检验医学 ›› 2009, Vol. 24 ›› Issue (09): 651-654.

• 病毒耐药性研究专题 • 上一篇    下一篇

连接酶反应检测乙型肝炎病毒阿德福韦耐药突变的初步研究

王永忠;吴国祥;濮翔科;陈敏;肖君华;杨志军   

  1. 东华大学生物科学与技术研究所,上海,201620;江苏常州市第三人民医院检验科,江苏,常州,213001;上海复星医学科技发展有限公司,上海,200233
  • 收稿日期:2009-09-01 出版日期:2009-09-01 发布日期:2009-09-01
  • 通讯作者: 王永忠

Detection of adefovir-resistant mutations in Hepatitis B virus by the ligase detection reaction

WANG Yongzhong;WU Guoxiang;Pu Xiangke;CHEN Min;XIAO Junhua;YANG Zhijun   

  • Received:2009-09-01 Online:2009-09-01 Published:2009-09-01

摘要: 目的 建立一种基于连接酶检测反应(LDR)技术的方法,检测慢性乙型肝炎患者阿德福韦(ADV)耐药突变rtA181v/T和rtN236T.方法 设计特异性引物和针对不同突变类型的探针,聚合酶链反应(PCR)扩增后进行LDR,最后在测序仪上分析结果.以直接测序法作为对照分析55例临床标本,对结果不一致的标本进行亚克隆测序确认.结果 LDR能够在野生型质粒背景下检测到1%的rtA181V/T或rtN236T突变质粒,不与野生型质粒及血清常见病毒产生交叉扩增.55例临床标本中检测到8例(14.5%)rtA181V/T和rtN236T双突变,6例(10.9%)rtA181V/T单突变,7例(12.7%)rtN236T单突变,与直接测序法结果一致的标本有52例(94.5%).对3例结果不一致的标本进行亚克隆测序分析,结果与LDR一致.结论LDR是一种特异、敏感的方法,可以用于监测慢性乙型肝炎患者ADV耐药突变.

关键词: 连接酶检测反应, 乙型肝炎病毒, 阿德福韦, 耐药

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