apo A1和apo B侯选参考方法在室间质量评价中的应用价值

doi:10.3969/j.issn.1673-8640.2021.03.006

摘要/Abstract

摘要：

目的探讨载脂蛋白（apo）A1和apo B的候选参考方法在室间质量评价（EQA）中的应用价值。方法以5个水平的冰冻人血清制品作为EQA质评物,采用免疫透射比浊法（ITA）检测。采用同位素稀释液相色谱串联质谱（ID-LC-MS/MS）定量技术对EQA样本进行定值,包括变性、烷基化和胰蛋白酶酶解处理,使用C18色谱柱分离,质谱采用正离子模式和多反应监测定量。结果有340家实验室使用ITA进行检测。apo A1项目,EQA2~EQA4 ID-LC-MS/MS结果均低于ITA的中位数;EQA1和EQA5 ID-LC-MS/MS结果高于ITA的中位数;Apo B项目,除EQA4外,其他ID-LC-MS/MS结果均低于ITA的中位数。结论采用ID-LC-MS/MS技术的候选参考方法在基于靶值的评价中具有一定的应用价值。

关键词: 载脂蛋白A1, 载脂蛋白B, 候选参考方法, 室间质量评价

Abstract:

Objective To investigate the application of candidate reference method of apolipoprotein（apo） A1 and apo B in external quality assessment（EQA）. Methods Five levels of frozen human serum products were used for EQA samples. Immunoturbidimetry （ITA）was used for the detection. EQA samples were quantified by isotope dilution liquid chromatography-tandem mass spectrometry（ID-LC-MS/MS）. Samples underwent denaturing,alkalization and tryps in digestion,and were then separated by C18 column and quantified by positive ion mode and multiple reaction monitoring. Results ITA was used in 340 participants. As for apo A1,ID-LC-MS/MS gave values lower than the median of ITA for EQA2-EQA4,but not for EQA1 and EQA5. As for apo B,except EQA4,all ID-LC-MS/MS values were lower than the median of ITA. Conclusions Candidate reference method based on ID-LC-MS/MS can offer application value of assessment based on target value.

Key words: Apolipoprotein A1, Apolipoprotein B, Candidate reference method, External quality assessment

中图分类号:

R446

李卿, 居漪, 唐丽萍, 金中淦, 孙贺伟. apo A1和apo B侯选参考方法在室间质量评价中的应用价值[J]. 检验医学, 2021, 36(3): 259-262.

LI Qing, JU Yi, TANG Liping, JIN Zhonggan, SUN Hewei. Application of candidate reference method of apolipoprotein A1 and apolipoprotein B in external quality assessment[J]. Laboratory Medicine, 2021, 36(3): 259-262.

