作者简介:曾素根,女,1961年生,主管技师,主要从事临床血液检验和教学工作。
通讯作者:江虹,联系电话:028-85422611。
分析脂血对血液分析仪参数的干扰情况。
方法正常新鲜全血标本在血液分析仪上进行全血细胞计数(CBC)后,将标本离心使血液中细胞与血浆分离,用相同体积的脂肪乳液置换出血浆,使血液中的甘油三脂(TG)>4.0 mmol/L,制成人工脂血标本,再用相同方法对脂血标本进行CBC分析,了解脂血对不同参数的干扰作用。
结果当TG>4.0 mmol/L时,可使血红蛋白(Hb)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)和红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)等参数假性增高,差异有统计学意义(
当血液中TG>4.0 mmol/L时,Hb、MCH和MCHC等参数需要进行纠正;TG浓度越高对Hb、MCH和MCHC的干扰越大;且Hb浓度越低受TG干扰程度越大。当血液中TG>14.45 mmol/L时,需要对WBC进行纠正。
To investigate the interference of lipemia on automatic hematology analyzers.
MethodsNormal fresh whole blood samples were determined for complete blood cell (CBC) count by automatic hematology analyzer,and the plasma were replaced by same volume of fat emulsion after centrifugal separation to make artificial lipemia [blood triglyceride (TG) > 4.0 mmol/L]. These samples were tested for CBC by the same method before they were added lipid to estimate which parameters can be affected by lipemia.
ResultsWhen the TG > 4.0 mmol/L,lipemia could make pseudo increase of hemoglobin (Hb),mean corpuscular hemoglobin (MCH) and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC)(
When TG > 4.0 mmol/L,Hb,MCH and MCHC need to be corrected. The higher TG concentration is,the greater interference of Hb,MCH and MCHC are. The lower Hb concentration is,the greater interference of TG is. When TG > 14.45 mml/L,WBC needs to be corrected.
血液分析仪检测结果准确与否,除了标本采集、仪器性能、操作等因素外,还有一个重要的原因,就是某些血液标本自身存在的干扰因素,影响结果的准确性。随着高脂血症患者的增加[ 1]和脂肪乳液成为临床常用肠外营养导致输入性脂血[ 2],使脂血标本出现增加趋势。脂血干扰血液分析仪检测结果的准确性,遭到临床抱怨的案例时有发生,了解血液中的高甘油三脂(TG)对哪些参数构成干扰,需要进行纠正,我们进行了该项研究分析。
1. 低速离心机
具有定时和调节离心速度的TDZ4-WS型号低速台式离心机,由湘仪器材厂提供。
2. 新鲜全血标本来源
献血员,临床标本。
3. 脂肪乳液
30%无菌脂肪乳注射液250 mL。
4. 仪器和试剂
日本Sysmex公司生产XE-2100血液分析仪。所有试剂均为Sysmex公司提供的原装配套试剂。
1. 不同TG浓度对全血细胞计数(CBC)干扰试验
乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝的新鲜全血105 mL,分为5组,每组10份,每份2 mL,剩余5 mL用于TG检测。每份用XE-2100血液分析仪进行CBC分析后(用去标本量130μL),以离心力1 700× g离心5 min,使血液中红细胞(RBC)、白细胞(WBC)和血小板(PLT)与血浆分离,轻轻取出试管,按照 表1配制含不同TG浓度的脂血标本,颠倒混匀10次以上,再用相同方法进行CBC分析。
![]() | 表1 人工脂血标本中不同TG浓度的配制 |
2. 不同血红蛋白(Hb)浓度受干扰程度试验
60份新鲜全血标本,要求无溶血、无黄疸、无脂血(TG<1.83 mmol/L),每份2 mL备用,按Hb浓度(g/L)分为<60、61110、111160、>160 等4个组,各组15份。每份检测的具体操作步骤同前。
差异百分率%=(脂血值或校正值-真实值)/真实值×100。计量资料以
![]() | 表2 不同TG浓度对CBC各参数的干扰(![]() |
不同TG浓度对血液分析仪CBC检测结果的影响,见 表2。对Hb、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)和红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)等参数的干扰,加脂前、后的变化,其差异百分率(%),见 表3和 图1。
![]() | 表3 不同TG浓度对Hb、MCH和MCHC干扰的程度(加脂前、后的百分差异率) |
不同Hb浓度受TG干扰程度,加脂前、后真实值与脂血值的差异百分率(%),见 表4和 图2。
![]() | 表4 不同Hb浓度受TG干扰的程度 |
当血液中TG浓度<4.02 mmol/L时,对血液分析仪的影响较小,可以忽略不计。当血液中TG浓度≥4.02 mmol/L时,加脂前、后的Hb、MCH和MCHC等参数差异有统计学意义( P均<0.05),需要进行校正,其纠正方法已有报道[ 1]。从 图1和 表2、3可以看出,Hb、MCH和MCHC受干扰的程度与TG的浓度成正比,TG浓度越高,干扰程度越大,其真实值与加脂后脂血的Hb、MCH和MCHC的差异百分率,随着TG浓度的增大而增大。 图2和 表4表明,Hb受干扰的程度与Hb自身浓度成反比;即Hb值越低,受干扰的程度越大。这说明,贫血越严重的标本,越需要对高TG的干扰进行校正,否则,血液中的高TG造成Hb假性增高,容易掩盖患者的病情,造成医疗事故。但脂血对RBC、红细胞压积(HCT)和平均红细胞体积(MCV)等参数的干扰极小,可忽略不计。
值得一提的是,贫血标本在被脂血干扰时,由于仪器没有报警提示,MCH及MCHC增高不明显,存在隐性干扰不易被发现,易掩盖病情。我们认为,在当次检测结果与历史数据差别较大,或检测结果与临床诊断不符者,可将标本低速离心或自然沉降15 min,观察血浆是否存在浑浊来判断。
众所周知,脂血对Hb存在干扰,实验证明,血液分析仪在对血液中的WBC、RBC、PLT等进行计数时,把大小不等的脂肪微粒也计入其中,因为RBC和PLT的数量级较大或血液中的TG水平较低,其干扰可以忽略不计;而当血液中TG浓度≥14.46 mmol/L时,对WBC的干扰有差异有统计学意义( P均<0.05),应对WBC数进行纠正,采用手工方法对WBC进行计数。脂血对正常水平的PLT数量的干扰较小可忽略不计,但我们在工作中遇到某些血液病、特发性血小板减少性紫癜(ITP)等患者的标本,由于PLT数量少,受脂血干扰的程度较大,也应该采取手工计数PLT的方法来进行纠正,以免造成医疗差错事故。
随着高脂血症患者的增加[ 1]和脂肪乳液成为临床常用肠外营养导致输入性脂血[ 2] ,使脂血标本出现增加趋势。脂血标本干扰血液分析仪检测结果的准确性,遭到临床投诉的案例时有发生,了解血液中的脂肪微粒对哪些参数干扰大,是否需要进行校正,提高血液细胞分析结果的准确性有一定的价值。
感谢:输血科孙玉明,生化室唐书强的协助。
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