检验医学 ›› 2004, Vol. 19 ›› Issue (06): 563-565.

• 分子生物学论著 • 上一篇    下一篇

副溶血弧菌TDH基因的克隆与表达

季慧峰%倪培华%吴洁敏   

  1. 上海第二医科大学附属宝钢医院检验科,上海,201900%上海第二医科大学附属瑞金医院检验系,上海,200025
  • 收稿日期:2004-06-01 出版日期:2004-06-01 发布日期:2004-06-01
  • 通讯作者: 季慧峰

  • Received:2004-06-01 Online:2004-06-01 Published:2004-06-01

摘要: 目的对副溶血弧菌TDH基因进行克隆、鉴定与表达,为制备单抗、诊断试剂及进一步深入研究TDH的功能奠定基础.方法 用聚合酶链反应(PCR)扩增TDH基因将扩增的产物连接于测序载体pGEM-T上,经测序反应确定无误后,再将PCR产物与原核表达载体pQE100构建表达TDH的重组质粒,将重组质粒先转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,经双酶切鉴定后,再转化入表达宿主大肠杆菌BL21菌株内,对转化菌株进行诱导后,破菌,进行SDS-PAGE电泳.结果 电泳发现转化了重组质粒的菌株有表达蛋白,其表达的蛋白质相对分子质量为24 000.结论 TDH基因成功克隆到表达质粒内并表达,为制备单抗、诊断试剂与其致病机制研究奠定了基础.

关键词: 副溶血弧, 原核表达载体, 克隆, 表达

中图分类号: