1.菌株来源 分离自济宁医学院附属医院2009年1月至2011年12月间住院及门诊患者各种样本, 按《全国检验技术操作规程》(第3版)的要求操作, 共分离出16 527株。

2.质控菌株 金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853和大肠埃希氏菌ATCC25922均购自国家卫生部临床检验中心。

3.试剂及仪器 各种分离培养基、API鉴定系统及微生物全自动分析仪均为法国生物梅里挨公司产品。

4.细菌鉴定 利用VITEK-2微生物全自动分析仪进行细菌鉴定, 利用纸片扩散法进行药敏测定, 操作规程及结果判读参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)规定^[1]严格进行。所用药敏纸片如下:头孢噻肟、头孢曲松、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素、哌拉西林、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南、头孢哌酮、庆大霉素、复方磺胺甲口恶唑、妥布霉素、阿米卡星、氨苄西林/舒巴坦、左旋氧氟沙星、苯唑西林、青霉素、利福平、四环素、万古霉素、克林霉素、头孢唑啉、红霉素、头孢西丁。所有药敏纸片均购自OXOID公司。

1.样本来源及临床分布 样本来源以痰液、血液和尿液为主, 分别占51.41%、28.33%和9.05%, 其余为脑脊液、分泌物、肺泡灌洗液等。临床分布以呼吸内科(32.61%)、肾内科(15.23%)、神经外科(14.87%)、泌尿外科(8.54%)为主, 其他临床科室均< 5%。

2.主要检出病原菌分布 16 527株病原菌中占前3位的均为革兰阴性菌, 分别为铜绿假单胞菌(19.4%)、大肠埃希菌(18.6%)、肺炎克雷伯菌(11.5%)。革兰阳性球菌中以金黄色葡萄球菌为最多(10.4%), 真菌以白色念珠菌为最多(12.3%)。见表1。

表1

表1

表1 20092011年临床主要分离菌株的分布 (株) 病原菌 2009年 2010年 2011年 铜绿假单胞菌 924 934 1 320 大肠埃希菌 705 902 1 288 肺炎克雷伯菌 658 450 868 金黄色葡萄球菌 525 337 422 鲍曼不动杆菌 374 426 473 白色念珠菌 542 617 346 阴沟肠杆菌 205 267 197 热带念珠菌 240 274 362 表皮葡萄球菌 158 117 76 嗜麦芽寡养单胞菌 120 237 137

表1 20092011年临床主要分离菌株的分布

3.对常用抗菌药物的耐药率 分别对铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的耐药率进行统计。结果表明, 2009~2011年3年中, 铜绿假单胞菌对亚胺培南(4.04%、1.89%、0.7%)、头孢吡肟(2.70%、2.46%、4.64%)、头孢哌酮/舒巴坦(5.74%、2.46%、2.55%)的敏感率较高, 对复方磺胺甲口恶唑(84.15%、87.54%、86.86%)、头孢噻肟(67.22%、62.59%、58.85%)、头孢曲松(65.27%、68.42%、73.27%)的耐药率较高, 对其他药物的耐药率在8.5464.15%之间; 金黄色葡萄球菌对万古霉素(0%、0%、0%)、替考拉宁(0%、0%、0%)、呋喃妥因(0.49%、2.29%、0.97%)的敏感率较高, 对青霉素(96.32%、96.45%、98.55%)、红霉素(79.96%、89.31%、85.51%)和克林霉素(78.77%、72.39%、72.57%)的耐药率较高, 对其他药物的耐药率在14.7272.51%之间。白色念珠菌的耐药率见表2。

表2

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表2 20092011年白色念珠菌耐药株数及耐药率 [株(%)] 抗菌药物 2009年 2010年 2011年 氟康唑 16(3.44) 4(2.09) 1(0.29) 氟胞嘧啶 18(3.6) 3(1.57) 4(1.16) 伊曲康唑 6(1.29) 0(0) 2(0.58) 制霉菌素 2(0.31) 0(0) 0(0)

表2 20092011年白色念珠菌耐药株数及耐药率

本研究样本来源以痰液为主, 占51.41%, 表明医院病原菌引起的感染以呼吸道感染为主, 与文献^{[2, 3]}报道一致。科室分布以呼吸内科、肾内科和泌尿外科为主。这可能因为以上病区的患者多为年龄大、手术范围广、住院治疗时间长、机体免疫功能低下、侵入性操作多等。

我院检出病原菌排序前3位的为铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌, 均属于革兰阴性菌, 革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌为最多, 这与国内外其他医院报道^{[4, 5, 6]}基本一致。真菌以白色念珠菌最多。

铜绿假单胞菌是临床上最常见的引起医院感染的条件致病菌, 我院近3年铜绿假单胞菌的耐药率显示, 对头孢类抗菌药物的耐药率总体呈较高水平并呈上升趋势, 对复方磺胺甲口恶唑的耐药率一直维持在较高水平, 对喹诺酮类抗菌药物的耐药水平逐渐升高, 碳青霉烯类抗菌药物凭借其抗菌作用强、对β -内酰胺酶高度稳定等优点, 被临床广泛应用, 随之而来的耐药菌株也逐渐上升。我院已检出对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌。

金黄色葡萄球菌已经成为世界范围内引起医院内感染首要的病原菌, 对青霉素类和大环内酯类抗菌药物呈高度耐药; 对第1代、第2代头孢菌素也显示了较高的耐药率, 但对万古霉素和替考拉宁高度敏感。近3年我院未发现对这2种抗菌药物耐药的菌株, 但对这2种抗菌药物的选用也应该慎重考虑。

本研究结果显示, 真菌特别是白色念珠菌的分离率一直较高并呈上升趋势, 且真菌对常用抗菌药物仍然还保持有较高的敏感性, 临床上可根据感染菌的种类选择使用。

综上所述, 定期监测和分析病原菌分布及耐药性变迁具有重要意义, 对于指导临床正确选用抗菌药物提供了重要信息, 尤其是在病原菌鉴定和药物敏感结果报告之前, 更好的指导临床医师正确的经验用药。