引用本文
牛冬梅, 洪骏, 吴嘉, 宋佳希, 于瑞杰, 袁云龙, 汪俊军. 儿童肾病综合征患者血清视黄醇结合蛋白4水平与氧化低密度脂蛋白的关系研究. 检验医学, 2014, 29(2): 122-124[NIU Dongmei, HONG Jun, WU Jia, SONG Jiaxi, YU Ruijie, YUAN Yunlong, WANG Junjun.. Research on relationship between the levels of serum retinol binding protein 4 and oxidized-low density lipoprotein in children with nephrotic syndrome. Labratory Medicine, 2014, 29(2): 122-124]  
Permissions
儿童肾病综合征患者血清视黄醇结合蛋白4水平与氧化低密度脂蛋白的关系研究
牛冬梅, 洪骏, 吴嘉, 宋佳希, 于瑞杰, 袁云龙, 汪俊军
南京军区南京总医院全军临床检验医学研究所,江苏 南京 210002
基金:国家自然科学基金资助项目(81271904);南京军区南京总医院院课题(2013025);
摘要
目的 探讨儿童肾病综合征(NS)患者血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平的变化及其与氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的关系。方法 分别检测118例NS患儿和45名健康体检儿童(正常对照组)血清RBP4水平,同时测定其血清ox-LDL、白蛋白(Alb)、血脂[包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及非高密度脂蛋白胆固醇(non HDL-C)]及肾功能指标[尿素(Urea)、肌酐(Cr)],并做统计学分析。结果 NS组血清RBP4水平为(55.88±27.36)mg/L,明显高于正常对照组[(30.61±8.68)mg/L](P<0.01),且血清RBP4与ox-LDL、TC、TG、LDL-C、non HDL-C及Urea呈明显正相关[相关系数(r)分别为0.30、0.35、0.25、0.29、0.32、0.26,P均＜0.01];进一步多元回归分析显示,NS组TC(β=0.62,P<0.01)、Urea(β=0.26,P<0.01)和ox-LDL(β=0.20,P<0.05)水平共同影响了48.4%的RBP4的变化,且RBP4也是NS患儿ox-LDL水平的决定因素之一。结论 NS患儿血清RBP4水平明显升高。升高的RBP4与ox-LDL的增加有一定的关联,可能促进了NS的发生、发展。
关键词: 视黄醇结合蛋白4; 氧化低密度脂蛋白; 脂质代谢; 儿童肾病综合征
Research on relationship between the levels of serum retinol binding protein 4 and oxidized-low density lipoprotein in children with nephrotic syndrome
NIU Dongmei, HONG Jun, WU Jia, SONG Jiaxi, YU Ruijie, YUAN Yunlong, WANG Junjun.
Institute of Laboratory Medicine Science of the People′s Liberation Army, Nanjing General Hospital of Nanjing Military Command, Jiangsu Nanjing 210002, China
Fund:
Abstract
Objective To investigate the relationship between the level change of serum retinol binding protein 4(RBP4) and oxidized-low density lipoprotein(ox-LDL) in children with nephrotic syndrome(NS).Methods The levels of serum RBP4 in 118 children with NS(NS group) and 45 healthy children(healthy control group) were determined respectively, the levels of ox-LDL, albumin (Alb), blood lipids [total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C), high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) and non HDL-C] andrenal function parameters [urea and creatinine (Cr)] were determined simultaneously,and the results were analyzed statistically.Results The levels of serum RBP4 in NS group [(55.88±27.36)mg/L] were significantly higher than those in healthy control group [(30.61±8.68) mg/L] (P<0.01). The levels of serum RBP4 were positively correlated with ox-LDL, TC, TG, LDL-C, non HDL-C and urea [correlation coefficient (r)=0.30, 0.35, 0.25, 0.29, 0.32 and 0.26,P<0.01].Multiple linear regression analysis found that the changes of TC(β=0.62,P<0.01),urea(β=0.26,P<0.01) and ox-LDL(β=0.20,P<0.05) influenced the 48.4％ of the change of RBP4. In addition, RBP4 was one of factors for the levels of ox-LDL in children with NS.Conclusions The levels of serum RBP4 in children with NS increase significantly, which are associated with the increase of ox-LDL, promoting the occurrence and development of NS.
Keyword: Retinol binding protein 4; Oxidized-low density lipoprotein; Lipid metabolism; Child nephrotic syndrome

