摘要： 目的 建立柱上堆积高效毛细管电泳法同时检测细胞内氨甲蝶呤(MTX)及其6种代谢产物氨甲蝶呤多聚谷氨酸链( MTXPG)的方法.方法 采用高效毛细管电泳技术,以75 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH值7.40)作为分离介质,用水和乙腈( V/V=1∶1)作溶剂重组残留样本的方法进行柱上样本堆积,0.5 psi压力进样,进样时间50 s,在分离电压28 kV、检测波长300 nm条件下对MTX和MXPG进行分离.在此基础上,检测细胞内MTX及其代谢产物MTXPG的含量.结果 通过不断改变分离缓冲液中异丙醇(5％、8％、10％,V/V)和羟丙基-β-环糊精( hp-β-CD)浓度(20、25、30 mmol/L),发现在含8％异丙醇、25 mmol/L hp-β-CD的缓冲液条件下,30 min内实现7种组分的完全分离.用水和乙腈(V/V=1∶1)作溶剂重组残留样本进行柱上样本堆积的方法可使检测灵敏度提高10倍.结论 建立柱上样本堆积高效毛细管电泳法可同时检测细胞内MTX及其代谢产物MTXPG.该方法具有高效、快速、简便、高灵敏度的特点.

中图分类号: 

• R979.1