铜绿假单胞菌产AmpC β-内酰胺酶及外膜孔蛋白OprD2基因缺失分析

doi:10.3969/j.issn.1673-8640.2016.04.014

摘要/Abstract

摘要：

目的了解临床分离的铜绿假单胞菌中产AmpC β-内酰胺酶（简称AmpC酶）及外膜孔蛋白OprD₂基因缺失的情况。方法采用三维试验检测AmpC酶,聚合酶链反应（PCR）检测外膜孔蛋白OprD₂基因和AmpC酶结构基因ampC,进行统计学分析。结果 63株铜绿假单胞菌中AmpC酶阳性14株（22.22%）;OprD₂基因阳性22株（OprD_2基因缺失率65.08%）;ampC基因阳性62株（93.94%）。铜绿假单胞菌对氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦、头孢替坦、头孢曲松和头孢唑啉的耐药率达100.00％。产AmpC酶的菌株对亚胺培南、庆大霉素、头孢吡肟的耐药率分别为42.85%、64.29％和57.14％,不产AmpC酶的菌株分别为30.61%、6.12%和14.29%,二者对庆大霉素和头孢吡肟的耐药率差异均有统计学意义（P<0.01）,对亚胺培南的耐药率差异无统计学意义（P>0.05）。6株OprD₂缺失合并产AmpC酶的铜绿假单胞菌对亚胺培南、头孢他啶、头孢吡肟的耐药率分别为100.00%、66.67%和55.56%,8株OprD₂正常表达合并产AmpC酶的菌株分别为0.00%、25.00%和37.50%,二者差异有统计学意义（P<0.05）。结论铜绿假单胞菌多重耐药可能是由多种机制共同控制的,应加强铜绿假单胞菌产酶的监测及耐药基因的分子流行病学研究。

关键词: 铜绿假单胞菌, AmpC β-内酰胺酶, OprD2基因, ampC基因

Abstract:

Objective To understand AmpC beta-lactamase（AmpC） and outer membrane porin OprD₂ gene deletion in Pseudomonas aeruginosa. Methods The three-dimensional test was used to determine AmpC . Polymerase chain reaction（PCR） was used to determine outer membrane porin OprD₂ gene and ampC gene. The data were analyzed statistically. Results The 63 isolates of Pseudomonas aeruginosa were collected,of which 14 isolates（22.22%） produced AmpC,OprD₂ gene was positive in 22 isolates（OprD₂ gene deletion rate 65.08%） ,and ampC gene was positive in 62 isolates（93.94%）. The resistance rates to ampicillin,ampicillin / sulbactam,cefotetan and ceftriaxone and cefazolin were 100.00%. The resistance rates of AmpC-producing isolates to imipenem, gentamicin and cefepime were 42.85%,64.29% and 57.14%,respectively. The resistance rates of non-AmpC-producing isolates were 30.61%,6.12% and 14.29%,respectively. The resistance rates of Pseudomonas aeruginosa to gentamicin and cefepime had statistical significance between AmpC-producing and non-AmpC-producing isolates（P<0.01）,but there was no statistical significance for imipenem（P>0.05）. A total of 6 isolates of Pseudomonas aeruginosa had OprD₂ gene deletion,and the resistance rates to imipenem,ceftazidime and cefepime were 100.00%,66.67% and 55.56%. The resistance rates of 8 isolates of Pseudomonas aeruginosa with normal OprD₂ gene expression and AmpC-producing isolates were 0.00%,25.00% and 37.50%. Conclusions Multi-drug resistant Pseudomonas aeruginosa might be caused by a variety of mechanisms. Enzyme production and molecular epidemiological studies for Pseudomonas aeruginosa should be strengthened.

Key words: Pseudomonas aeruginosa, AmpC beta-lactamase, ampC gene, OprD2 gene

中图分类号:

R446.5

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图/表 3

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抗菌药物	产AmpC酶菌株（14株）	不产AmpC酶菌株（49株）
氨苄西林	14（100.00）	49（100.00）
氨苄西林-舒巴坦	14（100.00）	49（100.00）
阿米卡星	3（21.42）	8（16.33）
环丙沙星	3（21.42）	5（14.29）
头孢替坦	14（100.00）	49（100.00）
头孢曲松	14（100.00）	49（100.00）
头孢唑啉	14（100.00）	49（100.00）
头孢吡肟	8（57.14）	7（14.29）
呋喃妥因	13（92.86）	49（100.00）
庆大霉素	9（64.29）	3（6.12）
亚胺培南	6（42.85）	15（30.61）
左氧氟沙星	5（35.71）	12（ 24.48）
复方磺胺甲噁唑	14（100.00）	49（100.00）
头孢他啶	6（42.85）	21（42.86）
妥布霉素	1（7.14）	0（0.00）
哌拉西林-他唑巴坦	3（21.42）	9（18.37）

抗菌药物	产AmpC酶菌株（14株）	不产AmpC酶菌株（49株）
氨苄西林	14（100.00）	49（100.00）
氨苄西林-舒巴坦	14（100.00）	49（100.00）
阿米卡星	3（21.42）	8（16.33）
环丙沙星	3（21.42）	5（14.29）
头孢替坦	14（100.00）	49（100.00）
头孢曲松	14（100.00）	49（100.00）
头孢唑啉	14（100.00）	49（100.00）
头孢吡肟	8（57.14）	7（14.29）
呋喃妥因	13（92.86）	49（100.00）
庆大霉素	9（64.29）	3（6.12）
亚胺培南	6（42.85）	15（30.61）
左氧氟沙星	5（35.71）	12（ 24.48）
复方磺胺甲噁唑	14（100.00）	49（100.00）
头孢他啶	6（42.85）	21（42.86）
妥布霉素	1（7.14）	0（0.00）
哌拉西林-他唑巴坦	3（21.42）	9（18.37）

组别	株数	耐药性
组别	株数	头孢他啶	头孢吡肟	亚胺培南	哌拉西林-他唑巴坦
OprD₂缺失合并产AmpC酶菌	6	66.67（4/6）	55.56（5/6）	100.00（6/6）	33.33（2/6）
OprD₂缺失合并不产AmpC酶菌	35	40.00（14/35）^*	14.29（5/35）^*	31.43（11/35）^*	14.29（5/35）^*
OprD₂正常表达合并产AmpC酶菌	8	25.00（2/8）^*	37.50（3/8）^*	0.00（0/8）^*	12.50（1/8）^*
OprD₂正常表达合并不产AmpC酶菌	14	50.00（7/14）	14.29（2/14）^#	11.43（4/14）^#	28.57（4/14）

组别	株数	耐药性
组别	株数	头孢他啶	头孢吡肟	亚胺培南	哌拉西林-他唑巴坦
OprD₂缺失合并产AmpC酶菌	6	66.67（4/6）	55.56（5/6）	100.00（6/6）	33.33（2/6）
OprD₂缺失合并不产AmpC酶菌	35	40.00（14/35）^*	14.29（5/35）^*	31.43（11/35）^*	14.29（5/35）^*
OprD₂正常表达合并产AmpC酶菌	8	25.00（2/8）^*	37.50（3/8）^*	0.00（0/8）^*	12.50（1/8）^*
OprD₂正常表达合并不产AmpC酶菌	14	50.00（7/14）	14.29（2/14）^#	11.43（4/14）^#	28.57（4/14）

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铜绿假单胞菌产AmpC β-内酰胺酶及外膜孔蛋白OprD₂基因缺失分析

Analysis of AmpC beta-lactamase and outer membrane porin OprD₂ gene deletion in Pseudomonas aeruginosa

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