引用本文
郝殿晋, 李亚卓, 孙鑫, 李洪臣, 张秀军. 不同细胞因子和蛋白与妊娠期高血压综合征相关性的临床研究. 检验医学, 2014, 29(8): 822-825[HAO Dianjin, LI Yazhuo, SUN Xin, LI Hongchen, ZHANG Xiujun. Clinical research on the correlationship of different cytokines and proteins with pregnancy induced hypertension syndrome. Labratory Medicine, 2014, 29(8): 822-825]  
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不同细胞因子和蛋白与妊娠期高血压综合征相关性的临床研究
郝殿晋1, 李亚卓1, 孙鑫2, 李洪臣1, 张秀军3
1. 秦皇岛市第一医院检验科, 河北 秦皇岛 066000
2. 中铁山桥集团医院检验科, 河北 山海关 066200
3. 河北联合大学生命科学学院, 河北 唐山063000

作者简介:郝殿晋,女,1973年生,硕士,副主任技师,主要从事临床生物化学及妊娠期高血压综合征疾病的临床研究。

摘要
目的

探讨血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素4(IL-4)、免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM,补体C3、补体C4、C反应蛋白(CRP)在不同程度妊娠高血压综合征(简称妊高征)中的变化规律及其临床应用价值。

方法

采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测114例妊高征患者(其中轻度子痫前期39例、重度子痫前期75例)和93例正常晚期妊娠妇女血清TNF-α、IL-12和IL-4水平,采用免疫比浊法检测IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4和CRP。

结果

妊高征组TNF-α、IL-12和CRP明显高于正常晚期妊娠组(P均<0.001),IL-4、IgG、IgM、补体C3和补体C4明显低于正常晚期妊娠组(P均<0.001)。重度子痫前期组TNF-α、IL-12和CRP明显高于轻度子痫前期组(P<0.05、P<0.001、P<0.001),IL-4、IgG、补体C3和补体C4明显低于轻度子痫前期组(P均<0.05)。妊高征组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组、正常晚期妊娠组血清CRP与IL-12、TNF-α呈正相关(P<0.05),血清TNF-α与补体C3、补体C4呈负相关(P<0.05)。

结论

妊高征患者血清TNF-α、IL-12、IL-4、IgG、IgM、补体C3、补体C4和CRP出现不同程度的异常。IL-12、IL-4、IgG、补体C3、补体C4和CRP可反映妊高征的严重程度,可作为判断病情的指标。

关键词: 肿瘤坏死因子α; 白细胞介素12; 白细胞介素4; 免疫球蛋白; 补体; C反应蛋白; 妊娠高血压综合征
中图分类号:R446.1 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2014)08-0822-04
Clinical research on the correlationship of different cytokines and proteins with pregnancy induced hypertension syndrome
HAO Dianjin1, LI Yazhuo1, SUN Xin2, LI Hongchen1, ZHANG Xiujun3
1. Department of Clinical Laboratory, the First Hospital of Qinhuangdao, Hebei Qinhuangdao 066000, China
2. Department of Clinical Laboratory, the Hospital of Chinese Railway Shanhaiguan Bridge Group Co., Ltd., Hebei Shanhaiguan 066200, China
3. College of Life Sciences, Hebei United University, Hebei Tangshan 063000, China
Abstract
Objective

To investigate the clinical significance of serum tumor necrosis factor-alpha(TNF-α), interleukin 12(IL-12), interleukin 4(IL-4), immunoglobulin (Ig)G, IgA, IgM, complement (C)3, C4 and C-reactive protein(CRP)in the diagnosis of pregnancy induced hypertension syndrome and the change regularity in different degrees of pregnancy induced hypertension syndrome.

Methods

The serum samples were collected from 114 patients with pregnancy induced hypertension syndrome and 93 healthy pregnant women. The levels of TNF-α, IL-12 and IL-4 were determined by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA), the levels of IgG, IgA, IgM, C3, C4 and CRP were determined by immunonephelometry.

