）表达、孕激素受体（PR）表达、HER-2表达有关（P<0.05）。癌组织ZEB2阴性乳腺癌患者的5年总生存率显著高于阳性患者（P<0.05）,E-Cad阳性乳腺癌患者的5年总生存率高于阴性患者（P<0.05）。Cox比例风险模型分析结果显示,淋巴结转移、TNM分期、ZEB2表达、E-Cad表达是影响乳腺癌患者预后的因素[风险比（HR）分别为3.47、6.49、2.35、0.15]。ROC曲线分析结果显示,ZEB2、E-Cad单项检测和联合检测判断乳腺癌患者5年生存的曲线下面积分别为0.618、0.638、0.827。结论乳腺癌组织ZEB2和E-Cad蛋白表达异常,或可作为乳腺癌预后评估的指标。

关键词: E盒结合锌指蛋白2, 上皮型钙黏蛋白, 乳腺癌, 预后

Abstract:

Objective To analyze the expressions and prognostic values of E-box binding zinc finger protein 2（ZEB2） and epithelial-cadherin（E-Cad） in breast cancer tissues. Methods Tissue specimens of 80 patients with pathologically confirmed breast cancer and normal tissue specimens of adjacent tissues（≤3 cm from cancer tissues） were collected. Immunohistochemistry and real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction（RT-qPCR） were used to determine the expressions of ZEB2 and E-Cad proteins and their mRNA in breast cancer tissues and corresponding adjacent tissues. The medical history data of all the patients were collected. All the patients were followed up for 5 years,and the survival status was recorded. Kaplan-Meier survival curve was used to analyze the relations between the expressions of ZEB2 and E-Cad and the survival rate of breast cancer patients. Cox proportional hazard model was used to analyze the prognostic factors of 5-year survival rate of patients with breast cancer. Receiver operating characteristic（ROC） curve was used to analyze the efficacy of ZEB2 and E-Cad in breast cancer. Results The positive rate of ZEB2 in cancer tissues was higher than that in adjacent tissues（P<0.05）,while the positive rate of E-Cad in cancer tissues was lower than that in adjacent tissues（P<0.05）. There was a negative correlation between the expressions of ZEB2 and E-Cad in breast cancer tissues（r=-0.265,P=0.018）. The relative expression of ZEB2 mRNA in cancer tissues was higher than that in adjacent tissues,while the relative expression of E-Cad mRNA in cancer tissues was lower than that in adjacent tissues. The expression of ZEB2 was related to tumor diameter,lymph node metastasis,TNM stage and human epidermal growth factor receptor-2（HER-2） expression. The expression of E-Cad was related to lymph node metastasis,TNM stage,estrogen receptor（ER） expression,progesterone receptor（PR） expression and HER-2 expression. The 5-year survival rates of ZEB2-negative and E-Cad-positive breast cancer patients was higher than that of ZEB2-positive and E-Cad-negative breast cancer patients,respectively（P<0.05）. Cox proportional hazard model analysis showed that lymph node metastasis,TNM stage,ZEB2 expression and E-Cad expression were the prognostic factors for breast cancer patients [hazard ratio（HR）=3.47,6.49,2.35 and 0.15,respectively]. The results of ROC curve analysis showed that the areas under the curves for judging the 5-year survival of breast cancer by single and combined determinations of ZEB2 and E-Cad were 0.618,0.638 and 0.827,respectively. Conclusions ZEB2 and E-Cad proteins are abnormally expressed in breast cancer tissues,which may be used to evaluate the prognosis of breast cancer.

Key words: E-box binding zinc finger protein 2, Epithelial-cadherin, Breast cancer, Prognosis

中图分类号:

R446.1

王晓烨, 冬国友, 刘志英. 乳腺癌组织中ZEB2、E-Cad表达与患者预后的关系[J]. 检验医学, 2022, 37(9): 815-820.

WANG Xiaoye, DONG Guoyou, LIU Zhiying. Relations of ZEB2 and E-Cad expressions in breast cancer tissues with prognosis[J]. Laboratory Medicine, 2022, 37(9): 815-820.

