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张伟红, 陈斌, 蔡梦珊, 李结秋, 陈英姿, 黄乐升. SYSMEX XE-5000血液分析仪血小板准确计数的相关分析. 检验医学,2014, 29(7): 741-744[ZHANG Weihong, CHEN Bin, CAI Mengshan, LI Jieqiu, CHEN Yingzi, HUANG Lesheng. Correlation analysis of SYSMEX XE-5000 hematology analyzer in counting platelet. Labratory Medicine, 2014, 29(7): 741-744]  
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SYSMEX XE-5000血液分析仪血小板准确计数的相关分析
张伟红, 陈斌, 蔡梦珊, 李结秋, 陈英姿, 黄乐升
广州医学院附属广州市第一人民医院检验科, 广东 广州 510180
摘要
目的

探讨红细胞碎片(FRC)、红细胞体积(MCV)、血小板参数[血小板分布宽度(PDW) 、大血小板比率(P-LCR)、血小板压积(PCT)]、幼稚血小板(IPF)对SYSMEX XE-5000血液分析仪(简称XE-5000)计数血小板(PLT)准确性的影响。

方法

选取采用XE-5000电阻抗法检测无FRC的标本200例,按 MCV(<60、60~<70、70~<80、≥80 fL)分为4组(A1组、B1组、C1组、D1组,每组各50例);选取MCV≥70 fL且FRC分别为0.1%~0.99%(A2组)、≥1.0%(B2组)的标本各40例;选取MCV≥70 fL且无FRC、PLT参数(PDW、PCT、P-LCR)显示“—”(表示检测不出结果)的标本50例(C2组),分别采用电阻抗法、光学法和手工法计数以上330例标本的PLT并推片镜检;分别采用电阻抗法、光学法和手工法连续5 d测定1例幼稚PLT增高患者的PLT并进行镜检。

结果

A1组、A2组、B1组、B2组、C2组电阻抗法和手工法计数PLT差异有统计学意义(P<0.05),C1组和D1组两种方法之间差异无统计学意义(P>0.05)。A1组、B1组、C1组、D1组、A2组、B2组、C2组光学法与手工法计数PLT差异均无统计学意义(P均>0.05)。电阻抗法测定幼稚PLT增高患者的PLT连续5 d均低于手工法和光学法;手工法计数PLT结果相对稳定,而电阻抗法、光学法结果随着幼稚PLT的不断成熟而增高,镜检有大量巨大PLT。

结论

采用XE-5000测定MCV<70 fL、含有FRC或PLT参数结果显示“—”的标本时应选择光学法通道进行PLT复查,并进行涂片镜检。IPF增高且镜检有较多巨大PLT的标本应进行手工计数。

关键词: 红细胞体积; 红细胞碎片; 血小板参数; 幼稚血小板; 血小板计数
中图分类号:R446.1 文献标志码:ADOI:10.3969/j.issn.1673-8640.2014.07.012 文章编号:1673-8640(2014)07-0741-04
Correlation analysis of SYSMEX XE-5000 hematology analyzer in counting platelet
ZHANG Weihong, CHEN Bin, CAI Mengshan, LI Jieqiu, CHEN Yingzi, HUANG Lesheng
Department of Clinical Laboratory, Guangzhou First People' s Hospital, Guangzhou Medical College, Guangdong Guangzhou 510180, China
Abstract
Objective

To investigate the accuracy of platelet (PLT) counting which was influenced by erythrocyte fragments (FRC), red blood cell volume (MCV), PLT parameters [platelet distribution width (PDW), platelet-larger cell ratio (P-LCR) and platelet hematocrit (PCT)] and immature platelets (IPF) by SYSMEX XE-5000 hematology analyzer (XE-5000).

