吸毒者免疫功能改变的检测及分析
朱莉莉1, 施苗盛1, 赵印敏2
1.上海交通大学医学院附属精神卫生中心检验科,上海 201108
2.同济大学附属上海市肺科医院中心实验室,上海 200433

朱莉莉,女,1982 年生,学士,技师,主要从事临床免疫检验工作。

施苗盛,联系电话:021-64901737。

摘要
目的

探讨吸毒者细胞免疫[T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4/CD8比值)]、体液免疫[B细胞(CD19+)、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、补体C3]、非特异性免疫功能指标[自然杀伤(NK)细胞(CD16+CD56+)及白细胞介素-2(IL-2)]的改变,在临床进行心理干预治疗的同时为吸毒者提供治疗依据。

方法

收集47例吸毒者及53例健康体检者(正常对照组)外周血,采用流式细胞术(FCM)检测T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4/CD8比值)、B细胞(CD19+)、NK细胞(CD16+CD56+);采用免疫比浊法检测免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、补体C3;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-2。

结果

吸毒组CD3+、CD4+、CD19+细胞及IgM、补体C3水平明显高于正常对照组(P<0.05、P<0.01);NK细胞(CD16+CD56+)及IL-2水平明显低于正常对照组(P=0.000);CD8+细胞、CD4/CD8比值及IgG、IgA水平与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。

结论

吸毒者免疫功能可能受到了一定的损伤,导致免疫调节功能出现紊乱。

关键词: 细胞免疫; 体液免疫; 非特异性免疫; 吸毒者; 流式细胞术
中图分类号:RR446.1 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2013)12-1144-03
Abstract
Keyword:
引言

据统计目前全球吸毒人数已超过2亿,每年约有10万人因吸毒死亡,并有约1 000万人因吸毒而丧失劳动能力[ 1]。经临床研究发现,吸食毒品不仅使吸食者成瘾,长期吸食会造成机体的慢性中毒,引起机体神经内分泌系统、免疫系统、心血管系统和精神方面等多重损害[ 2]。为了探讨吸毒者免疫功能的变化,我们采用流式细胞术(FCM)测定了吸毒者CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16+CD56+细胞,同时采用免疫比浊法及酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测了免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)、补体C3及白细胞介素-2(IL-2)水平,从细胞免疫、体液免疫、非特异性免疫功能三方面评价吸毒者整体免疫功能状态。

材料和方法
一、研究对象

1.吸毒组

选择上海交通大学医学院附属精神卫生中心(上海市自愿戒毒中心)2011年3月至2011年8月新进入院戒毒的吸毒者47例,男32例,女15例,年龄18~52岁。均符合中国精神障碍分类及诊断标准-3 (CCMD-3)中的药物依赖诊断标准。连续吸食海洛因等阿片类毒品6个月以上,人类免疫缺陷病毒(HIV)血清学检测阴性反应,无服用激素类药物治疗史,排除严重感染性疾病者、既往无严重神经、精神疾病史者、无自身免疫疾病病史。

2.正常对照组

选择同期上海交通大学医学院附属精神卫生中心53名健康体检者,男34名,女19名,年龄23~54岁。排除严重感染性疾病;无神经、精神疾病;无明显的心、脑、肝、肾等器质性疾病史及自身免疫疾病、高血压、高血脂、糖尿病、肿瘤等疾病史。

二、仪器与试剂

BECKMAN-COULTER eplcs Rxl四色流式细胞仪、雅培C8000全自动生化分析仪、318MC型酶标仪(上海三科仪器有限公司生产)。单克隆抗体由eBioscience公司和 Biolegend公司提供。ELISA试剂由美国RapidBio公司提供。IgG、IgA、IgM、补体C3试剂由北京利德曼生化股份有限公司提供。

三、方法

吸毒组与正常对照组均采集外周血5 mL分成2管。一管抗凝,检测淋巴细胞亚群;另一管不抗凝,分离血清后储存于-20 ℃冰箱,检测免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、补体C3、IL-2。1周内测定完毕。