图/表 4

参考文献 13

[1]	CONTOIS J H, DELATOUR V. Apolipoprotein B measurement:need for standardization[J]. J Clin Lipidol, 2018,12(2):264-265. DOI URL PMID
[2]	JELLINGER P S, HANDELSMAN Y, ROSENBLIT P D, et al. American association of clinical endocrinologists and american college of endocrinology guidelines for management of dyslipidemia and prevention of cardiovascular disease[J]. Endocr Pract, 2017,23(Suppl 2):1-87. URL PMID
[3]	VAN DEN BROEK I, SMIT N P, ROMIJN F P, et al. Evaluation of interspecimen trypsin digestion efficiency prior to multiple reaction monitoring-based absolute protein quantification with native protein calibrators[J]. J Proteome Res, 2013,12(12):5760-5774. DOI URL PMID
[4]	SMIT N P, ROMIJN F P, VAN DEN BROEK I, et al. Metrological traceability in mass spectrometry-based targeted protein quantitation:a proof-of-principle study for serum apolipoproteins A-I and B100[J]. J Proteomics, 2014,109:143-161. URL PMID
[5]	VAN DEN BROEK I, ROMIJN F P, NOUTA J, et al. Automated multiplex LC-MS/MS assay for quantifying serum apolipoproteins A-I,B,C-I,C-II,C-III,and E with qualitative apolipoprotein E phenotyping[J]. Clin Chem, 2016,62(1):188-197. URL PMID
[6]	李卿, 居漪, 孙贺伟, 等. ID-LC-MS检测血清载脂蛋白A-I和B载脂蛋白的多肽释放研究[J]. 中华检验医学杂志, 2018,11(41):870-874.
[7]	PAGANO S, CARBONE F, BURGER F, et al. Anti-apolipoprotein A-1 auto-antibodies as active modulators of atherothrombosis[J]. 2016,116(3):554-564.
[8]	DITTRICH J, ADAM M, MAAS H, et al. Targeted on-line SPE-LC-MS/MS assay for the quantitation of 12 apolipoproteins from human blood[J]. Proteomics, 2018,18(3-4). DOI URL PMID
[9]	PARKS B A, SCHIELTZ D M, ANDREWS M L, et al. High throughput quantification of apolipoproteins A-I and B-100 by isotope dilution MS targeting fast trypsin releasable peptides without reduction and alkylation[J]. Proteomics. Clin Appl, 2017,11(7-8):1600128.
[10]	PANTEGHINI M, CERIOTTI F, JONES G, et al. Strategies to define performance specifications in laboratory medicine：3 years on from the Milan Strategic Conference[J]. Clin Chem Lab Med, 2017,55(12):1849-1856. DOI URL PMID
[11]	冯仁丰. 临床实验室分析质量目标的共识(下)[J]. 检验医学, 2016,31(2):83-86.
[12]	中国成人血脂异常防治指南修订联合委员会. 中国成人血脂异常防治指南(2016年修订版)[J]. 中国循环杂志, 2016,31(10):937-950.
[13]	DÍAZ-GARZÓN J, FERNÁNDEZ-CALLE P, MINCHINELA J, et al. Biological variation data for lipid cardiovascular risk assessment biomarkers. A systematic review applying the biological variation data critical appraisal checklist(BIVAC)[J]. Clin Chim Act, 2019,495:467-475.

蛋白名称	肽段用途	肽段（简写）	一级结构中位置	母离子/（m/z）	子离子/（m/z）	碰撞能量/V
apo A1	定量	VQPYLDDFQK、	121-130	626.8	1025.5	26
		SIL^①-VQPYLDDFQK		629.7	1028.5	18
	定性	AKPALEDLR	231-239	506.8	813.4	24
apo B	定量	TEVIPPLIENR、	950-960	640.9	838.5	30
		SIL^①-TEVIPPLIENR		644	841.5	25
	定性	TGISPLALIK	220-229	506.8	741.5	30

蛋白名称	肽段用途	肽段（简写）	一级结构中位置	母离子/（m/z）	子离子/（m/z）	碰撞能量/V
apo A1	定量	VQPYLDDFQK、	121-130	626.8	1025.5	26
		SIL^①-VQPYLDDFQK		629.7	1028.5	18
	定性	AKPALEDLR	231-239	506.8	813.4	24
apo B	定量	TEVIPPLIENR、	950-960	640.9	838.5	30
		SIL^①-TEVIPPLIENR		644	841.5	25
	定性	TGISPLALIK	220-229	506.8	741.5	30

项目	EQA1		EQA2		EQA3		EQA4		EQA5
项目	中位数/（g/L）	变异系数/ %	中位数/（g/L）	变异系数/ %	中位数/（g/L）	变异系数/ %	中位数/（g/L）	变异系数/ %	中位数/（g/L）	变异系数/ %
apo A1	2.17	6.86	1.78	7.57	2.54	7.71	0.90	8.49	1.46	8.21
apo B	1.39	17.08	1.12	19.46	1.56	16.18	0.54	16.67	0.92	22.28

项目	EQA1		EQA2		EQA3		EQA4		EQA5
项目	中位数/（g/L）	变异系数/ %	中位数/（g/L）	变异系数/ %	中位数/（g/L）	变异系数/ %	中位数/（g/L）	变异系数/ %	中位数/（g/L）	变异系数/ %
apo A1	2.17	6.86	1.78	7.57	2.54	7.71	0.90	8.49	1.46	8.21
apo B	1.39	17.08	1.12	19.46	1.56	16.18	0.54	16.67	0.92	22.28

