三元复合因子Net基因的克隆及其真核表达

检验医学 ›› 2009, Vol. 24 ›› Issue (06): 423-427.

三元复合因子Net基因的克隆及其真核表达

李百文;倪培华;诸琦;徐洪

上海交通大学医学院附属瑞金医院检验系,上海,200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科,上海,200025;上海交通大学医学院基础医学院生物化学教研室,上海,200025

收稿日期:2009-06-01 出版日期:2009-06-01 发布日期:2009-06-01
通讯作者: 李百文

Clone of ternary complex factor Net cDNA and analysis its expression and function

LI Baiwen;NI Peihua;ZHU Qi;XU Hong

Received:2009-06-01 Online:2009-06-01 Published:2009-06-01

摘要/Abstract

摘要： 目的克隆人Net基因,构建Net基因表达载体并诱导融合蛋白表达.方法从正常人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中抽提总RNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出人全长Net cDNA,构建pEGFP-N1/Net重组体质粒,并将其转染入高表达原癌基因c-fos的人胰腺癌细胞PANC-1中,分析转染细胞的Net表达水平和对细胞增殖力的影响.结果从人胰腺癌细胞PANC-1中克隆出长约1 224 bp的Net基因目的片段,成功构建了重组质粒pEGFP-N1/Net,诱导表达目的蛋白后,Net抑制原癌基因c-fos的表达,进而抑制人胰腺癌细胞的增殖.结论构建重组质粒pEGFP-N1/Net并表达Net融合蛋白,其抑制了细胞的增殖,为进一步研究Net的各种生物学活性及作用机制奠定了基础.

中图分类号:

李百文;倪培华;诸琦;徐洪. 三元复合因子Net基因的克隆及其真核表达[J]. 检验医学, 2009, 24(06): 423-427.

LI Baiwen;NI Peihua;ZHU Qi;XU Hong. Clone of ternary complex factor Net cDNA and analysis its expression and function [J]. , 2009, 24(06): 423-427.

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