实时逆转录-聚合酶链反应绝对定量实验优化的研究

检验医学 ›› 2003, Vol. 18 ›› Issue (06): 343-346.

实时逆转录-聚合酶链反应绝对定量实验优化的研究

蔡刚%李闻捷%沈茜

上海长海医院实验诊断科,上海,200433

收稿日期:2003-06-01 出版日期:2003-06-01 发布日期:2003-06-01
通讯作者: 蔡刚

Optimizing assay for absolute quantification of real-time reverse transcription polymerase chain reaction

Received:2003-06-01 Online:2003-06-01 Published:2003-06-01

摘要/Abstract

摘要： 目的探讨优化实验反应条件,使实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)绝对定量能获得准确可靠的结果.方法建立质粒标准品作为外参照;以管家基因GAPDH作为内参照,并对Mg2+、引物与探针比例、Buffer等进行优化.结果优化条件后,RT-PCR反应的扩增效率接近了理论最佳值,并可使靶基因与管家基因扩增效率保持一致,保证了方法的稳定性和可靠性.结论为了获得可靠、重复性好的实时RT-PCR绝对定量结果,应对实验方法进行优化.

中图分类号:

蔡刚;李闻捷;沈茜. 实时逆转录-聚合酶链反应绝对定量实验优化的研究[J]. 检验医学, 2003, 18(06): 343-346.

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实时逆转录-聚合酶链反应绝对定量实验优化的研究

Optimizing assay for absolute quantification of real-time reverse transcription polymerase chain reaction

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