血清奥卡西平、10-羟基卡马西平候选参考测量程序建立和性能评估

doi:10.3969/j.issn.1673-8640.2025.11.009

检验医学 ›› 2025, Vol. 40 ›› Issue (11): 1082-1090.DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2025.11.009

血清奥卡西平、10-羟基卡马西平候选参考测量程序建立和性能评估

林静¹, 李全乐²(), 于婷³, 王惠民⁴, 沈敏², 屠敏敏², 陈传定², 潘荆珏¹, 马静霞⁵()

1.宁波市第二医院医学实验部，浙江宁波 315010
2.美康生物科技股份有限公司参考实验室，浙江宁波 315104
3.中国食品药品检定研究院，北京 100050
4.南通大学附属医院检验科，江苏南通 226019
5.宁波市康复医院检验科，浙江宁波 315000

收稿日期:2024-07-23 修回日期:2025-06-12 出版日期:2025-11-30 发布日期:2025-12-12
通讯作者: 李全乐，E-mail：quanle.li@nbmedicalsystem.com；马静霞，E-mail：1103874497@qq.com。
作者简介:林静，女，1988年生，硕士，工程师，主要从事临床药物检测工作。
基金资助:
浙江省科技厅长三角科技创新共同体联合攻关项目(2023CSJGG1800);浙江省医药卫生科技项目(2025KY1400)

Establishment and performance evaluation of candidate reference measurement procedures for serum oxcarbazepine and 10-hydroxy carbamazepine

LIN Jing¹, LI Quanle²(), YU Ting³, WANG Huimin⁴, SHEN Min², TU Minmin², CHEN Chuanding², PAN Jingjue¹, MA Jingxia⁵()

1. Centre for Medical Research，Ningbo No.2 Hospital，Ningbo 315010，Zhejiang，China
2. Reference Laboratory，Medical System Biotechnology Co.，Ltd.，Ningbo 315104，Zhejiang，China
3. National Institutes for Food and Drug Control，Beijing 100050，China
4. Department of Clinical Laboratory，the Affiliated Hospital of Nantong University，Nantong 226019，Jiangsu，China
5. Department of Clinical Laboratory，Ningbo Rehabilitation Hospital，Ningbo 315000，Zhejiang，China

Received:2024-07-23 Revised:2025-06-12 Online:2025-11-30 Published:2025-12-12

摘要/Abstract

摘要：

目的建立基于同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID LC-MS/MS）的血清奥卡西平（OXC）、10-羟基卡马西平（MHD）候选参考测量程序，并进行性能评估。方法分别以OXC-²H₄、MHD-²H₄为内标，采用蛋白沉淀法（PPT）对样本进行前处理。色谱采用Phenomenex Kinetex F5色谱柱，流动相为0.1%甲酸水-0.1%甲酸甲醇，梯度洗脱；质谱采用正离子多反应监测（MRM）模式。对方法的线性、定量限（LOQ）、基质效应、正确度、精密度、稳定性、不确定度进行评估，并与临床实验室常规检测系统（LC-MS/MS）进行比较。结果 ID LC-MS/MS测定血清OXC、MHD的线性范围为0.02~50.00 μg·mL^-1，定量限为0.015 μg·mL^-1。OXC的相对基质效应为-2.09%~2.12%，加标回收率为100.00%~101.62%。MHD的相对基质效应为-0.87%~2.99%，加标回收率为101.39%~102.08%。OXC和MHD的批内、批间变异系数（CV）均<3%，相对扩展不确定度≤2.57%。2种方法检测血清OXC、MHD的结果具有良好的相关性。采用经候选参考测量程序校准后的常规检测系统检测2024年全国血清治疗药物监测室间质量评价计划5个浓度血清样本，偏倚为0.00%~3.64%。结论成功建立了基于ID LC-MS/MS的血清OXC、MHD候选参考测量程序，可用于OXC、MHD药物浓度监测（TDM）项目的标准化。