视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4,RBP4)属于脂质运载蛋白超家族,主要由肝脏合成,可被肾小球滤过并在肾小管被重吸收和分解[ 1]。早期研究发现RBP4可灵敏地反映肾功能的早期损伤。一般认为当肾小球滤过功能下降时,血清RBP4水平可明显升高;当肾小管功能受损时,尿液RBP的排泄则会显著增加。近年研究[ 2]表明,血清RBP4与小而密低密度脂蛋白(small and dense of low density lipoprotein,sdLDL)明显独立相关,而sdLDL易于氧化,与血清高氧化低密度脂蛋白(oxidized-low density lipoprotein,ox-LDL)水平密切相关,血浆高sdLDL和ox-LDL水平是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发生的强危险因素。推测RBP4可能与ox-LDL相关联,参与了AS相关的脂质代谢过程,并已在冠心病和高脂血症患者中进行了证实[ 3, 4]。

肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)患儿常伴有明显的脂代谢异常,体内氧化、抗氧化活性失衡,脂蛋白被高度氧化。我们先前的研究已证实在NS患儿中ox-LDL水平明显升高,并与疾病的严重程度密切相关[ 5]。目前,国内、外关于NS患儿血清RBP4水平与脂质代谢的关系的研究较少,RBP4与ox-LDL之间的关系尚不明确。据此,我们拟探讨NS患儿血清RBP4与ox-LDL的相关性,为进一步阐述NS相关的血脂异常代谢机制提供依据。

材料和方法
一、研究对象

2012年1月至12月在南京军区南京总医院小儿科住院确诊的原发性NS患儿118例,男84例,女34例,年龄1～14岁;以健康体检儿童45名作为正常对照组,男32名,女13名,年龄1～14岁。2组之间性别、年龄差异均无统计学意义(P>0.05)。

二、方法

所有对象均禁食12 h以上,采集空腹血液样本,自然凝固,1 h内离心留取血清,－70 ℃保存。人血清RBP4水平采用免疫比浊法测定,试剂盒及配套校准品购自上海北加公司。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清ox-LDL水平[ 6],以兔抗人ox-LDL抗体为包被抗体、酶标记羊抗人载脂蛋白B100(apo B100)抗体为检测抗体。血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyeride,TG)、尿素(urea)、肌酐(crea,Cr)和白蛋白(albumin,Alb)试剂及配套校准品购自Randox公司。低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)试剂及脂蛋白校准品购自日本第一化学株式会社。仪器均为HITACHI 7600全自动生化分析仪(日本日立公司);非高密度脂蛋白胆固醇(non high density lipoprotein-cholesterol,non HDL-C)采用以下公式计算:non HDL-C＝TC－HDL-C。

三、统计学方法

采用SPSS 16.0软件进行统计学分析。正态分布数据以±s表示,偏态分布数据以中位数(P25～P75)表示。2组间比较用成组设计的t检验,偏态分布数据经log转换使其符合正态分布后再进行比较;变量间相关性用Sperman相关检验;多因素分析采用多元线性回归处理。P<0.05为差异有统计学意义。

结 果
一、NS组和正常对照组各项目测定结果比较

NS组血清RBP4、ox-LDL、TC、TG、HDL-C、LDL-C和Urea水平明显高于正常对照组(P<0.05),Alb水平则明显低于正常对照组(P<0.05),见表1:

表1 NS组和正常对照组各项目测定结果比较

注:与正常对照组比较,*P<0.05、**P<0.01

二、NS患儿血清RBP4与血脂各指标间的相关性

血清RBP4与ox-LDL、TC、TG、LDL-C、non HDL-C及Urea均呈正相关,见表2。分别以RBP4、ox-LDL为自变量,以与有相关性的其他指标为应变量进行多元线性回归分析。分析结果显示,NS组血清TC(β=0.617,P<0.01)、Urea(β=0.259,P<0.01)和ox-LDL(β=0.199,P<0.05)共同影响了48.4%的RBP4的变化;而血清non HDL-C(β=0.558,P<0.01)、RBP4(β=0.167,P<0.05)和TG(β=0.174,P<0.05)则共同决定了61.4%的ox-LDL变化。

表2 NS患儿血清RBP、ox-LDL与其他指标的相关性

讨 论

NS是儿童常见的一种肾小球疾病,高脂血症为其主要临床特征之一。高脂血症与进行性肾脏损伤、AS的发生有密切的联系。NS患儿肾小球毛细血管壁通透性损伤使体内氧自由基增加,脂质和脂蛋白在过氧化反应过程中释放大量的活性氧,进一步损伤肾上皮细胞结构的完整性和肾小球的通透性。另外,高浓度的ox-LDL也具有一定的细胞毒性,可直接损害肾小球动脉的内皮细胞及平滑肌细胞。总之,肾脏病变导致脂代谢障碍,脂质代谢异常与肾小球硬化的发生密切相关,是NS病情加重、复发及迁延的重要因素[ 7, 8]。本研究结果显示NS患儿血清ox-LDL水平明显升高,与Urea呈明显正相关,且与Alb呈明显负相关,这与文献[ 5]报道一致。

