BIOMED-2标准化免疫球蛋白基因重排技术在石蜡包埋弥漫大B细胞淋巴瘤组织中的应用

doi:10.3969/j.issn.1673-8640.2016.09.017

检验医学 ›› 2016, Vol. 31 ›› Issue (9): 810-813.DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2016.09.017

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BIOMED-2标准化免疫球蛋白基因重排技术在石蜡包埋弥漫大B细胞淋巴瘤组织中的应用

孙娟¹, 艾晓非¹, 李庆华¹, 曹增²

1.中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院病理中心,天津 300020
2. 天津医科大学附属肿瘤医院血液科天津市肿瘤防治重点实验室,天津 300060

收稿日期:2015-08-07 出版日期:2016-09-30 发布日期:2016-10-11
作者简介:null
作者简介：孙娟, 女, 1978年生, 学士, 主管技师,主要从事血液病理实验工作。

BIOMED-2 standardized immunoglobulin gene rearrangement detection in paraffin-embedded tissues for diffuse large B cell lymphoma

SUN Juan¹, AI Xiaofei¹, LI Qinghua¹, CAO Zeng²

1. Department of Pathology,the Institute of Hematology and Blood Diseases Hospital,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Tianjin 300020,China
2. Department of Hematology,Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital/Tianjin Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy,Tianjin 300060, China

Received:2015-08-07 Online:2016-09-30 Published:2016-10-11

摘要/Abstract

摘要：

目的探讨石蜡包埋组织标本应用BIOMED-2标准化免疫球蛋白（IG）基因重排技术检测弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的可行性。方法从45例石蜡包埋组织标本中提取DNA,采用BIOMED-2系统引物进行多重聚合酶链反应（PCR）扩增,并应用PCR片段分析法进行IG基因重排的克隆性分析。结果将DNA由原浓度100~500 ng/μL稀释至50~100 ng/μL后 ,DNA扩增最大片段（300~400 bp）含量由10.0%提高到90.0%;45例DLBCL石蜡切片标本提取DNA进行免疫球蛋白重链基因（IGH）和免疫球蛋白kappa基因（IGK）克隆性分析,IGH+IGK阳性率达到84.4%;15例反应性淋巴组织增生标本进行IG/T淋巴细胞抗原受体（TCR）克隆性分析,未见克隆性重排。结论稀释DNA是唯一可以既提高DNA扩增最大片段又能提高克隆性检出率的方法。在DLBCL的诊断和淋巴组织增生性疾病的鉴别诊断中,BIOMED-2标准化体系检测IGH基因克隆性重排是一种快速、可靠的方法,具有重要的临床应用价值。

关键词: 基因重排, 石蜡包埋组织, 弥漫大B细胞淋巴瘤

Abstract:

Objective To investigate the feasibility of detecting diffuse large B cell lymphoma（DLBCL） with the application of BIOMED-2 standardized immunoglobulin（IG） gene rearrangement detection in paraffin-embedded tissues. Methods DNA was extracted from 45 paraffin-embedded tissues. Multiple polymerase chain reaction（PCR） amplification was performed,and clonality analysis for IG gene rearrangement was performed by BIOMED-2 system primer. Results When DNA concentration was diluted to 50-100 ng/μL from 100-500 ng/μL,the proportion of the longest amplification fragment（300-400 bp） of DNA was improved from 10.0% to 90.0%. In 45 cases of DLBCL,the positive rate of immunoglobulin heavy chain（IGH）+ immunoglobulin kappa chain（IGK） was 84.4%. For IG/T-cell receptor（TCR） clonality analysis,no clonal rearrangement was found in 15 cases of reactive lymphoid tissue hyperplasia. Conclusions Dilution of DNA is a method to improve not only the proportion of the longest amplification fragment but also the detection rate of clonality. BIOMED-2 standardized immunoglobulin gene rearrangement detection is an efficient and reliable method for the diagnosis of DLBCL,with important clinical significance.

Key words: Gene rearrangement, Paraffin-embedded tissues, Diffuse large B cell lymphoma

中图分类号:

R446.1

孙娟, 艾晓非, 李庆华, 曹增. BIOMED-2标准化免疫球蛋白基因重排技术在石蜡包埋弥漫大B细胞淋巴瘤组织中的应用[J]. 检验医学, 2016, 31(9): 810-813.

SUN Juan, AI Xiaofei, LI Qinghua, CAO Zeng. BIOMED-2 standardized immunoglobulin gene rearrangement detection in paraffin-embedded tissues for diffuse large B cell lymphoma[J]. Laboratory Medicine, 2016, 31(9): 810-813.

图/表 2

参考文献 8

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PCR产物最大片段（bp）	DNA标本原浓度（30例）		原浓度DNA标本稀释到50~100 ng/μL（30例）
PCR产物最大片段（bp）	100~300 ng/μL	300~500 ng/μL	原浓度DNA标本稀释到50~100 ng/μL（30例）
100	6（20.0）	10（33.3）	0（0.0）
200	7（23.3）	4（13.3）	3（10.0）
300	2（6.7）^*	1（3.3）^*	26（86.7）^*
400	0（0.0）	0（0.0）	1（3.3）

PCR产物最大片段（bp）	DNA标本原浓度（30例）		原浓度DNA标本稀释到50~100 ng/μL（30例）
PCR产物最大片段（bp）	100~300 ng/μL	300~500 ng/μL	原浓度DNA标本稀释到50~100 ng/μL（30例）
100	6（20.0）	10（33.3）	0（0.0）
200	7（23.3）	4（13.3）	3（10.0）
300	2（6.7）^*	1（3.3）^*	26（86.7）^*
400	0（0.0）	0（0.0）	1（3.3）

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BIOMED-2标准化免疫球蛋白基因重排技术在石蜡包埋弥漫大B细胞淋巴瘤组织中的应用

BIOMED-2 standardized immunoglobulin gene rearrangement detection in paraffin-embedded tissues for diffuse large B cell lymphoma

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