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陈健. TOSOH HLC-723 G8全自动糖化血红蛋白分析仪性能评价. 2013, 28(10): 925-927[CHEN Jian. Performance evaluation of TOSOH HLC-723 G8 automatic glycohemoglobin analyzer. 上海检验医学, 2013, 28(10): 925-927]  
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TOSOH HLC-723 G8全自动糖化血红蛋白分析仪性能评价
陈健
复旦大学附属华山医院检验科,上海 200040

陈健,男,1973年生,技师,主要从事临床检验工作。

摘要
目的

对以离子交换高效液相色谱法(HPLC)为原理的TOSOH HLC-723 G8全自动糖化血红蛋白分析仪(简称HLC-723 G8)检测全血糖化血红蛋白(HbA1c)的性能进行评价。

方法

对HLC-723 G8测定HbA1c的精密度、相关性、线性、携带污染进行评价,并检测54例健康体检者的HbA1c进行参考区间验证。

结果

HLC-723 G8测定HbA1c低、高水平批内变异系数(CV)分别为0.00%、0.47%,批间CV分别为0.76%、0.31%;HLC-723 G8与HLC-723 G7全自动糖化血红蛋白分析仪测定HbA1c的结果呈明显相关(r2=0.999,P<0.001),预期偏倚为0.06,相对偏倚值为0.83%,偏差符合率为100%;在5%~12%范围内线性良好(r2=0.999 6,P<0.001);高值标本对低值标本的结果无明显携带污染(携带污染率为1.12%);54名健康人群的HbA1c测定结果为4.7%~6.3%,在厂家提供的参考区间内。

结论

HLC-723 G8测定HbA1c的性能良好,可在临床使用。

关键词: 高效液相色谱法; 糖化血红蛋白; 性能评价
中图分类号:R446 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2013)10-925-03
Performance evaluation of TOSOH HLC-723 G8 automatic glycohemoglobin analyzer
CHEN Jian
Department of Clinical Laboratory,Huashan Hospital,Fudan University,Shanghai 200040,China
Abstract
Objective

To evaluate the performance of TOSOH HLC-723 G8 automatic glycohemoglobin analyzer (HLC-723 G8) for the determination of glycosylated hemoglobin A1c (HbA1c) with the principle of ion-exchange high-performance liquid chromatography (HPLC).

Methods

The precision,correlation,linearity and carryover of HLC-723 G8 were evaluated. The reference interval of HbA1c was verified among 54 healthy subjects.

Results

The within-run and between-run coefficients of variation (CV) of both low and high levels of HbA1c were 0.00%,0.47% and 0.76%, 0.31%, respectively. HLC-723 G8 and HLC-723 G7 for the determination of HbA1c showed good correlation (r2=0.999,P<0.001). The expected bias was 0.06,the relative bias was 0.83%,and the bias coincidence was 100%. An excellent linearity was found for HbA1c in the range of 5%-12% (r2=0.999 6,P<0.001).There was no obvious carryover in both low and high level samples, and the carryover rate was 1.12%. The levels of HbA1c among the 54 healthy subjects were 4.7%-6.3% in the range provided by manufacturers.

Conclusions

HLC-723 G8 has a good performance, and can be used in clinical application.

Keyword: High-performance liquid chromatography; Glycosylated hemoglobin A1c; Performance evaluation
引言

糖化血红蛋白(HbA1c)是人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物。HbA1c测定通常可以反映患者近8~12周的血糖控制情况。HbA1c作为糖尿病筛查、诊断、血糖控制和疗效评价的有效指标,在临床上已被广泛使用,是检测糖尿病的主要标准之一[ 1]。美国临床化学协会(AACC)糖化血红蛋白标准化分会和国际临床化学学会(IFCC)HbA1c标准化工作组建议高效液相色谱法(HPLC)是准确检测HbA1c的常用方法之一。根据美国病理学家协会(CAP)、ISO15189等实验室质量保证体系要求,本研究对以离子交换HPLC为原理的TOSOH HLC-723 G8全自动糖化血红蛋白分析仪(简称HLC-723 G8)进行了性能评价,并与TOSOH HLC-723 G7全自动糖化血红蛋白分析仪(简称HLC-723 G7)进行了比较。

材料和方法
一、标本来源

参考区间验证所用标本来自复旦大学附属华山医院健康志愿者,通过筛查得到54名正常体检者,其中男21名,女33名,年龄22~66岁。相关性试验所用标本共40例,来自测试当天复旦大学附属华山医院门急诊及住院患者中需要进行HbA1c 检测的EDTA抗凝全血标本。HbA1c高值抗凝全血标本均来自复旦大学附属华山医院确诊的糖尿病患者。

二、仪器及试剂

日本TOSOH公司HLC-723 G7、HLC-723 G8及其配套的试剂(试剂批号E8-108T、E8-204T、8-301T、HW-20T)、校准品(ZS2001)和质控品(L1:33841;L2:33842)。

三、方法

1. 精密度试验

取新鲜抗凝全血标本,含HbA1c低、高值,同批次检测各20次,计算均值( )、标准差( s)和变异系数( CV),评估批内精密度;采用HbA1c低、高值质控品,每天测定1次,连续测定20 d,计算 、 s和 CV,评估批间精密度。批内 CV的可接受范围为≤1 .75 %;批间 CV的可接受范围为≤2.33%。