Results

The levels of serum TNF-α, IL-12 and CRP in pregnancy induced hypertension sydrome group were higher significantly than those in healthy pregnant group (P<0.001). The levels of serum IL-4, IgG, IgM, C3 and C4 in pregnancy induced hypertension syndrome group were lower than those in healthy pregnant group (P<0.001). The levels of serum TNF-α, IL-12 and CRP in prophase of heavy degree eclampsia were higher significantly than in prophase of light degree eclampsia (P<0.05, 0.001 and 0.001), and the levels of serum IL-4, IgG, C3 and C4 were lower (P<0.05). There was a positive correlation of serum CRP with IL-12 and TNF-α among pregnancy induced hypertension syndrome, prophase of light degree eclampsia, prophase of heavy degree eclampsia and healthy pregnant groups (P<0.05). There was a negative correlation of serum TNF-α with C3 and C4 among pregnancy induced hepertension sydrome, prophase of light degree eclampsia, prophase of heavy degree eclampsia and healthy pregnant groups, respectively (P<0.05).

Conclusions

The levels of serum TNF-α, IL-12, IL-4, IgG, IgM, C3, C4 and CRP are different-degree abnormal in pregnancy induced hypertension syndrome group, and the levels of serum IL-12, IL-4, IgG, C3, C4 and CRP reflect the severity degree of pregnancy induced hypertension syndrome, and can be effective markers for judging patient's conditions.

Keyword: Tumor necrosis factor-alpha; Interleukin 12; Interleukin 4; Immunoglobulin; Complement; C-reactive protein; Pregnancy induced hypertension syndrome
引言

妊娠高血压综合征(简称妊高征)是妊娠期特有的疾病,发生于妊娠20周后,临床表现为高血压、蛋白尿、浮肿,严重时出现抽搐、昏迷,甚至母婴死亡。由于其病因尚不明确,至今仍是围产医学研究的重点。分析国内外有关妊高征免疫指标的研究,多为单独分析某一细胞因子的价值或胎盘中细胞因子的含量,而联合研究妊高征患者血清细胞因子和蛋白的变化的报道甚少。我们通过测定妊高征患者血清中单核细胞产生的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素12(interleukin 12,IL-12)和由淋巴细胞和NK细胞产生的白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)的表达情况,分析由Th1细胞介导的细胞免疫反应和由Th2 细胞介导的体液免疫反应在妊高征患者母体免疫系统中的功能;同时检测参与体液免疫反应的免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM,参与免疫防御系统的补体C3、C4和参与免疫调节的C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)等在妊高征中的表达。

材料和方法
一、研究对象

选取2011年5月至2012年12月秦皇岛市第一医院住院及门诊的妊高征患者114例,年龄2242岁,孕周32+40+周,平均(36.47±2.37)周。所有患者均按《妇产科学》(第7版)妊娠期高血压疾病诊断与分类标准[ 1]确诊,其中轻度子痫前期39例、重度子痫前期75例。随机选取同期在医院就诊的正常晚期妊娠妇女93例作为对照,年龄2140岁,孕周35+41+周,平均孕周(37.48±1.88)周。所有入选对象均为单胎,初产妇,既往均无心、肝、肾、糖尿病及高血压病史,排除感染性疾病、过敏性疾病及自身免疫疾病等合并症,近3个月内未用过激素类药物,两组间孕周和年龄比较差异无统计学意义( P>0.05)。

二、方法

1. 标本采集 所有受检者于治疗前禁食10~12 h,次日清晨抽取空腹静脉血,分离血清待测。

2. 仪器 美国Bio-Rad公司Coda型全自动酶标仪及美国Beckman-Coulter公司IMMAGE免疫分析测定仪。

3. 方法 采用双抗体夹心亲和素-生物素复合酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)测定TNF-α、IL-12、IL-4,试剂盒由奥地利COA公司提供,IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4、CRP采用散射比浊法测定。标准品由厂家提供。严格按试剂说明书进行操作。

