引用本文
蒋伟燕, 江明华, 吴义忠, 章赵华, 陈小剑. 未成熟血小板分数在血小板减少性疾病中的变化. 2013, 28(1): 47-50
JIANG Weiyan, JIANG Minghua, WU Yizhong, ZHANG Zhaohua, CHEN Xiaojian.. The variation of immature platelet fraction in patients with thrombocytopenic diseases. Labratory Medicine, 2013, 28(1): 47-50  
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未成熟血小板分数在血小板减少性疾病中的变化
蒋伟燕, 江明华, 吴义忠, 章赵华, 陈小剑
温州医学院附属第二医院检验科,浙江 温州 325027

作者简介：蒋伟燕,女,1982年生,学士,技师,主要从事临床检验工作。

通讯作者：江明华,联系电话：0577-88002866。

摘要
目的

了解血小板减少性疾病患者外周血未成熟血小板分数(IPF)、高荧光强度未成熟血小板分数(H-IPF)、未成熟血小板绝对值(IPF#)和血小板平均侧向荧光强度(PLT-X)的变化,探讨其在血小板减少性疾病中的临床意义。

方法

选取血小板减少性疾病86例[特发性血小板减少性紫癜(ITP)50例、再生障碍性贫血(AA)15例、急性白血病(AL)21例]、骨髓增生性疾病(MPD)32例[慢性粒细胞白血病(CML)11例、原发性血小板增多症(ET)16例、真性红细胞增多症(PV)5例]和健康对照者50名。应用SYSMEX XE-5000全自动血液分析仪检测各疾病组及健康对照组外周血血小板(PLT)、IPF、H-IPF、IPF#和PLT-X。将ITP组按PLT计数结果分为≤30×109/L、(>30<60)×109/L、(60<100)×109/L 3组,并比较各组IPF。

结果

ITP组IPF、H-IPF、IPF#和PLT-X测定值分别为(19.8±12.7)%、6.7(4.712.3)%、3.1(2.012.1)×109/L和(27.8±8.6)ch;AA组IPF、H-IPF、IPF#和PLT-X测定值分别为(5.6±2.5)%、1.9(0.74.0)%、0.8(0.41.4)×109/L和(17.3±2.4)ch;AL组IPF、H-IPF、IPF#和PLT-X测定值分别为(6.3±3.4)%、2.1(1.24.1)%、2.4(1.53.2)×109/L和(18.7±3.0)ch;MPD组IPF、H-IPF、IPF#和PLT-X测定值分别为(3.1±1.6)%、2.1(0.90.7)%、19.2(14.022.5)×109/L和(16.9±2.3)ch;健康对照组IPF、H-IPF、IPF#和PLT-X测定值分别为(4.1±1.3)%、1.2(1.01.7)%、9.3(7.412.1)×109/L和(18.4±1.5)ch。ITP组IPF、H-IPF和PLT-X明显高于AA组、AL组、MPD组和健康对照组(P<0.05);ITP组IPF#与AA组、AL组、MPD组比较差异均有统计学意义(P<0.05),和健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ITP各组间IPF差异无统计学意义(P>0.05)。

结论

检测血小板相关参数(IPF、H-IPF和PLT-X)可能有助于血小板减少性疾病的鉴别诊断。

关键词: 未成熟血小板分数; 血小板减少性疾病; 特发性血小板减少性紫癜
中图分类号:R446.11 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2013)01-0047-04
The variation of immature platelet fraction in patients with thrombocytopenic diseases
JIANG Weiyan, JIANG Minghua, WU Yizhong, ZHANG Zhaohua, CHEN Xiaojian.
Department of Clinical Laboratory,the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College,Zhejiang Wenzhou 325027,China
Abstract
Objective

To investigate the variation of immature platelet fraction (IPF),high-fluorescence intensity of immature platelet fraction (H-IPF),absolute value of immature platelet (IPF#) and mean side fluorescence intensity of platelet(PLT-X) in patients with thrombocytopenic diseases and their clinical significance in the thrombocytopenic diseases.

