血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)是一个高度异质性蛋白,代表一个相对分子质量为12 000的家族。SAA作为机体主要的急性时相反应蛋白在疾病诊疗中发挥着重要作用。在炎症或感染急性期,SSA在48~72 h内即迅速升高,并于疾病恢复期迅速下降^{[ 1]}。SAA具有高度敏感性,对于一些疾病的早期诊断具有重要价值。我们对目前常用的两种SAA检测方法[胶乳增强免疫透射比浊法(简称透射比浊法)和免疫散射比浊法(简称散射比浊法)]进行了相关性比对,并检测了相关疾病患者的样本,探讨其临床价值。

1.对象 300例临床随机样本来自慈溪市坎墩医院检验科,其中男183 例,女117 例,年龄26~71岁,用于两种方法的相关性分析。疾病组为慈溪市坎墩医院临床确诊患者,共410例(其中冠心病164例、肺癌58例、早期糖尿病肾病76例、复发性强直性脊髓炎112例)。另选取慈溪市坎墩医院体检中心健康体检者100名作为正常对照组。

2.方法 SAA采用透射比浊法和散射比浊法分别检测。透射比浊法采用西门子BN prospec特定蛋白仪及配套试剂(德国西门子公司),严格按操作说明书进行。散射比浊法仪器为BECKMAN-COULTER AU2700全自动生化仪(美国Beckman-Coulter公司),试剂由宁波普瑞柏公司提供,按试剂参数设定后检测。SAA标准线性校正品购自日本荣研化学公司( Lot:29002) ,高浓度为105.6 mg/L,其他浓度为稀释所得。

3.统计学方法 采用SPSS 13.0软件进行统计分析。所有数据以x- ±s表示。两均数组间比较采用 t检验,样本率组间比较采用 χ² 检验,多组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),相关性分析采用Pearsons分析,检验水准为0.05。 P<0.05为差异有统计学意义。

300例随机临床样本SAA检测结果显示透射比浊法均值为20.98 mg/L,散射比浊法均值为21.38 mg/L,两种方法之间差异无统计学意义( P>0.05),相关系数( r)=0.998 8,具有良好的相关性。见表1。

表1

表1

表1 两种方法SAA检测结果的比较(x- ±s,mg/L) 组别 例数 散射比浊法 透射比浊法 SAA P值 SAA P值 性别 男 183 21.90±9.80 0.156 22.10±9.73 0.134 女 117 20.06±9.75 20.8±9.81 年龄(岁) <50 203 20.78±9.68 0.123 21.06±9.72 0.162 ≥50 97 21.67±10.1 22.41±9.92 合计 300 21.10±9.83 21.56±9.79

表1 两种方法SAA检测结果的比较(x- ±s,mg/L)

透射比浊法和散射比浊法标准线性检测结果分别为6.6、13.2、26.4、52.8、105.6和6.6、13.7、25.7、54.2、103.1 mg/L,相关方程为 Y=0 .998 X+0.465 7,有良好的线性相关,线性范围满足临床需要。

各疾病组SAA均明显高于正常对照组( P<0.05),但4种疾病组之间差异无统计学意义( P>0.05),其中肺癌组SAA均值最高(58.20 mg/L),复发性强直性脊髓炎组均值最低(46.20 mg/L)。两种方法之间差异无统计学意义( P>0.05)。

表2

表2

表2 正常对照组与各疾病组两种方法SAA检测结果比较 (x- ±s,mg/L) 组别 例数 透射比浊法 散射比浊法 P值 正常对照组 100 7.34±2.60 7.32±2.40 0.112 冠心病组 164 53.40±15.20 55.60±15.50 0.137 肺癌组 58 58.20±16.30 59.30±16.10 0.121 早期糖尿病 肾病组 76 51.30±14.70 50.70±14.50 0.131 复发性强直 性脊髓炎组 112 46.20±12.50 42.40±12.70 0.153

表2 正常对照组与各疾病组两种方法SAA检测结果比较 (x- ±s,mg/L)

SAA编码基因位于第11号染色体。目前已获得人类SAA完整的氨基酸序列,其mRNA和蛋白在脊椎动物中的表达均高度保守,表明SAA有重要的生物学机能^{[ 2]}。SAA主要由肝细胞产生,但肝外细胞有SAA的体质性表达。尽管SAA在炎症反应中的作用尚不清楚,但已知SAA家族在临床上具有多种重要功能,包括脂类的代谢和转运、酶类胞外基质降解的诱导、对炎症细胞的趋化作用等。 SAA参与了几种慢性炎症性疾病的病理过程,如淀粉样变性、动脉硬化、风湿性关节炎、血栓形成、A型淀粉样变性、肿瘤形成等^{[ 3]}。有报道称SAA和CRP浓度升高的变异性心绞痛患者预后不良^{[ 4]}。 有研究发现川崎病患者的SAA与CRP呈正相关,并且与病情活动相关,可以作为病情观察指标和治疗疗效的评价指标^{[ 5, 6]}。

SAA的测定目前国内大多以ELISA、免疫分析和特定蛋白仪测定为主,在全自动生化仪上检测SAA国内还少有报道。本研究结果显示散射比浊法SAA试剂采用日本荣研生化公司校正品,其检测结果与透射比浊法具有很好的相关性( r=0.997 7),线性范围为0~105.6 mg/L。两种方法之间差异无统计学意义( P>0.05)。散射比浊法测定SAA能在同一台生化仪上与其他项目一起组成套餐,避免使用多种仪器带来的不便。

本研究各疾病组两种检测方法的检测结果基本一致,差异无统计学意义( P>0.05)。各疾病组SAA均明显高于正常对照组( P<0.05)。疾病组中以肺癌组SAA最高(58.20 mg/L),复发性强直性脊髄炎组最低(46.20 mg/L),这可能与病例数有限有关。

SAA作为急性时相反应蛋白的一种,在众多急性炎性反应疾病诊断中比CRP更敏感,增高更迅速,可在炎症初发期升高至最初浓度的100~1 000倍^{[ 3, 7, 8]}。但SAA半衰期极短,只有50 min左右,这对疾病的早期诊断及预后观察有重要的临床意义。

本研究还发现,虽然各疾病组间SAA差异无统计学意义( P>0.05),但在个体中的浓度相差甚大,个别相差50 mg/L之多,这可能与每个患者的病情程度、分级、进程和发病时间的长短等相关。这也说明了SAA的检测对观察疾病的发生、发展和是否痊愈有一定意义。一般认为SAA浓度与疾病是否处于急性期及严重程度相关,与疾病的活动性关系最为密切,因此连续监测SAA对观察病程有一定的临床意义。

(收稿日期:2013-11-01)

(本文编辑:龚晓霖)