引用本文
龙璐, 王钟明, 陈贞, 陶亚, 王堃, 易斌. 急性缺血性脑卒中患者血浆Lp-PLA2水平与颈动脉硬化斑块稳定性及神经功能缺损程度的关系. 2013, 28(10): 885-889[LONG Lu, WANG Zhongming, CHEN Zhen, TAO Ya, WANG Kun, YI Bin. The relationship of plasma Lp-PLA2 level with the stability of carotid artery atherosclerotic plaque and the severity of neurological impairment in patients with acute ischemic stroke. 上海检验医学, 2013, 28(10): 885-889]  
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急性缺血性脑卒中患者血浆Lp-PLA2水平与颈动脉硬化斑块稳定性及神经功能缺损程度的关系
龙璐, 王钟明, 陈贞, 陶亚, 王堃, 易斌
中南大学湘雅医院检验科,湖南 长沙 410008

龙璐,女,1988年生,学士,主要研究方向临床生物化学检验。

易斌,联系电话:0731-89753200。

摘要
目的

探讨血浆脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平与急性缺血性脑卒中患者颈动脉粥样硬化斑块稳定性及神经功能缺损程度的关系。

方法

将106例急性缺血性脑卒中患者根据颈动脉彩超检查分为不稳定斑块组(44例)、稳定型斑块组(38例)和无斑块组(24例),以40名健康体检者作为正常对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆Lp-PLA2水平。所有患者按美国国立卫生研究所中风量表(NIHSS评分)进行神经功能缺损程度评估。

结果

急性缺血性脑卒中患者Lp-PLA2水平明显高于正常对照组(Z=-6.995,P<0.05);无斑块组、稳定型斑块组和不稳定斑块组Lp-PLA2水平依次升高,且无斑块组与有斑块组比较差异有统计学意义(Z=-5.670,P<0.05),稳定型斑块组和不稳定斑块组比较差异有统计学意义(Z=-6.185,P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示Lp-PLA2评估急性缺血性脑卒中患者斑块稳定性的最佳截断值为137.00 μg/L,灵敏度为81.8%,特异性为95.1%。神经功能缺损程度随Lp-PLA2水平的增加呈递增趋势,差异有统计学意义(χ2=74.233,P<0.05)。血浆Lp-PLA2水平与NIHSS评分呈明显正相关(rs=0.861,P<0.05)。

结论

急性缺血性脑卒中患者Lp-PLA2水平与颈动脉粥样硬化斑块稳定性和神经功能缺损程度有关,血浆Lp- PLA2水平可预测斑块稳定性,同时对急性缺血性脑卒中患者的病情监测有重要价值。

关键词: 脂蛋白相关磷脂酶A2; 缺血性脑卒中; 斑块稳定性
中图分类号:Q556 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2013)10-885-05
The relationship of plasma Lp-PLA2 level with the stability of carotid artery atherosclerotic plaque and the severity of neurological impairment in patients with acute ischemic stroke
LONG Lu, WANG Zhongming, CHEN Zhen, TAO Ya, WANG Kun, YI Bin
Department of Clinical Laboratory,Xiangya Hospital,Central South University,Hunan Changsha 410008,China
Abstract
Objective

To investigate the relationship of plasma lipoprotein-associated phospholipase A2(Lp-PLA2) level with the stability of carotid artery atherosclerotic plaque and the severity of neurological impairment in patients with acute ischemic stroke.

Methods

According to the results of cervical vascular color Doppler ultrasound examination,106 patients with acute ischemic stroke were classified into unstable plaque group(44 cases),stable plaque group(38 cases)and non-plaque group(24 cases). A total of 40 healthy subjects were enrolled as healthy controls. Plasma Lp-PLA2 levels were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA),and the severity of neurological impairment were assessed by the National Institute of Health Stroke Scale(NIHSS) score.