Methods

The platelet (PLT), IPF,H-IPF,IPF# and PLT-X of peripheral blood in 86 patients with thrombocytopenic diseases [50 cases of idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP),15 cases of aplastic anemia (AA) and 21 cases of acute leukemia (AL)],32 patients with myeloproliferative disorders (MPD) [11 cases of chronic myelogenous leukemia (CML),16 cases of essential thrombocythemia(ET) and 5 cases of polycythemia vera (PV)] and 50 healthy subjects were determined by automatic hematology SYSMEX XE-5000 analyzer. According to the results of PLT, the 50 cases of ITP were classified into ≤30×109/L, (>30-<60)×109/L and (60-<100)×109/L groups, and the results for IPF were compared.

Results

The IPF,H-IPF,IPF# and PLT-X in ITP group were (19.8±12.7)%,6.7(4.7-12.3)%,3.1(2.0-12.1)×109/L and (27.8±8.6) ch,respectively. The IPF,H-IPF,IPF# and PLT-X in AA group were (5.6±2.5)%,1.9(0.7-4.0)%,0.8(0.4-1.4)×109/L and (17.3±2.4) ch,respectively. The IPF,H-IPF,IPF# and PLT-X in AL group were (6.3±3.4)%,2.1(1.2-4.1)%,2.4(1.5-3.2)×109/L and (18.7±3.0)ch,respectively. The IPF,H-IPF,IPF# and PLT-X in MPD group were (3.1±1.6)%,0.9(0.7-1.4)%,19.2(14.0-22.5)×109/L and (16.9±2.3)ch,respectively. The IPF,H-IPF,IPF# and PLT-X in healthy subject group were (4.1±1.3)%,1.2(1.0-1.7)%,9.3(7.4-12.1)×109/L and (18.4±1.5) ch,respectively. Compared with the AA, AL, MPD groups and healthy subject group,the IPF,H-IPF and PLT-X of ITP group were higher (P<0.05),and the difference in the IPF# between ITP group and the other 3 groups was significant (P<0.05),but there was no statistical significance in the IPF# between ITP group and healthy subject group (P>0.05). There was no statistical significance for IPF in the different groups of ITP (P>0.05).

Conclusions

It is possibly helpful for the differential diagnosis of thrombocytopenic diseases to measure the platelet relevant parameters (IPF,H-IPF and PLT-X) of peripheral blood.

Keyword: Immature platelet fraction; Thrombocytopenic disease; Idiopathic thrombocytopenic purpura
引言

血小板(PLT)减少性疾病是临床常见的一种疾病,可由多种原因引起,大致可分为PLT生成减少,PLT破坏过多和PLT分布异常[ 1]。故区分外周血PLT减少的原因成为临床诊断和治疗PLT减少性疾病的首要任务。未成熟血小板分数(immature platelet fraction,IPF)体现了骨髓巨核细胞的PLT生成状态[ 2],能反映骨髓的PLT生成能力。了解外周血IPF的变化,有助于对PLT减少性疾病的鉴别诊断。我们通过分析特发性血小板减少性紫癜(idiophathic thrombocytopenic purpura,ITP)、再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)、急性白血病(acute leukemia,AL)和骨髓增生性疾病(myeloproliferative disorders,MPD)患者外周血IPF、高荧光强度血小板分数(high-fluorescence intensity of immature platelet fraction,H-IPF)、未成熟血小板绝对值(absolute value of immature platelet ,IPF#)和血小板平均侧向荧光强度(mean side fluorescence intensity of platelet ,PLT-X),探讨其在PLT减少性疾病中的应用价值。

材料和方法
一、标本来源

选取温州医学院附属第二医院门诊和住院患者118例,男53例,女65例,年龄18~75岁。其中PLT减少性疾病86例(ITP 50例、AA 15例、AL 21例]、MPD 32例[慢性粒细胞白血病(chronic myelocytic leukemia,CML)11例、原发性血小板增多症(essential thrombocythemia,ET)16例、真性红细胞增多症(polycythemia vera,PV)5例]。各疾病组患者均根据《血液病诊疗及疗效标准》[ 1]确诊,且均为初发患者。对照组50名均来源于温州地区健康体检者,排除其他内外科疾病及PLT相关性疾病,血液生化检测结果及影像资料均无异常。

二、标本采集

采集静脉血2 mL加入1.5 mg/mL乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管中,2 h内检测。标本采集经医院伦理委员会批准且患者知情同意。

