CD3+、CD4+、CD8+T细胞水平在胃癌患者外周血中的变化
童明宏, 邵俊, 陈燕红, 邢颖
上海市长宁区中心医院,上海 200336

作者简介:童明宏,女,1968年生,学士,副主任技师,主要从事免疫学技术和分子生物学技术的研究。

摘要
目的

探讨T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+ 和CD4+/CD8+比值水平在胃癌患者外周血中的表达及意义。

方法

采用血液分析仪技术,检测40例胃癌手术前患者(按临床分期为Ⅰ~Ⅱ级组18例,Ⅲ~Ⅳ级组22例)及25名正常对照组外周血CD3+、CD4+、CD8+ 细胞和CD4+/CD8+比值T细胞水平。

结果

胃癌患者外周血CD3+、CD4+细胞、CD4+/CD8+ 比值分别为0.78%±0.35%、0.37%±0.21%、0.61%±0.42%,明显低于正常对照组(P<0.05);胃癌 Ⅲ~Ⅳ级 组CD3+、CD4+细胞 CD4+/CD8+ 比值分别为0.42%±0.27%、0.21%±0.17%、0.29%±0.25%, 明显低于Ⅰ~Ⅱ级组(0.95%±0.35%、0.45%±0.19%、0.76%±0.30%,P<0.05)。

结论

检测胃癌患者手术前外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+/CD8+比值T细胞水平,可以初步评估胃癌患者机体免疫状态,也为肿瘤的免疫增强治疗提供了理论依据。

关键词: T淋巴细胞; CD3; CD4; CD8; 胃癌
中图分类号:R446.6 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2012)06-445-03
Change on CD3+,CD4+ and CD8+ T lymphocyte levels in peripheral blood of patients with gastric cancer
TONG Minghong, SHAO Jun, CHEN Yanhong, XING Ying
Shanghai Changning District Center Hospital, Shanghai 200336, China
Abstract
Objective

To investigate the clinical significance and expression of peripheral blood T lymphocyte subset CD3+,CD4+, CD8+ and CD4+/CD8+ ratio in patients with gastric cancer.

Methods

Peripheral blood T lymphocyte subset CD3+, CD4+, CD8+ and CD4+/CD8+ ratio were determined by automatic blood cell analyzer in 40 patients with gastric cancer [according to the clinical stages:Ⅰ-Ⅱ stage group (18 cases) and Ⅲ-Ⅳ stage group (22 cases)] and 25 healthy subjects.

Results

The peripheral blood T lymphocyte subset CD3+, CD4+ and CD4+/CD8+ ratio in the gastric cancer group were 0.78%±0.35%,0.37%±0.21% and 0.61%±0.42%, respectively, which were significantly lower than those in the healthy control group (P<0.05). The T lymphocyte subset CD3+, CD4+ and CD4+/CD8+ ratio in Ⅲ-Ⅳ stage group were 0.42%±0.27%,0.21%±0.17% and 0.29%±0.25%, which were significantly lower than those in Ⅰ-Ⅱ stage group(0.95%±0.35%,0.45%±0.19% and 0.76%±0.30%,P<0.05).

Conclusions

The determinations of T lymphocyte subset CD3+, CD4+, CD8+ and CD4+/CD8+ ratio in peripheral blood of patients with gastric cancer are helpful to study and assess the immune status of patients , but also provide a theoretical reference to improve tumor immune therapy .

Keyword: T lymphocyte; CD3; CD4; CD8; Gastric cancer
引言

胃癌的发生是一个多因素、多阶段的过程。肿瘤免疫更是一个复杂的过程,恶性肿瘤患者往往免疫功能状态紊乱和低下,其中的一个重要因素为机体免疫功能失调,尤其是与细胞免疫功能状态至关重要,而免疫状态在一定程度上可预示着肿瘤的发展和预后。大量研究证实,宿主对机体内发生的肿瘤组织有自发性抵抗现象,而且以细胞免疫为主。机体的细胞免疫由T淋巴细胞介导,T淋巴细胞的主要功能是调节蛋白质抗原引起的所有免疫应答,并清除细胞表面抗原或细胞内微生物的效应作用。细胞免疫功能主要由不同的T淋巴细胞亚群决定,最重要的是辅助细胞(CD4+)和杀伤抑制细胞(CD8+),两者比例失调影响人体免疫系统,从而导致机体免疫水平处于抑制状态而致肿瘤的发生、发展[ 1]

本研究通过检测胃癌患者外周血中CD3+、CD4+、CD8+及调节性T细胞水平。探讨分析胃癌患者免疫功能状态,并观察其与临床分期的关系及预后提供参考。

材料和方法
一、研究对象

长宁区中心医院2009年12月至2010年8月住院的胃癌患者40例,其中男24例,女16例,平均年龄62.3岁。所有胃癌经胃镜确诊。胃癌分期按国际抗癌协会(UICC)根据原发肿瘤的大小及范围、区域淋巴结、肿瘤转移(TNM)3项指标对肿瘤进行病理学分期,分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级期。正常对照组25名,其中男14名,女11名,平均年龄45.5岁,为本院健康体检者。