Results

Compared with the healthy controls,the level of plasma Lp-PLA2 was significantly higher in patients with acute ischemic stroke (Z=-6.995,P<0.05). Plasma levels of Lp-PLA2 in stable plaque group and unstable plaque group were significantly higher than those in non-plaque group with statistical significance (Z=-5.670,P<0.05). Plasma levels of Lp-PLA2 in unstable plaque group were significantly higher than those in stable plaque group with statistical significance (Z=-6.185,P<0.05). According to the results of receiver operating characteristic (ROC) curve,the best cut-off value of Lp-PLA2 was 137.00 μg/L. The sensitivity was 81.8%, and the specificity was 95.1%. The severity of neurological impairment increased with the levels of plasma Lp- PLA2(χ2=74.233,P<0.05). The NIHSS score was positively correlated with the levels of plasma Lp-PLA2(rs=0.861,P<0.05).

Conclusions

The level of plasma Lp-PLA2 is related to the stability of carotid artery atherosclerotic plaque and the severity of neurological impairment in patients with acute ischemic stroke. Plasma Lp-PLA2 can serve as a predictive indicator of carotid artery atherosclerotic plaque stability.Meanwhile,it plays an important role in monitoring the conditions of patients with acute ischemic stroke.

Keyword: Lipoprotein-associated phospholipase A2; Ischemic stroke; Plaque stability
引言

在我国,脑血管病与恶性肿瘤、心血管病构成三大主要致死原因。同时,脑血管病也是世界范围内的主要致残和致死原因之一,因其发病突然亦称为脑血管意外或脑卒中。脑卒中具有高发病率、高致残率的特点[ 1],严重危害人类生命健康和生活质量。脑卒中大体分为缺血性和出血性脑卒中两大类,其中缺血性脑卒中约占70%~80%。颈动脉粥样硬化在脑卒中及短暂性脑缺血发生发展中起极大作用[ 2]。近年来许多临床观察显示,粥样硬化斑块的不稳定性是引起大多数脑血管病临床事件的潜在因素[ 3]。因此,判断斑块的性质对脑血管病的临床诊断和治疗具有非常重要的意义。目前,超声检测颈动脉是检测斑块不稳定性的最常用手段。但其需要先进的仪器设备,成本较高,且对专业技术人员要求很高,尚不能大规模推广应用。因此,寻找一种简便有效的指标或方法预测斑块的稳定性具有十分重要的临床意义。

目前,大样本研究表明脂蛋白相关磷脂酶A2 (lipoprotein-associated phospho lipase A2,Lp-PLA2)为心血管疾病新的危险预测因子[ 4, 5, 6]。缺血性脑卒中与冠心病有相似的病理生理学基础,因此,LP-PLA2也成为了动脉粥样硬化性缺血性脑卒中的一个独立风险预测因子[ 7, 8]。但Lp-PLA2评价颈动脉斑块稳定性的最佳截断值是多少?其与急性缺血性脑卒中患者颈动脉硬化斑块稳定性以及神经功能缺损程度的关系如何?这些相关研究目前较少报道。我们试图通过检测急性缺血性脑卒中患者血浆Lp-PLA2水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线建立一个评价斑块稳定性的截断值,同时探讨Lp-PLA2水平与这类患者颈动脉斑块稳定性及神经功能缺损程度的关系,以期为临床诊断、治疗和疗效观察提供依据。

材料和方法
一、样本资料

收集中南大学湘雅医院神经内科2012年7月至12月收治的急性缺血性脑卒中患者106例,根据颈动脉彩超显示的斑块性质将患者分为不稳定斑块组44例(男24例,女20例,年龄37~84岁)、稳定型斑块组38例(男20例,女18例,年龄43~81岁)、无斑块组24例(男13例,女11例,年龄34~70岁)。所有病例均符合2010年中国急性缺血性脑卒中诊治指南[ 9],并按美国国立卫生研究所中风量表(NIHSS 评分)进行神经功能缺损程度分型,分为轻型(<4分)39例、中型 (4~15分) 42例、重型 (>15分) 25例。根据Lp-PLA2水平将患者进行四分位分组。收集同期40名健康体检者作为正常对照组,排除心脑血管等疾病。所有待测者均清晨空腹静脉采血3 mL,乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝,1 000× g离心10 min分离血浆,置-20 ℃保存备用。

二、检测方法

Lp-PLA2检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA),试剂(批号120601)由天津康尔克生物技术有限公司提供。所有操作均严格按照试剂盒说明书进行操作。吸光度值测定采用荷兰anthos2010酶标仪,颈动脉彩超检查采用意大利ESAOTE-Technos MP型彩色超声诊断仪。