关键词: 奥卡西平, 10-羟基卡马西平, 同位素稀释液相色谱-串联质谱, 参考方法

Abstract:

Objective To establish a candidate reference measurement procedure for serum oxcarbazepine （OXC） and 10-hydroxy carbamazepine （MHD） using isotope dilution liquid chromatography-tandem mass spectrometry （ID LC-MS/MS），and to evaluate its performance. Methods The samples were pre-treated using protein precipitation （PPT） with OXC-²H₄ and MHD-²H₄ as internal standards. The chromatography used a Phenomenex Kinetex F5 column，with a mobile phase of 0.1% formic acid water -0.1% formic acid methanol and gradient elution；the mass spectrometry used positive ion multiple reaction monitoring （MRM） mode. The linearity，limit of quantification （LOQ），matrix effect，accuracy，precision，stability and uncertainty of the method were evaluated，which was compared with the routine determination system （LC-MS/MS） in clinical laboratories. Results The linear range of ID LC-MS/MS for serum OXC and MHD was 0.02-50.00 μg·mL^-1，and the LOQ was 0.015 μg·mL^-1. The relative matrix effect of OXC was -2.09%-2.12%，and the recovery rate was 100.00%-101.62%. The relative matrix effect of MHD was -0.87%-2.99%，and the recovery rate was 101.39%-102.08%. The within-run and between-run coefficients of variation（CV）of OXC and MHD were both <3%. The relative expanded uncertainty was ≤2.57%. The results of the 2 methods for determining serum OXC and MHD had good correlation. Using the routine determination system calibrated by the candidate reference measurement procedure to determine 5 serum samples with different concentrations from the 2024 National Serum Therapeutic Drug Monitoring Inter-laboratory Quality Evaluation Program，the deviation was 0.00%-3.64%. Conclusions A candidate reference measurement procedure for serum OXC and MHD based on ID LC-MS/MS was successfully established，which can be used for the standardization of OXC and MHD therapeutic drug monitoring （TDM） projects.

Key words: Oxcarbazepine, 10-Hydroxy carbamazepine, Isotope dilution liquid chromatography-tandem mass spectrometry, Reference method

中图分类号:

R446.1

林静, 李全乐, 于婷, 王惠民, 沈敏, 屠敏敏, 陈传定, 潘荆珏, 马静霞. 血清奥卡西平、10-羟基卡马西平候选参考测量程序建立和性能评估[J]. 检验医学, 2025, 40(11): 1082-1090.

LIN Jing, LI Quanle, YU Ting, WANG Huimin, SHEN Min, TU Minmin, CHEN Chuanding, PAN Jingjue, MA Jingxia. Establishment and performance evaluation of candidate reference measurement procedures for serum oxcarbazepine and 10-hydroxy carbamazepine[J]. Laboratory Medicine, 2025, 40(11): 1082-1090.

图/表 8

参考文献 27

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项目	加标浓度/（μg·mL^-1）	均值/（μg·mL^-1）	平均回收率/%	批内CV/%	批间CV/%
OXC
低浓度	0.051	0.051	100.00	1.92~1.96	1.13
中浓度	4.989	5.070	101.62	1.67~2.08	1.01
高浓度	39.996	40.123	100.32	0.80~1.88	1.01
MHD
低浓度	0.053	0.054	101.89	1.85~1.89	1.07
中浓度	5.012	5.116	102.08	1.42~2.01	1.82
高浓度	40.125	40.683	101.39	0.62~1.41	1.59

项目	加标浓度/（μg·mL^-1）	均值/（μg·mL^-1）	平均回收率/%	批内CV/%	批间CV/%
OXC
低浓度	0.051	0.051	100.00	1.92~1.96	1.13
中浓度	4.989	5.070	101.62	1.67~2.08	1.01
高浓度	39.996	40.123	100.32	0.80~1.88	1.01
MHD
低浓度	0.053	0.054	101.89	1.85~1.89	1.07
中浓度	5.012	5.116	102.08	1.42~2.01	1.82
高浓度	40.125	40.683	101.39	0.62~1.41	1.59

