引用本文
吴利, 周才, 黄瑞玉, 刘艳. 正常孕妇血浆D-二聚体的检测与分析. 2014, 29(10): 992-994[WU Li, ZHOU Cai, HUANG Ruiyu, LIU YAN.. Detection and analysis of plasma D-dimer in healthy pregnant women. Labratory Medicine, 2014, 29(10): 992-994]  
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正常孕妇血浆D-二聚体的检测与分析
吴利, 周才, 黄瑞玉, 刘艳
广东省妇幼保健院检验科,广东 广州510080

作者简介:吴 利,女,1977年生,硕士,主管技师,主要从事临床检验工作。

通讯作者:周 才,联系电话:020-61118552。

摘要

目的

探讨正常孕妇血浆D-二聚体的变化特点,建立本实验室正常孕妇血浆D-二聚体的参考区间。

方法

选取正常孕妇664例、非孕正常女性对照者100名(正常对照组),产后发生弥散性血管内凝血(DIC)或静脉血栓患者18例。将正常孕产妇按孕周分为5组:(1)孕<20周(127例);(2)孕20~32周(86例);(3) 孕32周至临产≥32周(191例);(4)产后第1天(130例);(5)产后第2天(130例)。采用SYSMEX CA7000全自动凝血仪检测所有正常孕妇及正常对照组血浆D-二聚体浓度,确定相应的参考区间。孕妇D-二聚体浓度呈偏态分布,采用百分位数(P95)表示参考区间的单侧上限。采用建立的参考区间评估18例产后发生DIC或静脉血栓孕产妇的D-二聚体水平,验证该参考区间的有效性。

结果

D-二聚体随着妊娠期的延长逐渐升高,从20周开始至32周逐渐上升,32周以后升高幅度最大,孕<20周组、孕20~32周组及孕≥32周组D-二聚体参考区间分别为<1.54 mg/L、<3.46 mg/L及<4.96 mg/L ;分娩过程中D-二聚体发生了大幅度的变化,产后第l天急剧升高,至产后第2天明显下降,基本恢复至妊娠末期水平。产后第1天及产后第2天参考区间分别为<11.76 mg/L、<5.87 mg/L。5组间D-二聚体水平差异有统计学意义(P<0.001)。正常对照组和孕妇组D-二聚体浓度低于排除DVT临界值(0.5 mg/L)的比例分别为92.3%、55.1%、7.0%、1.0%、0.2%和0.7%。采用上述参考区间评估18例产后发生DIC或静脉血栓孕产妇的D-二聚体水平,均为阳性结果。

结论

初步建立本实验室正常孕妇血浆D-二聚体参考区间,妊娠中后期D-二聚体已不具备特异性,不能作为排除诊断依据。

关键词: D-二聚体; 孕妇; 参考区间
中图分类号:R446.11 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2014)10-0992-03
Detection and analysis of plasma D-dimer in healthy pregnant women
WU Li, ZHOU Cai, HUANG Ruiyu, LIU YAN.
Department of Clinical Laboratory, Guangdong Women and Children Hospital, Guangdong Guangzhou 510080, China
Abstract

Objective

To investigate the change characteristics of plasma D-dimer in healthy pregnant women and establish the reference range.

Methods

A total of 664 healthy pregnant women and 100 healthy women without pregnancy as control group were enrolled, and there were 18 cases of disseminated intravascular coagulation (DIC) or venous thrombosis after delivery. They were classified into 5 groups, pregnancy <20 weeks (127 cases), pregnancy 20-32 weeks (86 cases), pregnancy ≥32 weeks (191 cases), the first postpartum day (130 cases) and the second postpartum day (130 cases). D-dimer concentration was determined by SYSMEX CA7000 automatic coagulation analyzer in order to identify the reference range. Since D-dimer concentration showed non-normal distribution, the normal values were established by percentile (P95). The results of the 18 cases of DIC or venous thrombosis were used to validate the established normal values.

Results

D-dimer concentration increased continually with pregnancy from 20 weeks to 32 weeks, especially after 32 weeks. The reference ranges were <1.54 mg/L, <3.46 mg/L and <4.96 mg/L for pregnancy <20 weeks, 20-32 weeks and ≥32 weeks. D-dimer had a significant change during childbirth, and there was a sharp increasing in the first postpartum day and a significant decline in the second postpartum day recovering to the levels of late pregnancy, which the reference ranges were <11.76 mg/L and <5.87 mg/L, respectively.All groups had statistical significance for D-dimer concentration (P<0.001). The percentages of D-dimer which were lower than conventional critical value to exclude DVT (0.5 mg/L)were 92.3%, 55.1%, 7.0%, 1.0%, 0.2% and 0.7% in control group and 5 groups in pregnancy, respectively. All the 18 cases of DIC or venous thrombosis showed positive results by the above normal values.

Conclusions

By analyzing the change characteristics of D-dimer in healthy pregnant women, D-dimer reference ranges in healthy pregnant women are established. The D-dimer in middle and late pregnancy is not specific, which can not be as exclusion parameter.

Keyword: D-dimer; Pregnant woman; Reference range

D-二聚体的检测方法很多,根据被检测物质的性质不同、抗原-抗体复合物相结合的物质性质不同,常用的有乳胶凝集法、酶联免疫吸附试验、荧光抗体检测法、免疫金标法[ 1]。由于D-二聚体片段的异源性,检测试剂所用单克隆抗体的多样性,不同检测体系所得结果间差异明显,可比性较低。目前市面上所用试剂盒中提供的参考区间来源于欧美人群,在未经验证前不能直接用于我国的临床检测。我们的目的为确定本实验室的D-二聚体生物参考区间。

材料和方法
一、研究对象

收集2013年1月至6月在广东省妇幼保健院就诊的正常孕妇664例及非孕正常女性对照者100名,纳入和排除标准如下:年龄18~41岁,排除高血压、糖尿病、血栓栓塞史、凝血功能异常、心脑血管疾病、肝肺肾胰疾病史、自身免疫性疾病、甲状腺功能减退、恶性肿瘤等病患。选取同期在广东省妇幼保健院就诊的产后发生急性弥散性血管内凝血(DIC)患者15例 (病因分别为死胎l例、羊水栓塞2例、胎盘早剥12例),产后静脉血栓患者3例作为疾病组。

二、仪器与试剂

SYSMEX CA7000全自动凝血仪;Innovance D-Dimer配套试剂。

三、检测方法

应用一次性真空采血管采取清晨空腹静脉血,用109 mmol/L枸橼酸钠按1∶9比例进行抗凝,以3 000× g常温离心10 min,取血浆置-20 ℃冰箱保存待测,免疫比浊增强法定量测定。每次检测前先做D-二聚体质控物高低浓度2个水平, 检测在控后对标本进行检测, 确保检测数据的精度和正确可靠。

四、统计学方法

采用SPSS 17.0软件进行统计分析,采用Kolmogorov-Smimov检验对数据进行正态性检验,血浆D-二聚体在正常孕妇呈偏态分布,采用单指标百分数法计算参考区间[ 2]。不同组间D-二聚体结果采用 t检验。 P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、不同组别血浆D-二聚体水平变化趋势及分组依据

Spearman相关分析显示孕周与D-二聚体的 rs=0.704,见图1。随着孕周的增加,孕妇血浆D-二聚体逐渐上升,从20周开始至32周逐渐升高,32周以后升高幅度最大,故将孕妇分为孕20周前(<20周)、孕20~32周、孕32周后至临产(>32周)3组。分娩过程中D-二聚体发生大幅度的变化,故增加产后第1天、产后第2天2组。临床应用中,D-二聚体结果低于参考区间下限无意义,故仅计算D-二聚体95%参考区间的单侧上限值,见表1。不同组间D-二聚体结果差异均有统计学意义( P<0.001)。