三、仪器和试剂

SYSMEX XE-5000全自动血液分析仪,聚次甲基染料、氨丁三醇缓冲液、鞘液、质控等均为原装配套试剂。

四、仪器校准和质控

SYSMEX XE-5000全自动血液分析仪用配套校准品按校准程序校准,使结果和靶值偏差在允许范围内,即中值质控PLT在(209±24)×109/L内,低值质控PLT在(53±20)×109/L内(血常规质控批号20010811)。仪器每日测试前均做本底检测和质控,检测在质控通过后进行。

五、统计学方法

实验数据采用SPSS 13.0软件进行统计学分析。正态分布数据用 ±s表示,组间比较采用单因素方差分析;偏态分布数据用中位数(25%位数75%位数)表示,组间比较采用多个独立样本的中位数检验。 P<0.05 表示差异有统计学意义。

ITP组、AA组、AL组、MPD组和对照组PLT、IPF、H-IPF、IPF#和IPF-X检测结果见 表1。ITP组IPF、H-IPF和PLT-X明显高于AA组、AL组、MPD组和对照组( P<0.05),IPF#明显高于AA组和AL组( P<0.05),而明显低于MPD组( P<0.05),和对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。

表1 PLT各参数在不同疾病组中的检测结果

将ITP组按外周血PLT数分为≤30×109/L,(>30﹤60)×109/L和(60<100)×109/L 3组。3组间IPF差异无统计学意义( P>0.05)。见 表2。

表2 ITP各组IPF检测结果

IPF在不同疾病散点图上的分布见 图1。图中显示了ITP、AA、AL、ET患者和对照者散点图上IPF的分布以及IPF#,后者受外周血PLT的影响。

图1 IPF在不同疾病患者及对照者散点图上的分布注:FSC为前向散射光,反映细胞体积大小;SFL为侧向荧光强度,反映细胞内RNA含量;(a) ITP;(b) AA;(c) AL;(d) ET;(e) 对照者

讨论

网织血小板(RP)最先在大量失血的患者血液中发现,被认为是一种新生的PLT,是循环PLT中更年轻、功能更强的PLT组成[ 3]。RP在鉴别诊断PLT减少性疾病中已早有报道[ 4, 5, 6, 7],但在检测方法上并没有形成统一。RP通常使用流式细胞仪检测,流式细胞仪检测需要特殊染料及抗体,且仪器价格较昂贵、操作较复杂、成本较普通血细胞计数仪高而未用于常规检测[ 8]。IPF是RP的反映,能够显示骨髓的PLT生成状态[ 9]。SYSMEX XE-5000全自动血液分析仪使用可以穿透细胞膜进入胞质的荧光染料( polymethine和oxazine),与未成熟PLT中的RNA结合,染色后的细胞通过半导激光束,形成前向散射光和荧光强度,散点图上形成了成熟红细胞、网织红细胞、成熟PLT和IPF 4个不同的区域[ 10](见 图1)。在获得血常规结果的同时可以得到IPF、H-IPF、IPF#和PLT-X 4个参数。

本研究中对照组的IPF为(4.1±1.3)%,相关报道为(3.0±1.4)%[ 11]。ITP组IPF明显高于对照组、AA组、AL组和MPD组( P<0.05),提示其在鉴别诊断PLT减少性疾病中的价值。H-IPF和PLT-X属于2个较新的PLT参数,H-IPF是指IPF中荧光强度更强的领域里出现的PLT数与PLT总数的比例,而PLT-X是指PLT的平均侧向荧光强度,反映了PLT内容物质的含量(主要是核酸量)。ITP组H-IPF和PLT-X高于其他组,与IPF联合检测,具有辅助诊断的作用。ITP组IPF#与AA组、AL组和MPD组比较差异有统计学意义( P<0.05),而与对照组比较差异无统计学意义( P>0.05),原因在于IPF#是由PLT绝对值和IPF相乘所得,PLT的高低和IPF的大小影响了IPF#的结果。因此,MPD组IPF#高于其他各组,而IPT组高于AA组和AL组,与对照组差异无统计学意义( P>0.05)。所以在利用IPF#作为辅助诊断指标时,应与PLT、IPF、H-IPF和 PLT-X同时检测。