细胞免疫指标包括T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4/CD8比值);体液免疫指标包括B细胞(CD19+)、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、补体C3;非特异性免疫指标包括自然杀伤(NK)细胞(CD16+CD56+)及IL-2。CD3+、CD4+、CD8+、CD19+和CD16+CD56+细胞采用FCM检测,以CD45/SSC设门。FCM检测统一送至上海兰卫临床检验有限公司测定,标本运输符合ISO15189生物样本采集与运输的相关要求。血清IL-2采用ELISA检测。血清IgG、IgA、IgM、补体C3采用免疫比浊法测定。

四、统计学方法

采用SPSS13.0软件进行统计学分析。所有数据以 ±s表示,组间比较采用 t检验。 P<0.05为差异有统计学意义。

结果
一、吸毒组和正常对照组细胞免疫指标比较

吸毒组CD3+、CD4+细胞明显高于正常对照组( P<0.01、 P<0.05);CD8+细胞、CD4/CD8比值与正常对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。见表1:

表1 吸毒组和正常对照组细胞免疫各项指标比较 ±s)
二、吸毒组和正常对照组体液免疫指标比较

吸毒组CD19+细胞及IgM、补体C3水平明显高于正常对照组( P<0.05),IgG、IgA水平与正常对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。见表2:

表2 吸毒组和正常对照组体液免疫各项指标比较 ±s
三、吸毒组和正常对照组非特异性免疫指标的比较

吸毒组NK细胞(CD16+CD56+)及IL-2水平明显低于正常对照组( P=0.000)。见表3:

表3 吸毒组和正常对照组非特异性免疫各项指标比较(]]> ±s
讨论

吸毒者临床易发细菌、病毒感染,且感染后不易治愈,是吸毒者免疫功能紊乱所致[ 3]。T淋巴细胞是免疫系统中功能最为重要的细胞。 正常情况下T淋巴细胞各亚群相互作用维持正常免疫功能。CD4+T淋巴细胞是细胞免疫的主要效应细胞,而CD8+T淋巴细胞在体液免疫中发挥重要的作用[ 4]。本研究吸毒者CD3+、CD4+细胞明显高于对照组,而CD8+细胞、CD4/CD8比值无明显变化,这与赵幸福等[ 5]对海洛因依赖者治疗前外周血CD3+、CD4+的百分比明显高于对照组的研究一致或相近。也有研究称海洛因依赖者周围血CD4+百分比增加,CD8+减少或正常[ 6]。提示该类患者存在细胞免疫功能异常,可能与过度代偿有关。吸毒者体液免疫功能的影响,临床研究结果并不一致。杨良等[ 7]报道,与健康对照组比较,仅IgA有明显降低。国外报道海洛因滥用者血清IgG、IgA、IgM水平均明显高于对照组[ 8]。本研究所测结果表示仅IgM水平高于正常对照组,这与甸自金等[ 2]报道的结果一致。IgM是在生物进化过程中出现最早的免疫球蛋白,也是免疫球蛋白中最具有多样性的一种。由于记忆B细胞并不大量分泌IgM,所以IgM的升高表示近期有抗原出现。IgM、B细胞和补体C3含量高水平表达状态,可能是毒品作为抗原或半抗原物质刺激了机体免疫应答机制所致[ 9]。毒品可使细胞因子如IL-2、IL-4的分泌明显减少,提示阿片类物质可直接抑制淋巴细胞的活化。IL-2的减少使IL-2依赖的辅助性T细胞(TH)和NK细胞克隆增殖受限,NK细胞杀伤活性降低,还可引起B细胞和巨噬细胞表面受体表达减少。本研究所示IL-2和NK细胞明显下降与文献[ 10, 11] 报道结果一致。

综上所述,新近吸毒者无论细胞免疫、体液免疫、非特异性免疫功能都会有所改变,提示吸毒者免疫功能紊乱。推测可能在急性戒断期,吸毒者血液中毒品浓度急剧下降,皮质激素发生含量及节律的改变,机体产生的一种拮抗自身损伤的保护性调节,也可能是吸毒者抗感染免疫降低的原因之一[ 12]。新近吸毒者短期脱毒治疗后免疫水平的恢复需要的时间较长,何时达到正常人水平,需进一步探讨。短期戒毒所致的免疫应激阶段是一个涉及到神经-免疫双向调节的重要阶段[ 13]。这也为临床易患各类感染性疾病合并自身免疫疾病的吸毒者的戒毒治疗提供了一定的理论依据。

The authors have declared that no competing interests exist.

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