图1 孕妇血浆D-二聚体水平与孕周的相关性分析

表1 正常孕妇血浆D-二聚体95%参考区间 ( mg/L)
二 疾病组D-二聚体检测结果

15例DIC患者中有13例D-二聚体检测结果>20.00 mg/L,高于相应的参考区间,最高1例达200.80 mg/L,其余2例结果为15.00 mg/L和17.55 mg/L,高于本研究的参考区间。3例静脉血栓患者均发生于剖宫产后第l周内,经造影确认血栓形成,患者每次D-二聚体检测结果都高于本实验室的参考区间,全部为阳性结果。所以,以本实验室的参考区间进行判断,18例患者D-二聚体结果均为阳性,无漏诊病例出现。

讨 论

D-二聚体是交联纤维蛋白在纤维蛋白溶解酶作用下产生的特异性降解产物,是继发性纤维蛋白溶解的特异性检测指标[ 4],也可作为体内血栓形成的无创性检测指标[ 5]。由于排除孕妇VTE所需的cut-off值尚未建立特异度和敏感性,因此,D-二聚体的诊断价值非常有限,主要是静脉血栓的排除诊断指标,其血浆水平增高可反映继发性纤溶活性增强。孕妇D-二聚体的检测有助于早期诊断静脉血栓形成和妊娠并发症,并能监测抗凝治疗。妊娠过程中,随着孕龄的增加,体内凝血成分和纤维蛋白溶解活性出现明显改变,表现为凝血功能增强、抗凝及纤溶功能减弱,出现所谓妊娠期高凝状态,静脉血栓的风险明显升高[ 6]。其生理意义在于,可促进产后快速有效止血和子宫内膜再生与修复,但可诱发DIC、静脉血栓栓塞等疾病,并可能与多种产科并发症(如妊娠期高血压疾病、产后大出血、妊娠合并心脏病等)有关[ 7]。有学者认为妊娠期凝血活性增高,纤溶、抗凝活性降低,这与子痫前期发生密切相关[ 8]。妊娠期血浆D-二聚体呈现进行性增高,表明孕妇静脉血栓发生率为0.76‰~1.72‰,约为非孕妇的4倍,产褥期更高,约为妊娠期的20~80倍,分娩后第一周内最高,达到100倍左右[ 9, 10]。刘小华等[ 11]指出孕晚期D-二聚体的测定对产后出血有预测价值( OR=2.09,95% CI:1.78~2.30),血浆中D-二聚体含量越高,发生产后出血的机率越高。

本研究的参考区间和一些文献所报道的并不完全一致,如李帅等[ 3]报道的参考区间:年龄≥30岁孕周≤13周、14~20周、21~27周、28~34周、≥35周、剖宫产后第l天、剖宫产后第2天的孕产妇组及健康对照组血浆D-二聚体水平分别为0.28(0.14~0.38)、0.50(0.36~0.65)、0.83(0.59~1.41)、0.93(0.68~1.37)、1.47(1.22~1.84)、17(0.12~0.25)、2.27(1.66~3.17)、1.62(1.26~2.69)mg/L。这些差异可能与不同地域、不同分组、不同测定方法有关。本研究针对的是广州地区汉族孕产妇,应用的是免疫比浊法。在D-二聚体测定的各种方法中,免疫比浊法[ 3]不仅分析速度快、抗干扰能力好,而且很多大、中型医院所配备的血凝仪都可以应用该方法进行D-二聚体测定。所以制定该方法的D-二聚体参考区间在临床上具有很强的可操作性。Kovac等[ 12]的研究表明随着孕期变化妊娠期妇女其D-二聚体参考值不同。本研究所用试剂盒提供的D-二聚体疾病界定值为0.5 mg/L,但正常对照组和实验组D-二聚体浓度低于该临界值的比例分别为92.3%、55.1%、7.0%、1.0%、0.2%和0.7%。这一界值的确定对于正常人群有较大的参考意义,但对于围生期孕妇的应用存在一定的局限性[ 13]。本研究依据正常孕妇血浆D-二聚体的变化特点确定适合本实验室的D-二聚体生物参考区间是实验室标准化的重要步骤,亦是满足临床科室疾病诊断的迫切要求。

The authors have declared that no competing interests exist.

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