三、统计学方法

采用SPSS 11.5软件进行统计分析,计量资料用 ±s表示,对结果进行正态性检验,两样本均数的比较方差齐时采用 t检验,方差不齐时作 t'检验。对各变量进行直线相关分析应用Pearson相关分析。 P<0. 05为差异有统计学意义。

结果
一、各组血清TNF-α、IL-12、IL-4水平比较

与正常晚期妊娠组比较,妊高征组TNF-α、IL-12水平明显升高,IL-4水平明显降低( P<0.001)。轻度子痫前期组TNF-α、IL-4水平与正常晚期妊娠组比较差异无统计学意义( P>0.05),而IL-12水平明显升高( P<0.05)。轻度子痫前期组TNF-α、IL-12、IL-4水平与重度子痫前期组比较差异均有统计学意义( P均<0.05)。见表1。

表1 妊高征组与正常晚期妊娠组血清TNF-α、IL-12、IL-4水平的变化( ±s,pg/mL)
二、各组血清IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4、CRP水平比较

妊高征组IgG、IgM、补体C3和补体C4水平低于正常晚期妊娠组( P<0.001),CRP水平高于正常晚期妊娠组( P<0.001);但IgA两组间水平差异无统计学意义( P>0.05)。轻度子痫前期组IgG、IgM、C3、C4、CRP水平与正常晚期妊娠组比较差异有统计学意义( P<0.05),但两组间IgA水平差异无统计学意义( P>0.05)。轻度子痫前期组IgG、C3、C4、CRP水平与重度子痫前期组比较差异有统计学意义( P<0.05),但两组间IgA、IgM水平差异无统计学意义( P>0.05)。见表2。

表2 各组血清IgG、IgA、IgM、C3、C4、CRP含量的变化( ±s)
三、CRP与IL-12、TNF-α的直线相关分析

妊高征组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组、正常晚期妊娠组血清CRP与IL-12、TNF-α呈正相关关系( P<0.05)。见表3。

表3 各组CRP与IL-12、TNF-α的相关性分析[ r值( P值)]
四、TNF-α与补体C3、C4的直线相关分析

妊高征组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组、正常晚期妊娠组血清TNF-α与补体C3、C4呈负相关( P<0.05)。见表4。

表4 各组TNF-α与补体C3、C4的相关性分析 [ r值( P值)]
讨论

TNF-α是一种重要的免疫调节细胞因子,能诱导血管内皮细胞产生其它炎症介质,是炎症细胞因子网络的启动因子。在正常妊娠时TNF-α维持在较低水平。适当的TNF-α可调节机体的免疫及代谢功能,而过量则导致病理改变。IL-12也是一种前炎症细胞因子,其诱导免疫平衡向Thl方向极化使细胞免疫反应增强。IL-4是典型的由Th2 细胞产生的细胞因子,在正常妊娠的维持中起重要作用[ 2]。

本研究结果显示妊高征孕妇血清TNF-α、IL-12水平明显高于正常晚期妊娠孕妇,IL-4水平明显低于正常晚期妊娠孕妇,且随着妊高征病情的加重,其变化程度越明显。有研究显示,TNF-α主要是通过损伤血管内皮细胞参与妊高征的发病[ 3]。1996年,Wang等[ 4]通过测定胎盘中 TNF-α水平,首先发现其明显高于正常孕妇。Serin等[ 5]采用前瞻性病例对照研究,认为当TNF-α>10.13 pg/mL时,孕妇发生妊高征的可能性比较大。本研究IL-4的结果与李春香等[ 6]的报道相似,与孙瑜等[ 7]的报道不同。造成研究结果不同的原因可能系各项研究的样本数不同,选取妊高征患者的病情程度轻重不一所致。

