目前潜血试验多针对检测标本内由于少量出血而存在红细胞破坏释放的血红蛋白(hemoglobin, Hb)。潜血检测方法有免疫法(胶体金免疫层析法等)和化学法(匹拉米洞定量法等)^{[ 1, 2]},2种方法相比,免疫法敏感性、特异性都有很大提高,不受饮食或相关药物影响,已被广泛应用于临床和批量人群的查体。实际应用中,常发现胃出血者免疫法与化学法结果不一致,免疫法出现阴性结果。我们为验证方法的可靠性,对胶体金免疫层析法(免疫法)和匹拉米洞定量法(化学法)进行比较。

2种方法潜血试验的敏感性、线性范围和特异性比较,免疫法可检出最低0.05 μg/mL的Hb,化学法只能检出10 μg/mL以上的Hb,二者敏感性相差200倍。Hb量在0.05~2 000 μg/mL范围内免疫法均可检出。标本中Hb>2 000μg/mL 时,可因双抗体夹心法竞争抑制现象而呈假阴性。化学法只能检出Hb含量在10 μg/mL以上样本。免疫法只与人Hb起反应,不与动物血和其他氧化剂发生假阳性反应。化学法易受氧化剂影响,要求试验前3 d禁食动物血、肝,富含叶绿素食物,铁剂和中药,避免假阳性^{[ 7]}。

由表2可见,免疫法对照组出现1例、化学法出现7例假阳性,经随访得知,6例阳性者在检测前均食入了动物肉类和菠菜。2种方法同时阳性1例是鼻出血者部分血液咽下入胃所致。胃出血组化学法均阳性,免疫法出现2例假阴性,对该2例样本第1次稀释液再稀释1次重新检测,结果阳性,原因是胃液中Hb过高出现双抗体夹心法的“竞争抑制”现象导致假阴性。因此取标本时量宜少不宜多,以避免假阴性。

胃液可消化Hb,使其失去免疫原性,导致免疫法出现假阴性结果。由表3可见,当胃液中出血量<50 μL/mL(相当于Hb 7 000 μg/mL)时,免疫法可出现假阴性结果。化学法是Hb中Fe³⁺具有类过氧化物酶作用,催化H₂O₂与色原而显色,不受胃液消化影响,不易出现假阴性。免疫法反应结果还与血液在胃液中停留时间有关^{[ 3, 4, 6, 7]}。由表3可见,在2 mL胃液中加入100 μL患者本人的血液,37 ℃反应1 h,免疫法为阴性。化学法反应至8 h,结果仍呈强阳性(++++)。免疫法与化学法联合应用,可起到优势互补作用。在分析免疫法和化学法结果时,要结合临床症状综合考虑。

目前,免疫胶体金层析法只是定性试验,仅给出阳性或阴性结果,不能对胃出血患者进行疗效观察^{[ 8, 9]},很难确定定量反应关系,因此不能指导临床判断出血量。而化学法可根据反应时间和颜色深浅大致估计出血量多少(半定量),适合对临床的正确引导。

免疫法的高敏感性、特异性和检测范围,但又存在Hb过高出现钩状效应和胃液消化Hb导致假阴性的现象。虽然化学法敏感性、特异性较差,但可弥补免疫法的缺陷。联合应用免疫法与化学法进行胃液潜血试验,对检测胃出血结果更可靠,可起到优势互补的作用。

总之,联合应用免疫法与化学法进行胃液潜血试验会出现2个结果不一致的情况。如何解释检验结果,需要结合临床体征和其他检查(胃镜、肠镜等)结果综合考虑。如果临床症状高度怀疑出血,但胃液潜血试验结果免疫法阴性、化学法阳性,应考虑免疫法的竞争抑制现象或胃液消化作用所致的假阴性。如果胃镜或其他检查不支持胃出血,化学法阳性时,应考虑其他氧化剂导致的假阳性。出现免疫法与化学法结果不一致时,应及时与临床沟通,指导临床正确解读检验结果,避免临床医师对检验结果的误会,从而对患者做出正确的诊断。