检验医学 ›› 2002, Vol. 17 ›› Issue (04): 201-203.

• 微生物学检验论著 • 上一篇    下一篇

荧光探针杂交-聚合酶链反应检测沙门菌的研究及应用

张建琼%韩光明%张雪萍%林陵%高良%单祥年   

  1. 东南大学基础医学院微生物学与免疫学系,南京,210009
  • 收稿日期:2002-04-01 出版日期:2002-04-01 发布日期:2002-04-01
  • 通讯作者: 张建琼

Use of a fluorogenic probe in a polymerase chain reaction assay for rapid detection of salmonella species

  • Received:2002-04-01 Online:2002-04-01 Published:2002-04-01

摘要: 目的建立一种快速检测沙门菌的荧光探针杂交-聚合酶链反应(PCR)方法.方法利用Taq DNA聚合酶的5'-3'核酸外切酶活性降解特异性杂交于模板上的荧光标记探针,导致荧光强度的改变,通过检测荧光强度分析PCR扩增产物.结果选用13株常见致病性沙门菌和7株非沙门菌进行特异性分析,所有沙门菌的荧光△RQ值介于3~8之间,而所有非沙门菌的荧光△RQ值均小于1;在敏感性分析中,采用菌落CFU计数法,最低限度可检测到每PCR扩增体系中含2.25 CFU的沙门菌;与传统细菌培养鉴定方法对照,对40份各种标本进行沙门菌的检测,结果该方法的特异性为100%,敏感性为93.1%,两种方法的符合率为95%.结论用荧光探针杂交-PCR检测沙门菌,是一种快速、敏感的方法.

关键词: 聚合酶链反应, 荧光探针, 沙门菌

中图分类号: