检验医学 ›› 2004, Vol. 19 ›› Issue (03): 250-253.

• 分子生物学论著 • 上一篇    下一篇

5-脂氧合酶在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中的表达

李杰萍%梁统%周克元   

  1. 武警福建省总队医院检验科,福建,福州,350019%广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东,湛江,524023
  • 收稿日期:2004-03-01 出版日期:2004-03-01 发布日期:2004-03-01
  • 通讯作者: 李杰萍

Expression of 5-lipoxygenase in the peritoneal macrophages of rat cultured in vitro

  • Received:2004-03-01 Online:2004-03-01 Published:2004-03-01

摘要: 目的探讨5-脂氧合酶(5-LO)在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中的表达.方法分离大鼠腹腔巨噬细胞培养一定时间,用高效液相色谱、Western blot和RT-PCR分别观察5-LO催化的代谢产物的生物合成、5-LO和5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)表达的变化,并用毛细管电泳定量分析RT-PCR产物.结果体外培养24 h对5-LO以及FLAP的表达没有明显影响,5-LO酶活性没有明显的变化;培养到第72小时,5-LO mRNA和蛋白表达没有明显的影响,但FLAP几乎检测不到,mRNA的量明显降低,检测不到白三烯B4(LTB4)和5-羟二十碳四烯酸(5-HETE).进一步培养到第120小时,5-LO的mRNA和蛋白表达明显下降,FLAP的mRNA和蛋白检测不到.毛细管电泳定量分析结果显示,培养1、24和72 h,5-LO的相对表达量没有明显变化,培养到120 h则下降了约80%.结论 5-LO可以在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中稳定表达72 h.

关键词: 5-脂氧合酶, 5-脂氧合酶激活蛋白, 腹腔巨噬细胞, 毛细管电泳, 基因表达

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