2. 相关性试验

取新鲜抗凝全血标本40例,分别在HLC-723 G7和HLC-723 G8上检测HbA1c,将HLC-723 G8的检测结果与HLC-723 G7比较。以HLC-723 G8的检测结果( Y)对HLC-723 G7的检测结果( X)的直线回归 Y=bX+a, b的可接受范围是为0.95~1.05,相关系数( r2)>0.95,偏差符合率≥90%(允许偏差±3.5%)。

3. 线性试验

采用CAP线性验证品(2013LN15-A,25620796;从低值至高值共6个验证品),各检测2次,对检测结果的和预期值进行直线回归统计,进行线性验证。线性品准确度允许偏差±7%或±0.5。

4. 携带污染率

选取线性范围内的高值(H)标本和低值(L)标本各1份,先用HLC-723 G8连续测定3次高值标本,结果分别为H1、H2、H3,然后连续测定3次低值标本,结果分别为L1、L2、L3。携带污染率(%)= ×100%。携带污染率要求≤3%[ 2]。

5. 参考区间验证

选取54名正常体检者血压、心率生理指标,肝功能、血糖、血脂、血常规等实验室检查均正常;心电图、胸透、B超无阳性发现,排除糖尿病、肝、肾、心血管疾病病史;排除用药者(包括中药、维生素)及服用保健品者;排除6个月内手术史、4个月内输血/献血史;排除妊娠人群。在HLC-723 G8上测定其HbA1c,检测值在引用参考区间个体数与总参考个体数之比(R)应>90%,引用的参考区间为4.0%~6.0%。

四、统计学方法

采用SPSS 13.0统计软件对检测结果进行统计分析及线性回归分析。

结果

一、精密度试验

高、低值全血标本和质控品在HLC-723 G8上检测精密度结果见表1:

表1 HLC-723 G8精密度试验结果

批内、批间不精密度均在可接受范围内。

二、相关性试验结果

HLC-723 G8与HLC-723 G7测定HbA1c的结果呈明显相关。HLC-723 G8( Y)对HLC-723 G7( X)的直线回归方程为 Y=0 .997 X+0 .078, r2 =0 .999, P<0.001,见图1:

图1 HLC-723 G8与HLC-723 G7测定HbA1c结果的相关性分析

预期偏倚为0.06,相对偏倚值为0.83%,偏差符合率为100%。HLC-723 G8与HLC-723 G7的对比试验达到可接受范围。

三、线性试验

对线性验证品检测结果的均值( Y)和预期值( X)进行直线回归统计,方程为 Y=0 .959 9 X+0 .169 5, r2 =0 .999 6, P<0.001。HLC-723 G8测定HbA1c在5%~12%范围内线性良好。见图2:

图2 HLC-723 G8测定线性验证品的线性结果

四、携带污染率

携带污染率(%)= ×100%= ×100%=1.12%,满足要求≤3%,说明HLC-723 G8测定HbA1c高值标本对低值标本的结果无明显携带污染。

五、参考区间验证

54名健康人群的HbA1c测定结果为4.7%~6.3%,检测值在引用参考区间个体数与总参考个体数之比(R)=98.1%,在厂家提供的参考区间之内,可以引用厂家提供的参考区间。

讨论

HLC-723 G8采用离子交换HPLC原理对血液总血红蛋白中的HbA1c进行分析,性能稳定,不易受到各种共存干扰物的影响,精密度较好。此方法曾应用于美国糖尿病控制与并发症研究(DCCT),是目前检测HbA1c的常用方法之一[ 3, 4]。

本研究参照美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)部分文件的要求[ 5, 6, 7],对HLC-723 G8的主要临床性能进行评价。精密度试验显示HLC-723 G8测定HbAlc批内、批间不精密度均在可接受范围内, CV均<1%,重复性较好,结果稳定。相关性试验显示,HLC-723 G8与HLC-723 G7相比,HbA1c结果呈明显相关( r2 =0 .999, P<0.001),预期偏倚为0.06,相对偏倚值为0.83%,偏差符合率100%,达到可接受范围。而且,HLC-723 G8测定HbA1c的速度较HLC-723 G7更快,报告时间明显缩短(HLC-723 G8标准模式下的高速检测为1.0 min/测试,从开机到报告仅需2 min;HLC-723 G7为1.2 min/测试,3.6 min出报告)。HLC-723 G8测定HbA1c在5%~12%范围内线性良好,测定值与预期值高度相关( r2 =0 .999 6, P<0.001)。HLC-723 G8测定HbA1c的携带污染率为1.12%,满足≤3%的要求,高值标本对低值标本的结果无明显携带污染。文献报道,HbA1c的水平主要取决于血糖浓度,但也受其他因素的影响,如年龄、性别、种族、地域、妊娠、肝肾疾病、药物(大剂量水杨酸盐、酒精、维生素C和维生素E等)、存在异常血红蛋白、贫血和红细胞增多等[ 8]。故本研究参考区间验证试验在挑选健康人群时均考虑到上述影响因素。结果显示,54名健康人群的HbA1c测定结果在4.7%~6.3%,检测值在引用参考区间个体数与总参考个体数之比(R)为98.1%,在厂家提供的参考区间之内,可以引用厂家提供的参考区间。

综上所述,HLC-723 G8精密度高、相关性好、携带污染小,且具有良好的线性;另外,该仪器还具有测试速度快、操作简便等优点。值得商榷的是目前HLC-723 G8还是采用传统模式检测方法,对存在血红蛋白变异的标本其检测结果是有影响的,建议推广使用蛋白变异模式来检测患者标本。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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