三、统计学方法

全部数据采用SPSS17.0统计软件处理,由于计量资料数据呈偏态分布,以中位数(M)表示其集中趋势,四分位数间距(QR)表示其离散趋势,各组数据用M(QR)表示,2组间比较用Wilcoxon秩和检验,多组间差异比较用Kruskal-Wallis H检验,相关性分析采用Spearman分析。计数资料多组间比较用行×列表资料的χ2检验。采用ROC曲线评价Lp-PLA2对急性缺血性脑卒中的诊断价值。 P<0.05为差异有统计学意义。

结果
一、急性缺血性脑卒中患者与正常对照组血浆Lp-PLA2水平比较

急性缺血性脑卒中患者血浆Lp-PLA2水平[M(QR)]为114.00(74.25)μg/L,明显高于正常对照组[59.00(26.25)μg/L]( Z=-6 .995, P=0.000)。

二、有斑块(不稳定型斑块、稳定型斑块)组与无斑块组血浆Lp-PLA2水平比较

有斑块组血浆Lp-PLA2水平明显高于无斑块组( Z=-5 .670, P=0.000)。不稳定型斑块组血浆Lp-PLA2水平明显高于稳定型斑块组( Z=-6 .185, P=0.000),见表1:

表1 有斑块组与无斑块组Lp-PLA2水平比较[M(QR),μg/L]
三、Lp-PLA2的ROC曲线分析结果

Lp-PLA2诊断急性缺血性脑卒中的ROC曲线见图1:

图1 1-特异性Lp-PLA2的ROC曲线

评估急性缺血性脑卒中患者斑块稳定性的最佳截断值是137.00 μg/L,此时ROC曲线下面积为0.920,评估斑块稳定性的灵敏度为81.8%、特异性为95.1%、Youden指数为0.769、阳性预测值为90.0%、阴性预测值为94.7%、阳性似然比为16.69、阴性似然比为0.19。

四、血浆Lp-PLA2水平与神经功能缺损程度的关系

神经功能缺损程度随血浆Lp-PLA2水平增加而呈递增趋势,差异有统计学意义( P<0.05),进一步采用秩转换技术结合完全随机设计的方差分析进行3组间两两比较,重型组血浆Lp-PLA2水平明显高于轻型组和中型组( P均<0.05)。见表2:

表2 缺血性脑卒中不同程度神经功能缺损患者血浆Lp-PLA2水平比较[M(QR),μg/L]

Spearman相关分析显示血浆Lp-PLA2水平与NIHSS评分呈明显正相关( r s =0 .861, P<0.05)。

五、急性缺血性脑卒中患者根据Lp-PLA2水平进行四分位分组后各组斑块情况比较

以Lp-PLA2≤82.75 μg/L为第一四分位组(26例)、82.76~114.00 μg/L为第二四分位组(28例)、115.00~157.00 μg/L为第三四分位组(26例)、≥158.00 μg/L为第四四分位组(26例)。随着Lp-PLA2水平的升高,急性缺血性脑卒中患者出现颈动脉硬化斑块的可能性逐渐增大,而且斑块性质从稳定逐渐趋向不稳定,见表4:

表3 急性缺血性脑卒中四分位组各组斑块情况[例(%)]
讨论

Lp-PLA2是一种由441个氨基酸残基组成的丝氨酸脂酶,相对分子质量为45 400,属于磷脂酶A2超家族中的一种,为非钙离子依赖性活性磷脂酶。Lp-PLA2活性成分由丝氨酸、组氨酸和天冬氨酸组成,主要由成熟的巨噬细胞和淋巴细胞合成和分泌。人血浆中的Lp-PLA2主要是以与脂蛋白颗粒结合的形式存在,其中2/3与低密度脂蛋白结合,1/3与高密度脂蛋白、极低密度脂蛋白结合[ 10]。研究[ 11]认为,炎症反应可能在急性缺血性脑卒中的病理机制中起重要作用。Lp-PLA2能水解氧化型低密度脂蛋白生成氧化型游离脂肪酸和溶血卵磷脂[ 12]。后二者是促炎介质,能刺激黏附因子和细胞因子的产生,促进单核细胞衍生为巨噬细胞,巨噬细胞进一步变成泡沫细胞,凋亡的泡沫细胞聚集成动脉粥样硬化性斑块,斑块能释放细胞因子和蛋白酶,降解纤维帽的平滑肌细胞和胶原基质,促使脆弱斑块的破裂,导致血栓形成和急性缺血性脑卒中事件的发生[ 13]。本研究结果显示急性缺血性脑卒中患者血浆Lp-PLA2水平明显高于正常对照组,与郭旭等[ 14]报道一致,再次证明Lp-PLA2参与了急性缺血性脑卒中的病理生理过程。