Methods

The 200 samples with no FRC were analyzed by XE-5000, and were classified into 4 groups and each group of 50 cases: A1 group (MCV<60 fL), B1 group (60 fL≤MCV<70 fL), C1 group (70 fL≤MCV<80 fL) and D1 group (MCV ≥ 80 fL), respectively. The samples with FRC of different concentrations and MCV ≥70 fL were classified into 2 groups and each group of 40 cases: A2 group (0.1%≤FRC≤0.99%) and B2 group (FRC≥1.0%), respectively. The samples of 50 cases with no FRC, MCV≥70 fL and PLT parameters (PDW, PCT and P-LCR) showed "-" (C2 group) were chosen. PLT counting was performed in the 330 cases and determined for microscopy by electrical impedance analysis, optics and manual method. One case of naive patients with thrombocythemia was continuously observed for 5 d by electrical impedance analysis, optics and manual method.

Results

There were significant differences between electrical impedance analysis and manual method from A1, A2, B1, B2 and C2 groups (P<0.05). It showed no statistical significance between electrical impedance analysis and manual method from C1 and D1 groups (P>0.05). It showed no statistical significance between optics and manual method from A1, B1, C1, D1, A2, B2 and C2 groups (P>0.05). One case of naive patients with thrombocythemia was continuously observed for 5 d by the 3 methods, respectively. The results of electrical impedance analysis were less than those of optics and manual method. The results of manual method were relatively stable, and the results of electrical impedance analysis and optics increased with the mature of PLT. There existed giant PLT by microscopy.

Conclusions

When the samples of MCV <70 fL, FRC and PLT parameters shows "-" by XE-5000, and it should be measured by optics and smear microscopy. While the specimens with high IPF and many giant PLT under microscopy, they should be detected by manual method.

Keyword: Red blood cell volume; Erythrocyte fragment; Platelet parameter; Immature platelet; Platelet counting
引言

血小板(PLT)检测是研究凝血与止血功能的重要指标之一,也是手术前必要的检查项目,临床上很多疾病都能引起PLT变化。因此,PLT检测结果的可靠性至关重要。随着血液分析仪广泛应用,PLT准确计数越来越受到临床上关注[ 1]。现对PLT测定过程中影响检测结果的因素作一探讨。

材料和方法
一、标本来源

2013年5月至10月住院患者乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝静脉血;年龄在4~65岁,男150例,女180例。标本采集和检测均严格按照《全国临床检验操作规程》[ 2]执行。

二、仪器与试剂

日本SYSMEX公司XE-5000血液分析仪及原装配套试剂、质控品;由阳普医疗科技股份有限公司提供EDTA-K2抗凝管;瑞氏染液由贝索公司提供。手工法:采用双盲法严格按照《全国临床检验操作规程》PLT计数章节要求操作。

三、实验方法

1.在XE-5000血液分析仪电阻抗法测得样本中,选取无红细胞碎片(FRC)样本按红细胞体积(MCV)大小分4组各50例,A1组(MCV<60 fL)、B1组(60 fL≤MCV<70 fL)、C1组(70 fL≤MCV<80 fL)、D1组(MCV≥80 fL),分别用光学法和手工法检测PLT数,并推片镜检。

2.在XE-5000血液分析仪电阻抗法测得样本中,选取MCV≥70 fL且含有不同浓度FRC的标本分成2组,各40例。A2组(0.1≤FRC%≤0.99F)和B2组(FRC%≥1.0)分别用光学法和手工法检测PLT数,并推片镜检。

3.在XE-5000血液分析仪电阻抗法测定样本中,选取MCV≥70 fL且无FRC,PLT参数[血小板分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT)、大血小板比率(P-LCR)]显示“—”的50例标本,分别用光学法和手工法检测PLT数,并推片镜检。

4.连续5 d观察1例幼稚PLT增多患者,分别用电阻抗法、光学法和手工法测定当天PLT数,并推片镜检。

四、统计学方法

采用SPSS 16.0软件进行统计分析。结果以 ±s表示。以手工法为参考方法,分别与电阻抗法和光学法进行配对 t检验分析。 P<0.05为差异有统计学意义。

结果

不同MCV各组中,A1、B1组(MCV<70 fL)电阻抗法和手工法比较差异有统计学意义( P<0.05)。C1、D1组(MCV≥70 fL)电阻抗法和手工法比较差异无统计学意义( P>0.05)。光学法与手工法在4组不同MCV中差异均无统计学意义( P>0.05)。结果见表1:

表1 不同MCV范围3种方法PLT比较（ ±s,×109）

在MCV≥70 fL时,0.1≤FRC%≤0.99组和FRC%≥1.0组标本3种方法PLT计数比较结果见表2:

表2 含不同FRC%组3种方法PLT计数比较（ ±s,×109）

在MCV≥70 fL且无FRC时,PLT 3项参数(PDW、PCT、P-LCR)均显示“—”,结果测不出来。用3种方法检测PLT数见表3:

表3 PDW、PCT、P-LCR均显示“—”时3种方法PLT计数比较 ±s,×109）

对1例含幼稚巨大PLT(IPF%>30%)患者连续5 d用3种方法检测,与当天手工法PLT数作比较,血涂片观察到大量PLT体积接近红细胞大小。见图1、图2:

图1 幼稚PLT连续监测5 d PLT数变化

图2 镜下巨大PLT形态

讨论

血液分析仪检测PLT方法一般为电阻抗法或光学法两种,由于检测原理局限制性,常因诸多因素影响导致检测结果出现误差,特别是PLT检测结果与临床不符,是临床经常反映的问题。手工法计数PLT时因计数PLT数量比较少,故重复性差,但因其是直接计数,能区分各种干扰因素种类,所以可作为对照方法[ 3]。

本研究在不存在FRC标本中按MCV大小进行分组,结果表明当MCV<70 fL时,电阻抗法与手工法比较差异有统计学意义( P<0.05),与张霞[ 4] 报道相同。而光学法A1、B1、C1、D1 4组与手工法比较均差异无统计学意义( P>0.05),说明光学法计数PLT罕受MCV大小干扰。在FRC干扰组实验结果显示,FRC对电阻抗法存在较大影响,与手工法比较差异有统计学意义( P<0.05),而光学法与手工法比较差异无统计学意义( P>0.05),说明光学法具有一定抗FRC干扰能力。在50例PLT参数(PDW、PCT、P-LCR)显示“—”时,电阻抗法PLT计数与手工法比较差异有统计学意义( P<0.05),而光学法与手工法比较差异无统计学意义( P>0.05),其中经血涂片镜检,发现1例是PLT聚集,1例是含大量巨大PLT如图2所示。跟踪这例巨大PLT增多者,发现幼稚PLT参数(IPF)连续5 d均>25%,据罗耀凌等[ 5]报道IPF参考区间为1.0~7.5%,从图1可见IPF>25%且镜下有大量巨大PLT(体积>红细胞)标本,无论是电阻抗法或光学法,与手工法测得PLT数偏倚均比较大,在这种标本中光学法和电阻抗法都不能准确计数PLT,尤其是利用体积大小原理检测电阻法,而光学法因采用侧向散射光进行区分,体积<红细胞幼稚PLT能识别,但对体积>红细胞幼稚PLT却不能识别,将其计算在网织红细胞区域内,由于未能把全部幼稚PLT计数在内,导致测得PLT数偏低,与杨学敏等[ 6]报道有所不同。因此,对含有大量巨大PLT(大PLT直径4~6 μm,体积>20 fL PLT,巨型PLT直径常为7~20 μm,甚至可>20 μm[ 7])、幼稚PLT IPF>25%标本,要进行人工计数才能得出准确PLT数。

根据以上实验,在使用XE-5000血液分析仪进行PLT计数,特别是结果处于危急值PLT>600×109/L或PLT<50×109/L时,据红细胞体积、FRC、PLT参数进行综合分析,若是MCV偏小或存在FRC或PLT参数不显示结果时,应转用光学法通道或手工法进行鉴别,涂片镜检也是必要的,镜检可直接观察PLT分布和体积大小,也可观察到是否有小红细胞、红细胞碎片和PLT聚集对PLT计数干扰[ 8, 9]。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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