图/表 8

参考文献 15

[1]	郑莹. 中国乳腺癌患者生活方式指南[J]. 浙江医学, 2017, 39(4):239-242.
[2]	ZHAO C L, SINGH K, BRODSKY A S, et al. Stromal ColXα1 expression correlates with tumor-infiltrating lymphocytes and predicts adjuvant therapy outcome in ER-positive/HER2-positive breast cancer[J]. BMC Cancer, 2019, 19(1):1036. DOI PMID
[3]	NEELAKANTAN D, ZHOU H, OLIPHANT M U J, et al. EMT cells increase breast cancer metastasis via paracrine GLI activation in neighbouring tumour cells[J]. Nat Commun, 2017, 8:15773. DOI PMID
[4]	MA X, YAN W, DAI Z, et al. Baicalein suppresses metastasis of breast cancer cells by inhibiting EMT via downregulation of SATB1 and Wnt/β-catenin pathway[J]. Drug Des Devel Ther, 2016, 10:1419-1441.
[5]	ZHANG Z, YANG C, GAO W, et al. FOXA2 attenuates the epithelial to mesenchymal transition by regulating the transcription of E-cadherin and ZEB2 in human breast cancer[J]. Cancer Lett, 2015, 361(2):240-250. DOI PMID
[6]	孙振, 周海红, 郭红云, 等. CARD9蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义[J]. 肿瘤, 2017, 37(3):245-254.
[7]	GOLDHIRSCH A, WOOD W C, COATES A S, et al. Strategies for subtypes--dealing with the diversity of breast cancer: highlights of the St. Gallen International Expert Consensus on the Primary Therapy of Early Breast Cancer 2011[J]. Ann Oncol, 2011, 22(8):1736-1747. DOI PMID
[8]	PRECA B T, BAJDAK K, MOCK K, et al. A novel ZEB1/HAS2 positive feedback loop promotes EMT in breast cancer[J]. Oncotarget, 2017, 8(7):11530-11543. DOI URL
[9]	李艳娇, 张本斯, 李庄, 等. EphA2在乳腺癌中的表达及其与上皮间质转化的关系[J]. 中国临床解剖学杂志, 2018, 36(3):294-298.
[10]	DANG D K, MAKENA M R, LLONGUERAS J P, et al. A Ca2+-ATPase regulates E-cadherin biogenesis and epithelial-mesenchymal transition in breast cancer cells[J]. Mol Cancer Res, 2019, 17(8):1735-1747. DOI URL
[11]	邹颖, 邝紫桥, 陈欣欣, 等. Sam68基因过表达可促进乳腺癌MCF-7细胞发生上皮-间质转化[J]. 肿瘤, 2017, 37(1):12-18.
[12]	DI GENNARO A, DAMIANO V, BRISOTTO G, et al. A p53/miR-30a/ZEB2 axis controls triple negative breast cancer aggressiveness[J]. Cell Death Differ, 2018, 25(12):2165-2180. DOI PMID
[13]	XAVIER P L P, CORDEIRO Y G, ROCHETTI A L, et al. ZEB1 and ZEB2 transcription factors are potential therapeutic targets of canine mammary cancer cells[J]. Vet Comp Oncol, 2018, 16(4):596-605. DOI PMID
[14]	ZHOU X, MEN X, ZHAO R, et al. MiR-200c inhibits TGF-β-induced-EMT to restore trastuzumab sensitivity by targeting ZEB1 and ZEB2 in gastric cancer[J]. Cancer Gene Ther, 2018, 25(3-4):68-76. DOI PMID
[15]	罗庆丰, 修穆群, 高文, 等. ZEB2蛋白表达和E-caderin蛋白在鼻咽癌转移中的临床意义[J]. 实用癌症杂志, 2019, 34(5):704-706.

组织	ZEB2		E-Cad
组织	免疫组化评分/分	阳性/ [例（%）]	免疫组化评分/分	阳性/ [例（%）]
癌旁组织	0.85±0.42	8（10.00）	6.25±1.54	76（95.00）
癌组织	6.74±1.91	68（85.00）	5.21±0.33	10（12.50）
统计值	26.938	90.226	5.906	109.516
P值	<0.001	<0.001	<0.001	<0.001

组织	ZEB2		E-Cad
组织	免疫组化评分/分	阳性/ [例（%）]	免疫组化评分/分	阳性/ [例（%）]
癌旁组织	0.85±0.42	8（10.00）	6.25±1.54	76（95.00）
癌组织	6.74±1.91	68（85.00）	5.21±0.33	10（12.50）
统计值	26.938	90.226	5.906	109.516
P值	<0.001	<0.001	<0.001	<0.001

