人NKG2A、CD94的基因克隆和真核共表达载体的构建

检验医学 ›› 2007, Vol. 22 ›› Issue (02): 159-162.

人NKG2A、CD94的基因克隆和真核共表达载体的构建

焦玉莲%王来城%张捷%崔彬%马春燕%赵跃然

山东大学山东省立医院科研中心,山东,济南,250021

收稿日期:2007-02-01 出版日期:2007-02-01 发布日期:2007-02-01
通讯作者: 焦玉莲

Construction of a novel co-expression system: pNKG2A-IRES-CD94 vector

JIAO Yulian%WANG Laicheng%ZHANG Jie%CUI Bin%MA Chunyan%ZHAO Yueran

Received:2007-02-01 Online:2007-02-01 Published:2007-02-01

摘要/Abstract

摘要： 目的构建真核共表达载体pNKG2A-IRES-CD94.方法提取人外周血淋巴细胞总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增NKG2A、CD94基因,分别克隆pMD-NKG2A、pMD-CD94,对克隆基因进行DNA序列分析.pMD-CD94经XbaⅠ和Sal Ⅰ酶切,插入相应酶切的真核表达载体pIRES(多克隆位点B),NKG2A经XhoⅠ和Mlu Ⅰ酶切,插入相应酶切的pIRES-CD94(多克隆位点A).结果扩增的DNA片段和预期的人NKG2A和CD94大小一致;DNA序列分析显示,克隆的基因序列和GenBank数据库中人NKG2A和CD94基因序列一致.酶谱分析显示,NKG2A和CD94正向插入表达载体pIRES.结论成功构建了含人NKG2A和CD94的真核共表达质粒pNKG2A-IRES-CD94,为研究NKG2A和CD94基因的功能奠定了基础.

关键词: NKG2A, CD94, 共表达质粒, 内部核糖体进入位点

中图分类号:

Q503

焦玉莲;王来城;张捷;崔彬;马春燕;赵跃然. 人NKG2A、CD94的基因克隆和真核共表达载体的构建[J]. 检验医学, 2007, 22(02): 159-162.

JIAO Yulian;WANG Laicheng;ZHANG Jie;CUI Bin;MA Chunyan;ZHAO Yueran. Construction of a novel co-expression system: pNKG2A-IRES-CD94 vector[J]. , 2007, 22(02): 159-162.