实时荧光核酸恒温扩增技术在解脲脲原体检测中的临床应用价值

doi:10.3969/j.issn.1673-8640.2017.011.023

检验医学 ›› 2017, Vol. 32 ›› Issue (11): 1043-1045.DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2017.011.023

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实时荧光核酸恒温扩增技术在解脲脲原体检测中的临床应用价值

石瑛, 王云凤, 路璐, 任静静, 马丹, 李琳

郑州大学第三附属医院检验科,河南郑州 450052

收稿日期:2016-12-19 出版日期:2017-11-30 发布日期:2017-12-07
作者简介:null
作者简介：石瑛,女,1971年生,博士,副主任技师,主要从事分子生物学检验研究。
基金资助:
河南省科技厅基础研究项目（132300410128）

Determination of Ureaplasma urealyticum by real-time fluorescence isothermal RNA amplification assay

SHI Ying, WANG Yunfeng, LU Lu, REN Jingjing, MA Dan, LI Lin

Department of Clinical Laboratory,the Third Affiliated Hospital of Zhengzhou University,Zhengzhou 450052,Henan,China

Received:2016-12-19 Online:2017-11-30 Published:2017-12-07

摘要/Abstract

摘要：

目的初步探讨利用实时荧光核酸恒温扩增技术（SAT）检测解脲脲原体（UU）RNA的临床应用价值。方法对200例捐精体检者采集尿道拭子,分别采用SAT检测UU RNA和实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测UU DNA,并采用培养法检测UU病原体;对UU阳性者进行抗菌药物治疗后,再次采用qRT-PCR和SAT进行病原体检测,并对结果进行比较分析。结果培养法、qRT-PCR和SAT检测UU的阳性率分别为20.0%（40/200）、23.0%（46/200）和22.5%（45/200）;三者间一致性比较显示,Kappa值>0.75。对于首次筛查UU DNA阳性者进行抗菌药物治疗,15 d后qRT-PCR和SAT的阳性率分别为39.1%（18/46）和32.6%（15/46）,2种方法阳性率差异尽管不具有统计学意义,但有用药后SAT检测UU的阳性率低于qRT-PCR的趋势。结论 UU培养法、SAT和qRT-PCR均可以用于UU的筛查,但用SAT检测UU RNA在判断治疗是否有效上具有更高的临床应用价值。

关键词: 解脲脲原体, 实时荧光核酸恒温扩增技术, RNA, 细菌培养

Abstract:

Objective To evaluate the determination of Ureaplasma urealyticum（UU） by real-time fluorescence isothermal RNA amplification assay（SAT）. Methods A total of 200 cases of urethral swabs from sperm donors were collected and determined by SAT for UU RNA,real-time fluorescence quantitation polymerase chain reaction（qRT-PCR） for UU DNA and culturing for UU pathogens. UU-positive sperm donors were treated with antibiotics,then they were determined again for UU by qRT-PCR and SAT. Results The positive rates by culturing,qRT-PCR and SAT for UU were 20.0%（40/200）,23.0%（46/200） and 22.5%（45/200）,respectively. The Kappa value was >0.75 for the consistency of culturing,qRT-PCR and SAT. After antibiotics were given for UU-positive sperm donors for 15 d,the positive rates of qRT-PCR and SAT were 39.1%（18/46） and 32.6%（15/46）,respectively. Although there was no statistical significance,the positive rate of SAT was lower than that of qRT-PCR after treatment. Conclusions Culturing,SAT and qRT-PCR can be used for UU screening. However,UU RNA determination by SAT for patients after being given antibiotics is potential.

Key words: Ureaplasma urealyticum, Real-time fluorescence isothermal RNA amplification assay, RNA, Culturing

中图分类号:

R446.5

石瑛, 王云凤, 路璐, 任静静, 马丹, 李琳. 实时荧光核酸恒温扩增技术在解脲脲原体检测中的临床应用价值[J]. 检验医学, 2017, 32(11): 1043-1045.

SHI Ying, WANG Yunfeng, LU Lu, REN Jingjing, MA Dan, LI Lin. Determination of Ureaplasma urealyticum by real-time fluorescence isothermal RNA amplification assay[J]. Laboratory Medicine, 2017, 32(11): 1043-1045.

图/表 3

参考文献 9

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方法	阳性（例）	阴性（例）	阳性率（%）	χ²值	P值
qRT-PCR	46	154	23.0	0.605	0.739
SAT	45	155	22.5	0.605	0.739
培养法	40	160	20.0

方法	阳性（例）	阴性（例）	阳性率（%）	χ²值	P值
qRT-PCR	46	154	23.0	0.605	0.739
SAT	45	155	22.5	0.605	0.739
培养法	40	160	20.0

方法	阳性（例）	阴性（例）	阳性率（%）	χ²值	P值
qRT-PCR	18	28	39.1	1.33	0.25
SAT	15	31	32.6	1.33	0.25

方法	阳性（例）	阴性（例）	阳性率（%）	χ²值	P值
qRT-PCR	18	28	39.1	1.33	0.25
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实时荧光核酸恒温扩增技术在解脲脲原体检测中的临床应用价值

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图/表 3

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