ITP组、AA组和AL组PLT均低于对照组。表明PLT生成均受到不同程度的影响,但其原因各不相同。IPT时外周PLT大量破坏,速度超过PLT生成,外周PLT明显减少,但骨髓的造血功能大致正常,其破坏速度超过了PLT的生成而失去代偿,表现为外周PLT减少,且为比较幼稚的PLT,IPF、H-IPF和PLT-X升高,PLT减低;AA和AL由于骨髓造血功能受到抑制,PLT生成减少,导致外周PLT减少, IPF、H-IPF和PLT-X则正常;MPD是一组造血干细胞克隆性增生性疾病,PLT一般不减少,IPF、H-IPF和PLT-X亦正常。由此可见,测定外周血IPF有助于区分外周血中PLT减少是由于PLT生成减少(骨髓PLT生成活跃)、抑制或破坏过多(骨髓PLT生成抑制)所致[ 12]。本研究还将ITP组根据PLT数量进行分组[≤30×109/L、(>30<60)×109/L和(60<100)×109/L],结果显示各组间IPF差异无统计学意义( P>0.05)。表明对于ITP而言,IPF与PLT在ITP中无差异。

综上所述,ITP中能反映PLT的生成状态,联合检测H-IPF、 IPF#和PLT-X具有较好的鉴别诊断价值。鉴于以上参数的检测方法较RP简单,快速,完全自动化操作,排除人为干扰,有望成为PLT减少性疾病的临床常规检测项目。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 张之南, 沈悌. 血液病诊疗及疗效标准[M]. [M]. 北京: 科学出版社, 2007: 172. [本文引用:2]
[2] Jung H, Jeon HK, Kim HJ, et al. Immature platelet fraction: establishment of a reference interval and diagnostic measure for thrombocytopenia[J]. Korean J Lab Med, 2010, 30(5): 451-459. [本文引用:1] [JCR: 0.723]
[3] Albanyan A, Murphy MF, Wilcock M, et al. Changes in the immature platelet fraction within ageing platelet concentrates[J]. J Thromb Haemost, 2008, 6(12): 2213-2215. [本文引用:1] [JCR: 6.081]
[4] 孙明艳, 姜晓萍, 陈立君, 等. 急性早幼粒细胞白血病患者网织血小板的检测与分析[J]. 血栓与止血学, 2009, 15(3): 128-130. [本文引用:1]
[5] 王贤, 张葵. 网织血小板检测在血小板减少症中的临床价值[J]. 中华实用诊断与治疗杂志, 2008, 22(11): 835-837. [本文引用:1]
[6] Pons I, Monteagudo M, Lucchetti G, et al. Correlation between immature platelet fraction and reticulated platelets. Usefulness in the etiology diagnosis of thrombocytopenia[J]. Eur J Haematol, 2010, 85(2): 158-163. [本文引用:1] [JCR: 2.548]
[7] 孙德华, 王前, 郑磊, 等. 网织血小板与血常规中血小板相关参数之间的相关性[J]. 血栓与止血学, 2008, 14(4): 171-174. [本文引用:1]
[8] Briggs C, Kunka S, Hart D, et al. Assessment of an immature platelet fraction (IPF) in peripheral thrombocytopenia[J]. Br J Haematol, 2004, 126(1): 93-99. [本文引用:1]
[9] Abe Y, Wada H, Tomatsu H, et al. A simple technique to determine thrombopoiesis level using immature platelet fraction (IPF)[J]. Thromb Res, 2006, 118(4): 463-469. [本文引用:1] [JCR: 3.133]
[10] 任春云, 武锦彪, 郭希超. 血液分析仪检测网织血小板比率在血小板减少性疾病中的应用[J]. 临床检验杂志, 2010, 28(5): 343-344. [本文引用:1]
[11] Yamaoka G, Kubota Y, Nomura T, et al. The immature platelet fraction is a useful marker for predicting the timing of platelet recovery in patients with cancer after chemotherapy and hematopoietic stem cell transplantation[J]. Int J Lab Hematol, 2010, 32(6 Pt 1): e208-e216. [本文引用:1] [JCR: 1.293]
[12] Abe Y, Wada H, Sakakura M, et al. Usefulness of fully automated measurement of reticulated platelets using whole blood[J]. Clin Appl Thromb Hemost, 2005, 11(3): 263-270. [本文引用:1]