儿童NS的病理改变主要为肾小球损伤。因此,本研究发现NS患儿血清RBP4水平明显升高。多项研究还证实RBP4与公认的致AS的脂蛋白类及脂代谢中的酶类存在独立相关性[ 9, 10, 11, 12],提示RBP4可能参与脂质代谢。RBP4参与脂代谢的机制尚未阐明。由于RBP4是循环中视黄醇的唯一转运体,而视黄醇是形成维甲酸X受体(retinoid X receptor,RXR)的前体。推测RBP4调节脂代谢的可能机制之一是:RBP4可通过RXR,上调载脂蛋白CⅢ(apo CⅢ)表达,apo CⅢ可进一步抑制脂蛋白脂肪酶活性,促进极低密度脂蛋白(VLDL)水平的升高,升高的VLDL促进易于氧化的sdLDL的形成[ 12]。本研究显示NS患儿血清RBP4水平与ox-LDL、LDL、nonHDL-C、TG、TC、Urea均呈明显正相关,证实NS患儿的发生、发展过程中伴随着血清RBP4水平的改变。进一步多因素分析显示,血清TC、Urea和ox-LDL水平共同影响了48.4%的RBP4的变化,且血清TG、RBP4、nonHDL-C水平共同决定了61.4%的ox-LDL变化。进一步证实NS患儿的肾脏病变过程伴随着血清RBP4水平的改变,升高的RBP4与ox-LDL的增加有一定的关联。

总之,RBP4可能通过调节脂质代谢,参与了NS的发生、发展。连续监测NS患儿的血清RBP4水平有助于治疗效果的评估以及预后的判断。

参考文献
[1] Yang Q, Graham TE, Mody N, et al. Serum retinol binding protein 4 contributes to insulin resistance in obesity and type 2 diabetes[J]. Nature, 2005, 436（7049）: 356-362. [本文引用:1] [JCR: 38.597]
[2] Usui S, Ichimura M, Ikeda S, et al. Association between serum retinol-binding protein 4 and small dense low-density lipoprotein cholesterol levels in young adult women[J]. Clin Chim Acta, 2009, 399（1-2）: 45-48. [本文引用:1] [JCR: 2.85]
[3] 李翰卿, 牛冬梅, 汪俊军, 等. 冠心病患者血浆视黄醇结合蛋白与氧化低密度脂蛋白水平相关性分析[J]. 临床检验杂志, 2012, 30（3）: 196-198. [本文引用:1]
[4] Wu J, Shi YH, Niu DM, et al. Association among retinol-binding protein 4, small dense LDL cholesterol and oxidized LDL levels in dyslipidemia subjects[J]. Clin Biochem, 2012, 45（9）: 619-622. [本文引用:1] [JCR: 2.45]
[5] 汪俊军, 韩爱忠, 刘小传, 等. 儿童肾病综合征患者血浆氧化低密度脂蛋白及其免疫复合物水平[J]. 检验医学, 2010, 25（5）: 352-355. [本文引用:2]
[6] 王 成, 杨翠华, 张春妮, 等. SLE患者血清氧化LDL水平检测分析[J]. 临床检验杂志, 2010, 28（2）: 116-118. [本文引用:1]
[7] Delvin EE, Merouani A, Levy E. Dyslipidemia in pediatric nephrotic syndrome: causes revisited[J]. Clin Biochem, 2003, 36（2）: 95-101. [本文引用:1] [JCR: 2.45]
[8] El-Melegy NT, Mohamed NA, Sayed MM, et al. Oxidative modification of low-density lipoprotein in relation to dyslipidemia and oxidant status in children with steroid sensitive nephritic syndrome[J]. Pediatr Res, 2008, 63（4）: 404-409. [本文引用:1] [JCR: 2.673]
[9] Von Eynatten M, Lepper PM, Liu D, et al. Retinol-binding protein 4 is associated with components of the metabolic syndrome, but not with insulin resistance, in men with type 2 diabetes or coronary artery disease[J]. Diabetologia, 2007, 50（9）: 1930-1937. [本文引用:1] [JCR: 6.487]
[10] Ingelsson E, Lind L. Circulating retinol-binding protein 4 and subclinical cardiovascular disease in the elderly[J]. Diabetes Care, 2009, 32（4）: 733-735. [本文引用:1] [JCR: 7.735]
[11] Lee JW, Im JA, Lee HR, et al. Visceral adiposity is associated with serum retinol binding protein-4 levels in healthy women[J]. Obesity（Silver Spring）, 2007, 15（9）: 2225-2232. [本文引用:1]
[12] Lin CC, Lai MM, Li TC, et al. Relationship between serum retinol-binding protein 4 and visfatin and the metabolic syndrome[J]. Diabetes Res Clin Pract, 2009, 85（1）: 24-29. [本文引用:2] [JCR: 2.741]