近年来,Lp-PLA2与动脉粥样斑块稳定性关系已成为研究热点。Wei-hua等[ 15]研究发现,冠心病患者血清Lp-PLA2水平与冠状动脉粥样硬化斑块稳定性有关,可作为临床预测不稳定斑块的血清学指标。廖玉华[ 16]认为Lp-PLA2可能是预测冠状动脉易损斑块新的炎症标志物。本研究结果显示不稳定型斑块患者血浆Lp-PLA2水平高于稳定型斑块患者,这表明血浆Lp-PLA2不仅与冠状动脉斑块稳定性有关,与颈动脉粥样硬化斑块稳定性也有关。目前,能解释血浆Lp-PLA2与不稳定粥样斑块关联的病理生理学机制还不是很清楚。有研究发现只在颈动脉斑块部位检测到Lp-PLA2,在周围正常动脉血管管壁部位没有检测到[ 17],其表达主要局限在大量脂质聚集、白细胞浸润、细胞坏死及钙化的斑块部位[ 17]。有关Lp-PLA2与不稳定斑块的病理生理机制还有待进一步研究。

目前,有学者推荐Lp-PLA2<200 μg/L为低心血管病危险,200~235 μg/L为临界高心血管病危险,>235 μg/L为高心血管病危险[ 19]。但判断范围较宽,尚未见用Lp-PLA2截点值来评价颈动脉粥样斑块稳定性的报道。考虑到若作为临床常用的生物标志物必须有一个截点值,本研究通过ROC曲线分析得出急性缺血性脑卒中患者斑块稳定性的最佳截断值是137.00 μg/L,此时ROC曲线下面积为0.920,评估斑块稳定性的灵敏度为81.8%、特异性为95.1%、Youden指数为0.769、阳性预测值为90.0%、阴性预测值为94.7%、阳性似然比为16.69、阴性似然比为0.19。这些性能指标均证实以Lp-PLA2=137.00 μg/L评估斑块稳定性有很好的准确性,可作为区分急性缺血性脑卒中稳定型斑块与不稳定型斑块的理想指标。

本研究结果显示急性缺血性脑卒中患者随着血浆Lp-PLA2水平的升高,神经功能缺损程度越严重,且血浆Lp-PLA2水平与NIHSS评分呈正相关,这说明血浆Lp-PLA2水平对急性缺血性脑卒中患者的诊断、分期及预后判断均有重要价值。有研究[ 20]表明,各种类型的卒中都首先发生微循环的障碍,神经细胞、胶质细胞等脑细胞变性坏死和中性粒细胞、巨噬细胞等炎性细胞浸润。缺血性脑卒中后微循环障碍反应性代谢产物产生众多的炎症介质如白细胞介素、白三烯类等,这些炎症介质之间相互联系、相互促进从而形成一个由Lp-PLA2介导的炎症信号传导通路,加重缺血性脑损伤。

综上所述,随着Lp-PLA2的升高,急性缺血性脑卒中患者出现颈动脉硬化斑块的可能性逐渐增大,而且斑块性质从稳定逐渐趋向不稳定。以Lp-PLA2=137.00 μg/L为截断值来评估斑块稳定性有很好的准确性,且血浆Lp-PLA2水平与颈动脉粥样硬化斑块稳定性和神经功能缺损程度呈正相关。检测患者血浆Lp-PLA2水平可预测斑块稳定性,对急性缺血性脑卒中患者的临床分型和病情监测有重要价值。同时,血浆Lp-PLA2检测简单快速,患者痛苦少,操作方便,技术要求不高,便于推广应用。

The authors have declared that no competing interests exist.

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