患者,男,65岁,工人,以进食后胸骨后疼痛不适半年于2012年2月25日入院,确诊为食管癌。于2012年3月7日进行食管部分切除、食管胃胸膜顶器械式吻合加淋巴结清扫术,术后第3天患者体温升高,达38.9 ℃,白细胞15.15×10⁹/L,中性粒细胞0.946,淋巴细胞0.029,红细胞3.20×10¹²/L,血红蛋白99 g/L,血小板164×10⁹/L,肝肾功能均正常。查体:双肺呼吸音清晰,未闻及干湿啰音,左肺呼吸音低。胸部计算机体层扫描检查提示,双侧胸膜腔积液,左侧胸壁皮下气肿。行胸腔闭式引流术,引流出淡红色液体约500 mL及少量气泡。换药时见伤口红肿,局部有渗出,拆开部分见有脓性液体渗出,抽取脓性液体送细菌培养,检出溶血二氧化碳嗜纤维杆菌,用纸片扩散法做药物敏感性试验,结果显示该菌对亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦、左氧氟沙星敏感,对哌拉西林、头孢噻肟、阿米卡星耐药。临床采用亚胺培南及美罗培南治疗1周后患者双肺呼吸音清晰,未闻及干湿啰音,伤口无渗出,创面新鲜有肉芽组织长出,愈合良好。

患者直接涂片为革兰阴性杆菌,丝状梭形杆菌,见图1,接种3块血琼脂分别放置需氧环境、厌氧环境及10%CO₂环境培养,经35 ℃培养48 h后,需氧环境平板上无细菌生长,厌氧环境及10%CO₂环境平板长出直径约2~3 mm灰白色、稍凸起、沿划线扩散生长、呈条纹样边缘的菌落。涂片染色镜检为革兰阴性杆菌,菌体呈丝状,似梭形,见图2。该菌氧化酶、触酶均为阴性,采用美国西门子公司的WalkAway-96全自动微生物分析仪苛养菌鉴定板上机检测,结果为二氧化碳嗜纤维杆菌属,鉴定值99.99%,生物编码77477661。进一步做补充生化试验,葡萄糖O/F发酵、乳糖、蔗糖、硝酸盐还原、七叶苷、半乳糖苷酶试验阳性,精氨酸、蜜二糖试验阴性。根据生化特性与形态染色,确定为溶血二氧化碳嗜纤维杆菌。

图1

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	图1 二氧化碳嗜纤维杆菌直接涂片革兰染色镜下形态(×1 000)

图2

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	图2 二氧化碳嗜纤维杆菌纯培养涂片革兰染色镜下形态(×1 000)

二氧化碳嗜纤维杆菌属是1979年提出来的,根据16S RNA的序列分析,该菌属可分为3个组:(1)溶血二氧化碳嗜纤维杆菌、黄褐二氧化碳嗜纤维杆菌、生痰二氧化碳嗜纤维杆菌;(2)牙龈二氧化碳嗜纤维杆菌、颗粒二氧化碳嗜纤维杆菌;(3)狗咬二氧化碳嗜纤维杆菌、犬咬二氧化碳嗜纤维杆菌^[2]。黄褐二氧化碳嗜纤维杆菌、生痰二氧化碳嗜纤维杆菌、牙龈二氧化碳嗜纤维杆菌鉴别比较困难,他们都是氧化酶、触酶、精氨酸双水解酶阴性。溶血二氧化碳嗜纤维杆菌、黄褐二氧化碳嗜纤维杆菌能发酵半乳糖、糖原,但硝酸盐反应阴性,这一点与生痰二氧化碳嗜纤维杆菌不同。牙龈二氧化碳嗜纤维杆菌与其他2种菌不同的是七叶苷、乳糖和蜜三糖的发酵反应阴性或结果可变。另2种寄居在人体的二氧化碳嗜纤维杆菌——颗粒二氧化碳嗜纤维杆菌和溶血二氧化碳嗜纤维杆菌区别是溶血二氧化碳嗜纤维杆菌硝酸盐反应,水解七叶苷及糖原和菊粉的发酵反应均阳性。从动物中分离的狗咬二氧化碳嗜纤维杆菌与犬咬二氧化碳嗜纤维杆菌与人体分离的二氧化碳嗜纤维杆菌不同之处是他们的氧化酶、触酶及精氨酸双水解酶阳性。狗咬二氧化碳嗜纤维杆菌和犬咬二氧化碳嗜纤维杆菌区别是前者不能发酵菊粉、蜜三糖、蔗糖。

二氧化碳嗜纤维杆菌主要寄生人类口腔中,为条件致病菌。本案例为食道癌患者,可能与免疫功能减低引起该菌感染有直接关系。由于二氧化碳嗜纤维杆菌为兼性厌氧菌或微需氧菌,对营养及孵育的条件要求苛刻,生长缓慢,培养周期较长,国内报道该菌引起的感染甚少,应引起临床及实验室高度重视。尽管目前试验技术还没有商业化,但是DNA同源分析、16S RNA的限制片段长度多态性以及细胞蛋白图谱等方法已经用来鉴别二氧化碳嗜纤维杆菌属。