[1]	杨雪, 朱俊, 蒋玲丽, 王青, 胡晓波. 上海地区9种新型冠状病毒核酸检测试剂盲样检测结果一致性分析[J]. 检验医学, 2023, 38(8): 776-780.
[2]	张为民, 李婷, 张琛, 谢楠, 赵飞, 吴霞, 孟庆昊, 李敏, 高选, 杨斯桀. Youden图在精子浓度室间质量评价中的应用[J]. 检验医学, 2023, 38(2): 167-171.
[3]	周维, 诸佩超, 宋颖, 缪颖波, 赵强, 徐翀. 抗Xa因子活性室间质量评价调查品制备及应用[J]. 检验医学, 2023, 38(12): 1183-1185.
[4]	张敏敏, 陈蓉, 王庆忠, 徐蓉, 刘学杰, 崔琳, 罗云桃, 夏启航, 钱诚凯, 王敬华. 沙眼衣原体室间质量控制质控品的制备及其应用[J]. 检验医学, 2023, 38(1): 78-80.
[5]	唐宁波, 刘冠财, 刘晓雨, 杨丰繁, 龚志梅, 孙可其. 洋地黄毒苷候选参考方法的建立及评价[J]. 检验医学, 2022, 37(5): 456-462.
[6]	邓山鹰, 裴雨晴, 张春莹, 谢恒, 蒙强, 马莹. 2013—2020年四川大学华西医院寄生虫形态学室间质量评价结果分析[J]. 检验医学, 2022, 37(2): 188-193.
[7]	杨雪, 居漪, 欧元祝, 朱宇清, 徐翀, 蒋玲丽, 王青, 周靖. 上海市检验结果互认定量项目室间质量评价结果分析[J]. 检验医学, 2022, 37(12): 1129-1134.
[8]	郑家华, 姚艳影, 高庆玲, 董晔. Lp（a）、apo B/apo A-1比值对AMI患者介入治疗后发生主要不良心血管事件的预测价值[J]. 检验医学, 2022, 37(12): 1141-1145.
[9]	鲍芸, 权静, 张芃胤, 肖艳群. 载脂蛋白E基因分型检测室间质量评价计划制定与实施[J]. 检验医学, 2022, 37(10): 989-992.
[10]	张芃胤, 权静, 王雪亮, 肖艳群, 鲍芸. 上海地区伊立替康药物代谢相关基因检测室间质量评价结果分析[J]. 检验医学, 2021, 36(8): 875-879.
[11]	陈蓉, 张敏敏, 夏启航, 钱诚凯, 崔琳, 刘学杰, 徐蓉, 王庆忠, 葛平, 黄维纲, 王敬华. 上海地区真菌培养鉴定及体外药物敏感性试验室间质量评价结果分析[J]. 检验医学, 2021, 36(4): 441-443.
[12]	方慧玲, 葛丹红, 朱宇清, 朱岭峰, 赵晓君, 陈子齐, 王梓蒙. 2015—2019年上海地区25-羟基维生素D室间质量评价结果分析[J]. 检验医学, 2021, 36(2): 219-224.
[13]	孙贺伟, 居漪, 朱岭峰, 李卿, 金中凎, 张素洁. 同位素稀释液相色谱-串联质谱法检测血清睾酮候选参考方法的建立及应用[J]. 检验医学, 2021, 36(10): 1064-1069.
[14]	王晟, 段小勇, 刘兴态. 实验室内血液分析仪间白细胞分类结果比对方法的建立与应用[J]. 检验医学, 2020, 35(8): 829-831.
[15]	康凤凤, 单志明, 宋超, 夏晓华, 陈倩, 郦卫星. 应用西格玛度量和稳健算法评价不同检测系统糖化血红蛋白检测结果的可比性[J]. 检验医学, 2020, 35(2): 168-172.