二、仪器与试剂

1. 仪器 美国雅培公司生产的蓝宝石Sapphire全自动五分类血液分析仪。

2. 试剂 美国雅培公司提供CD3+、CD4+、CD8+单克隆细胞检测自动化方案全线产品。

三、方法

采取住院手术前患者静脉血2 mL,用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝,将血常规管放在专用管架上,继之放含有单克隆抗体的CD3+/CD4+、CD3/CD8+专用管子。选择仪器专用程序,仪器自动检测标本。15 min后,包括血常规和CD3+、CD4+、CD8+ 的各项指标和图谱都存在计算机中。严格按照项目检测操作规程进行操作。

四、统计学方法

所有数据采用均数标准差( x- ±s)表示,组间比较用 t检验。T细胞数量与胃癌分期相关性采用Spearman等级相关分析,SPSS13.0软件进行统计, P<0.05表示差异有统计学意义。

结果
一、胃癌各组与正常对照组CD3+、CD4+、CD8+ 和CD4+/CD8+比值水平检测

胃癌患者外周血 CD3+、CD4+ 细胞、 CD4+/CD8+比值明显低于正常对照组,差异有统计学意义( P< 0.05),结果见 表1

表1 胃癌组各分级组与对照组CD3+、CD4+、CD8+ 和CD4+/CD8+比值水平检测结果 x- ±s,%
二、胃癌组CD3+、CD4+、CD8+ 细胞和CD4+/CD8+比值水平与临床分期的相关性分析

胃癌组临床分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组)与 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值水平的Spearman等级相关系数( r)分别为-0.425、-0.488、0.235、-0.498。除CD8+外,( P<0.05)。提示胃癌组临床分期与CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平呈明显负相关性( r<0.5)。

讨论

胃癌是临床常见的恶性肿瘤之一,是消化系统发病率最高的肿瘤。在发达国家胃癌的发病率处于第4位,而发展中国家为第2位。我国是胃癌的高发区,其发病率和死亡率均超过世界平均水平的2倍,和其他肿瘤一样严重危害人类的健康[ 1, 2]

T细胞的免疫调节作用主要由CD4+、CD8+完成, CD4+协调B细胞分化产生抗体, CD8+则抑制抗体的合成、分泌及T细胞的增殖,两者的稳态维持着机体正常的免疫应答[ 3, 4]。本研究结果显示,胃癌患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+细胞比值均明显低于正常人,而CD8+较正常人有一定的升高,但差异不明显。说明胃癌患者免疫功能较正常人明显低下,其机制可能与肿瘤在发生、发展过程中分泌大量的免疫抑制因子(TDSF)有关[ 4]。胃癌临床分期 ⅢⅣ期组 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+细胞比值明显低于 ⅠⅡ期组,差异有统计学意义( P均<0.05)。

胃癌组临床分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级)与 CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值水平呈明显负相关性。随着临床分期的升高,CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值水平明显降低,说明淋巴细胞活化和增殖受到的抑制越严重,机体处于免疫抑制状态越严重,从而导致机体对突变细胞的免疫杀伤清除能力明显下降,细胞免疫抑制越明显。这进一步提示了随着肿瘤临床分期 TNM越高,其免疫功能越差,肿瘤在不断扩散、进展,而机体免疫状态抑制越明显,疾病病程不断的恶化。

本研究结果进一步证实了胃癌患者细胞免疫功能降低,即机体抗肿瘤免疫功能低下,导致肿瘤细胞逃避了免疫监视持续生长。因此,应用血液分析仪的新技术检测外周血T淋巴细胞表面抗原指标可用于胃癌患者的免疫状态监测,同时提示对胃癌患者的免疫辅助治疗应围绕提高CD3+、CD4+的数量以提高患者免疫功能。总之,随研究深入,外周血T淋巴细胞亚群的测定很有可能作为观察肿瘤患者免疫功能状态的一项重要指标,成为一项简便易行的常规检测项目。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 刘从敏, 张雪玲. 流式细胞仪分析恶性肿瘤患者淋巴细胞功能状态变化[J]. 中华中西医杂志, 2005, 6(20): 153-158. [本文引用:2]
[2] 刘从敏, 李敬华. 恶性肿瘤病人免疫治疗前后免疫功能的变化[J]. 中原医刊, 2006, 35(9): 20-22. [本文引用:1]
[3] Ichihara F, Kono K, Takahashi A, et al. Increased populations of regulatory T cells in peripheral blood and tumor-infiltrating lymphocytes in patients with gastric and esophageal cancers[J]. Clin Cancer Res, 2003, 9(12): 4404-4408. [本文引用:1] [JCR: 7.837]
[4] Kawamoto K, Nakamura S, Iwashita A, et al. Clini-copathological characteristics of primary gastric T-cell lymphoma[J]. Histopathology, 2009, 55(6): 641-653. [本文引用:2] [JCR: 2.857]