项目	峰面积比值					峰面积比值均值	相对基质效应/%
项目	第1次检测	第2次检测	第3次检测	第4次检测	第5次检测	峰面积比值均值	相对基质效应/%
OXC
A	9.138	8.795	8.994	9.000	8.934	8.972
B	3.525	3.538	3.509	3.522	3.636	3.546
C	7.644	7.730	7.820	7.718	7.699	7.722	-2.09
D	6.530	6.286	6.350	6.371	6.403	6.388	2.06
E	4.753	4.724	4.735	4.733	4.703	4.729	2.12
MHD
A	10.094	10.129	10.243	10.209	10.043	10.144
B	4.066	4.021	4.038	4.130	4.101	4.071
C	8.873	8.798	8.794	8.910	8.883	8.852	-0.87
D	7.251	7.500	7.289	7.259	7.259	7.312	2.87
E	5.433	5.499	5.449	5.383	5.454	5.444	2.99

项目	峰面积比值					峰面积比值均值	相对基质效应/%
项目	第1次检测	第2次检测	第3次检测	第4次检测	第5次检测	峰面积比值均值	相对基质效应/%
OXC
A	9.138	8.795	8.994	9.000	8.934	8.972
B	3.525	3.538	3.509	3.522	3.636	3.546
C	7.644	7.730	7.820	7.718	7.699	7.722	-2.09
D	6.530	6.286	6.350	6.371	6.403	6.388	2.06
E	4.753	4.724	4.735	4.733	4.703	4.729	2.12
MHD
A	10.094	10.129	10.243	10.209	10.043	10.144
B	4.066	4.021	4.038	4.130	4.101	4.071
C	8.873	8.798	8.794	8.910	8.883	8.852	-0.87
D	7.251	7.500	7.289	7.259	7.259	7.312	2.87
E	5.433	5.499	5.449	5.383	5.454	5.444	2.99

项目	理论浓度/（μg·mL^-1）	实测浓度/（μg·mL^-1）	回收率/ %
OXC
室温放置8 h	0.051	0.050	98.04
	39.996	40.812	102.04
-20 ℃冻融5次	0.051	0.049	96.08
	39.996	39.223	98.07
-20 ℃放置3个月	0.051	0.049	96.08
	39.996	39.576	98.95
-80 ℃放置6个月	0.051	0.050	98.04
	39.996	40.536	101.35
MHD
室温放置8 h	0.053	0.052	98.11
	40.125	40.253	100.32
-20 ℃冻融5次	0.053	0.052	98.11
	40.125	40.056	99.83
-20 ℃放置3个月	0.053	0.054	101.89
	40.125	40.669	101.36
-80 ℃放置6个月	0.053	0.053	100.00
	40.125	40.182	100.14

血清奥卡西平、10-羟基卡马西平候选参考测量程序建立和性能评估

Establishment and performance evaluation of candidate reference measurement procedures for serum oxcarbazepine and 10-hydroxy carbamazepine

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项目	检测方式	母离子（m/z）	子离子（m/z）	RF电压/V	碰撞电压/V
OXC	定量	253	180	35	30
OXC	定性	253	236	35	20
OXC-²H₄	定量	257	184	35	30
MHD	定量	255	194	100	30
MHD	定性	255	237	100	15
MHD-²H₄	定量	259	198	100	30

项目	理论浓度/（μg·mL^-1）	实测浓度/（μg·mL^-1）	回收率/%
OXC
室温	0.051	0.050	98.04
	39.996	39.867	99.68
进样器	0.051	0.051	100.00
	39.996	39.695	99.25
MHD
室温	0.053	0.052	98.11
	40.125	40.562	101.09
进样器	0.053	0.052	98.11
	40.125	40.264	100.35

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