临床病理参数	例数	ZEB2阳性/ [例（%）]	E-Cad阳性/ [例（%）]	临床病理参数	例数	ZEB2阳性/ [例（%）]	E-Cad阳性/ [例（%）]
年龄				PR表达
<50岁	40	31（77.50）	3（7.50）	阳性	55	45（81.82）	2（3.64）
≥50岁	40	37（92.50）	7（17.50）	阴性	25	23（92.00）	8（32.00）
χ²值		3.529	1.829	χ²值		1.398	12.642
P值		0.060	0.176	P值		0.237	<0.001
肿瘤直径				HER-2表达
<1.5 cm	37	28（75.68）	3（8.11）	阳性	43	33（81.13）	1（2.33）
≥1.5 cm	43	40（93.02）	7（16.27）	阴性	37	35（92.59）	9（24.32）
χ²值		4.694	1.214	χ²值		4.970	8.800
P值		0.030	0.271	P值		0.026	0.003
淋巴结转移		0		分子分型
有	34	24（70.59）	8（23.53）	Luminal A型	36	30（18.87）	6（16.67）
无	46	44（95.65）	2（4.35）	Luminal B型	11	10（18.87）	1（9.09）
χ²值		9.632	6.577	HER-2过表达型	22	18（18.87）	2（9.09）
P值		0.002	0.01	基底样型	11	10（18.87）	1（9.09）
远隔转移				χ²值		0.856	1.039
有	37	30（81.08）	3（23.53）	P值		0.836	0.792
无	43	38（88.37）	7（4.35）	病理类型
χ²值		0.829	1.214	浸润性导管癌	63	54（85.71）	8（12.70）
P值		0.363	0.271	其他类型	17	14（82.35）	2（11.76）
TNM分期				χ²值		0.119	0.011
Ⅰ~Ⅱ期	53	42（41.03）	3（5.66）	P值		0.731	0.918
Ⅲ~Ⅳ期	27	26（14.63）	7（25.93）	组织学分级
χ²值		4.079	6.716	Ⅰ~Ⅱ级	62	53（85.49）	6（9.68）
P值		0.043	0.001	Ⅲ级	18	15（83.33）	4（22.22）
ER表达				χ²值		0.051	2.008
阳性	53	43（81.13）	2（3.77）	P值		0.822	0.157
阴性	27	25（92.59）	8（29.63）
χ²值		1.843	10.933
P值		0.175	0.001

临床病理参数	例数	ZEB2阳性/ [例（%）]	E-Cad阳性/ [例（%）]	临床病理参数	例数	ZEB2阳性/ [例（%）]	E-Cad阳性/ [例（%）]
年龄				PR表达
<50岁	40	31（77.50）	3（7.50）	阳性	55	45（81.82）	2（3.64）
≥50岁	40	37（92.50）	7（17.50）	阴性	25	23（92.00）	8（32.00）
χ²值		3.529	1.829	χ²值		1.398	12.642
P值		0.060	0.176	P值		0.237	<0.001
肿瘤直径				HER-2表达
<1.5 cm	37	28（75.68）	3（8.11）	阳性	43	33（81.13）	1（2.33）
≥1.5 cm	43	40（93.02）	7（16.27）	阴性	37	35（92.59）	9（24.32）
χ²值		4.694	1.214	χ²值		4.970	8.800
P值		0.030	0.271	P值		0.026	0.003
淋巴结转移		0		分子分型
有	34	24（70.59）	8（23.53）	Luminal A型	36	30（18.87）	6（16.67）
无	46	44（95.65）	2（4.35）	Luminal B型	11	10（18.87）	1（9.09）
χ²值		9.632	6.577	HER-2过表达型	22	18（18.87）	2（9.09）
P值		0.002	0.01	基底样型	11	10（18.87）	1（9.09）
远隔转移				χ²值		0.856	1.039
有	37	30（81.08）	3（23.53）	P值		0.836	0.792
无	43	38（88.37）	7（4.35）	病理类型
χ²值		0.829	1.214	浸润性导管癌	63	54（85.71）	8（12.70）
P值		0.363	0.271	其他类型	17	14（82.35）	2（11.76）
TNM分期				χ²值		0.119	0.011
Ⅰ~Ⅱ期	53	42（41.03）	3（5.66）	P值		0.731	0.918
Ⅲ~Ⅳ期	27	26（14.63）	7（25.93）	组织学分级
χ²值		4.079	6.716	Ⅰ~Ⅱ级	62	53（85.49）	6（9.68）
P值		0.043	0.001	Ⅲ级	18	15（83.33）	4（22.22）
ER表达				χ²值		0.051	2.008
阳性	53	43（81.13）	2（3.77）	P值		0.822	0.157
阴性	27	25（92.59）	8（29.63）
χ²值		1.843	10.933
P值		0.175	0.001

指标	β值	标准误	Wald值	P值	HR值（95%CI）
肿瘤直径	4.03	3.65	2.91	0.68	0.82（0.77~2.75）
淋巴结转移	2.34	1.08	4.26	0.01	3.47（2.48~5.67）
ER	3.78	3.33	2.84	0.76	0.77（0.72~3.35）
PR	4.05	3.15	2.67	0.85	0.81（0.74~4.24）
HER-2	3.86	3.52	2.83	0.88	0.85（0.69~2.68）
TNM分期	1.65	0.93	2.77	0.03	6.49（1.17~8.67）
ZEB2	3.58	1.98	2.74	0.01	2.35（2.00~5.64）
E-Cad	-0.64	0.44	0.001	0.01	0.15（0.08~0.78）