检验医学 ›› 2002, Vol. 17 ›› Issue (04): 242-244.

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用PCR-SSCP快速检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因的突变

刘庆鸣%万本愿%吴茂红%孙敬%王文丁%尹爱华   

  1. 江西省人民医院,南昌,330006%江西省临床检验中心,南昌,330006%广东中山医科大学达安基因诊断中心,广州,510089
  • 收稿日期:2002-04-01 出版日期:2002-04-01 发布日期:2002-04-01
  • 通讯作者: 刘庆鸣

  • Received:2002-04-01 Online:2002-04-01 Published:2002-04-01

摘要: 目的了解本地区结核分枝杆菌对利福平(RFP)耐药基因的突变情况,探讨利用分子生物学方法直接快速检测结核分枝杆菌耐药基因型的试验方法.方法针对rpoB基因设计一对引物(扩增产物为189bp),采用聚合链酶反应-单链构象多态性银染(PCR-SSCP)方法,以标准结核分枝杆菌H38Rv为对照,检测临床分离的35株结核分枝杆菌rpoB基因突变情况并以药敏试验结果做对照分析.结果以药敏试验结果为对照,35株临床分离株中有9株RFP敏感株的SSCP带与结核分枝杆菌标准株(H37Rv)相同,26株RFP耐药株中有24检测到突变图谱,与药敏试验结果对照阳性率为92.3%,特异性为100%.结论 RpoB基因是一种高度保守序列,结核分枝杆菌耐RFP是由于rpoB基因突变所致.本研究针对其高突变区域设计一对引物,运用PCR-SSCP法具有简便、快速、准确的特点,可以对临床标本中结核分枝杆菌进行检测,以满足临床早期诊治的需要.

关键词: 结核分枝杆菌, 利福平, 药物耐受性, 聚合酶链反应

中图分类号: