检验医学 ›› 2007, Vol. 22 ›› Issue (03): 304-307.

• 生物化学检验论著 • 上一篇    下一篇

亲和层析法分离纯化人心肌肌钙蛋白Ⅰ

马宏伟%赵卫国%潘柏申   

  1. 复旦大学附属中山医院检验科,上海,200032%上海交通大学医学院医学检验重点实验室,上海,200023
  • 收稿日期:2007-03-01 出版日期:2007-03-01 发布日期:2007-03-01
  • 通讯作者: 马宏伟

Isolation and purification of human cardiac troponin Ⅰ using affinity chromatography

MA Hongwei%ZHAO Weiguo%PAN Baishen   

  • Received:2007-03-01 Online:2007-03-01 Published:2007-03-01

摘要: 目的 从人心肌组织提取纯化心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI).方法 采用离子交换层析和疏水层析从兔骨骼肌中提纯肌钙蛋白C(TnC),制备连接有TnC的亲和层析介质,通过亲和层析法从人心肌组织中直接提纯cTnI.纯化的cTnI采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法进行鉴定.结果 从10 g人心肌组织中共提纯2.44 mg cTnI,SDS-PAGE图上显示为单一条带,表观相对分子质量约为29 000.免疫印迹法结果表明cTnI单克隆抗体能够特异性识别提纯的cTnI,纯化的cTnI SDS-PAGE和免疫印迹法结果均与商品化cTnI结果一致.结论 具有免疫活性的天然cTnI的获取有助于急性心肌梗死诊断试剂盒的研制.

关键词: 心肌肌钙蛋白Ⅰ, 亲和层析, 纯化

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