1.检测对象

82例干燥综合征和30例硬皮病患者均为仙居县人民医院住院和门诊皮肤科、内科患者,经相关的各项检查符合2002年修订的欧洲干燥综合征分类标准和1998年美国风湿病学会硬皮病诊断标准。干燥综合征患者男8例、女74例,年龄32~66岁,其中原发性49例、继发性33例。原发性干燥综合征按有无肾功能异常分为伴有肾损害组17例,无肾损害组32例;33例继发性干燥综合征中继发于系统性红斑狼疮12例、类风湿关节炎12例、硬皮病8例、多发性皮肌炎1例。硬皮病患者男8例、女22例,年龄22~63岁,按病变范围分为局限性18例、系统性12例,按病期分类为肿胀期13例、浸润期10例和萎缩期7例。另以26名体检健康、各项检查正常、无器质性疾病者为对照组,年龄25~70岁。

2.样本采集

空腹晨间采集静脉血5 mL,先注入0.9 mL于含0.109 mol/L枸橼酸钠抗凝液的0.1 mL塑料试管中,轻摇,30 min内以280× g离心3 min,分离血浆盛于2支小塑料试管中,保存于-70 ℃冰箱待测。余下静脉血样本检查其他相关项目。

3.检测方法

sTM采用双抗体酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)测定,试剂盒购自福建太阳生物技术有限公司,全部样本和参考标准品均严格按操作说明书进行。用美国DYNEX公司的OpSysMR 酶标仪比色,用软件包计算机绘制标准曲线并自动计算测定结果。

4.统计学方法

数据用 ±s表示,采用SPSS 10.0统计软件进行两样本均数 t检验,多样本组间比较采用方差分析和 q检验, P<0.05为差异有统计学意义。

82例干燥综合征患者血浆sTM浓度[(38.56±10.40)μg/L]升高,与对照组[(32.73±7.34)μg/L]比较,差异有统计学意义( t=2.88, P<0.01)。按病因分组,49例原发性干燥综合征患者血浆sTM水平[(37.57±8.60)μg/L)升高,33例继发性干燥综合征患者血浆sTM浓度[(40.04±11.41)μg/L]明显升高,与对照组比较,差异均有统计学意义( t=2.47, P<0.05; t=2.89, P<0.01)。继发组与原发组间差异无统计学意义( t=1.12, P>0.05)。

17例伴肾损害的原发性干燥综合征患者血浆sTM浓度[(48.39±13.48)μg/L]显著高于32例非肾损害患者[(32.77±9.52)μg/L, t=4.82, P<0.01],而非肾损害组sTM水平则与对照组水平一致。12例继发系统性红斑狼疮者血浆sTM水平[(57.43±14.54)μg/L]显著升高,12例继发类风湿关节炎患者血浆sTM水平[(36.12±9.45)μg/L]升高,而8例继发硬皮病者sTM水平[(23.18±6.26)μg/L]则显著降低,继发硬皮病组与继发系统性红斑狼疮组、继发类风湿关节炎组比较,差异有统计学意义( q=7.12, P<0.01; q=4.61, P<0.05)。

30例硬皮病患者血浆sTM浓度[(22.70±7.37) μg/L]明显低于对照组[(32.73 ±7.34)μg/L, t=5 .17, P<0.01],也显著低于82例干燥综合征患者[(38.56 ±10.40)μg/L, t=8.00, P<0.01)]。按病变范围分型,18例局限性硬皮病患者血浆sTM浓度[(26.28±6.87)μg/L]降低,与对照组比较差异有统计学意义( t=3.51, P<0.05)。12例系统性硬皮病患者血浆sTM浓度[(17.68±6.11)μg/L]进一步降低,低于局限性硬皮病组( t=3.64, P<0.05)。按病期分为3个期,13例肿胀期患者血浆sTM浓度[(29.87±8.01)μg/L]比对照组水平稍低,10例浸润期患者血浆sTM浓度[(21.61±5.14)μg/L]明显降低,7例萎缩期患者[(11.73±4.08) μg/L]极度降低,后组与肿胀期和浸润期组间比较,差异有统计学意义( q=6.22, P<0.01; q=4.71, P<0.05)。

原发性干燥综合征部分患者(约为1/4)血中有抗磷脂抗体和血栓形成倾向^{[ 2]},但对高凝状态或其相关指标研究少。本研究检测干燥综合征患者血浆sTM水平,发现原发性增高,继发性明显增高,表明存在血管内皮受损,继发性组高于原发性组与其多系统病变有关。进一步分析发现,原发性伴有肾损害者sTM明显升高,与无肾损害者有差异,表明原发性血管内皮的损伤主要见于伴肾功能异常患者,而无肾损害者的血浆sTM浓度与正常水平几乎一致。我们认为伴肾损害的干燥综合征患者血浆sTM的意义与系统性红斑狼疮伴肾损伤患者一样^{[ 3]},其既指示血管内皮明显损伤,又反映出疾病进展和/或严重性。在继发性组中,继发于系统性红斑狼疮和类风湿关节炎者明显升高,都与内皮损伤有关^{[ 3, 4]},而继发于硬皮病者则显著降低,可为临床和基础研究提供新信息。

我们通过sTM研究发现硬皮病患者的血浆sTM水平显著低于对照组和干燥综合征组,也明显低于文献中报告的其他结缔组织病^{[ 4]}。检测还表明,硬皮病患者血浆sTM低浓度与病变范围和病期有关,系统性硬皮病患者血浆sTM水平显著低于局限性硬皮病;肿胀期、浸润期和萎缩期患者血浆sTM水平依次递降。我们认为硬皮病低血浆sTM水平是一个很好的临床案例,其与血管萎缩、内皮细胞不能产生sTM有关。