免疫球蛋白是一类具有抗体功能且多样性的蛋白质,是参与体液免疫反应的主要反应物质。补体系统是非特异性免疫中极为重要的组成部分之一。当受到激活,补体成分便按一定顺序呈现连续酶促反应,参与机体的防御功能和机体的自稳状态。CRP作为炎性反应的标志物,在急性创伤和感染时浓度升高。本研究显示妊高征患者体内循环IgG及IgM下降,IgG水平与病情的严重程度呈正相关,证实了妊高征患者血清IgG水平低有自身产生不足的原因。本研究结果与林其德等[ 8]的研究结果相同。Petrucco 等[ 9]认为妊高征患者肾小球中 IgM 型免疫复合物沉积的多少与疾病的严重程度呈正相关,患者血清 IgM 水平可作为一个估计病情和预后的实验室指标,但本研究结果不支持这一结论。本研究显示发现妊高征组补体C3、C4均明显低于正常晚期妊娠组,且在轻度子痫前期便已出现下降。张俊等[ 10]的研究结果也发现晚孕组补体C3、C4高于妊高征组。CRP参与妊高征致病机制主要为CRP和体内细胞毒性物质引起血管内皮细胞损伤,引发内皮细胞功能障碍[ 11]。有证据显示炎症细胞因子改变了内皮含氮氧化酶的表达[ 12],急性内皮一氧化氮产物阻塞引起反射性的血管收缩导致高血压。同时血管内皮细胞损伤导致内皮源性血管舒张因子减少,也可致血压升高。另一方面,慢性一氧化氮合成物的抑制,引起新内膜形成,导致肾脏受损,产生蛋白尿。本研究显示妊高征组CRP均明显高于正常晚期妊娠组,且随着妊高征病情严重程度的增加而增加。由此可以推测CRP水平与妊高征病情轻重程度有着密切的联系。Kilic-Okman等[ 13]的研究结果与本研究相同,妊高征患者 CRP水平显著高于正常妊娠孕妇,且与体重指数无相关性。

IL-12有促进TNF-α的作用。TNF-α可诱导内皮细胞黏附分子表达增加,激活中性粒细胞,释放颗粒,出现炎症反应,CRP随之增高。最终促使妊高征的发生,加重病情。本研究结果显示CRP与IL-12、TNF-α呈正相关。

补体活化的产物C3a可激活巨噬细胞、嗜中性粒细胞等,后者释放TNF-α等血管活性物质。妊高征与补体活化有十分密切的关系,补体产物的增加必然消耗补体。本研究结果显示妊高征各期TNF-α与补体C3、C4均呈负相关。Haeger 等[ 14]发现,在先兆子痫患者分娩时,血浆 C3a、C5a、SC5b-9水平升高的同时,伴随白细胞介素6(interleukin 6, IL-6)和TNF-α的升高以及嗜中性粒细胞、巨噬细胞活动增加。这些物质的增高均可导致血管内皮细胞受损,从而引起妊高征的一系列病理变化。本研究结果与Haeger等[ 15]的研究结果相近。

从妊高征的发病过程可以看出,免疫功能的改变可能与病变的发生及程度有关。TNF-α引起妊高征的主要原因是血管内皮损伤,全身小动脉痉挛,导致血压增高,肾血管痉挛又可以导致肾脏细胞间隙增大,蛋白漏出,出现蛋白尿,并伴有炎症反应,CRP随之增高。IL-12有促进TNF-α的作用。IL-4水平降低,使IL-4对妊娠的免疫保护被破坏。补体活化后激活凝血系统,使凝血功能发生改变。它们之间相互联系,并互相影响,共同作用于机体,使妊高征患者出现了高血压、蛋白尿、浮肿、凝血功能及肝脏功能异常等诸多的临床表现。妊高征患者血清IL-12、IL-4、IgG、C3、C4和CRP可反映妊高征的严重程度,可作为判断病情的指标。

The authors have declared that no competing interests exist.

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