Sysmex XE2100血液分析仪散点图对检测异型淋巴细胞的价值
王晓欧, 陈小剑, 舒旷怡, 方佩佩
温州医学院附属第二医院检验科,浙江 温州 325027

作者简介:王晓欧,女,1982年生,学士,技师,主要从事临床检验工作。

摘要

目的 探讨存在异型淋巴细胞的血液标本在Sysmex XE2100全自动血液分析仪(简称XE2100)白细胞分类(DIFF)通道散点图的变化规律。方法 观察40例异型淋巴细胞>10%和异型淋巴细胞<10%且其图像有明显变化的患者标本在XE2100 DIFF通道的散点图,总结其变化规律。结果 存在异型淋巴细胞的标本在XE2100的散点图特定区域出现异常散点图。13例以单核细胞型为主的异型淋巴细胞标本在单核细胞散点图的上方出现异常均匀分布的呈椭圆形或近似长方形的散点图;27例以浆细胞型和幼稚型为主的混合型异型淋巴细胞标本中有19例标本在DIFF通道上淋巴细胞和单核细胞所在区域融合成灰白色并且向上延升,另外8例标本提示淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞在各自的分布区域出现,但其周围散点增多并相互之间有交叉,分界不清。结论 对仪器提示有异型淋巴细胞存在的患者,结合血液分析仪的DIFF通道散点图形和血涂片镜检,可以降低漏诊和误诊概率。

关键词: 异型淋巴细胞; 血液分析仪; 散点图
中图分类号:R446.11 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2012)05-0379-03
The significance of scatter diagram from Sysmex XE2100 hematology analyzer on abnormal lymphocyte detection
WANG Xiaoou, CHEN Xiaojian, SHU Kuangyi, FANG Peipei.
Department of Clinical Laboratory, the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, Zhejiang Wenzhou 325027, China
Abstract

Objective To investigate the variation principle of DIFF scatter diagram of Sysmex XE2100 hematology analyzer on abnormal lymphocyte.Methods A total of 40 samples with the percentages of abnormal lymphocyte >10% and <10% having DIFF scatter diagram obvious changes were observed, and the variation principle of DIFF scatter diagram was summarized.Results The samples with abnormal lymphocyte had abnormal scatter diagram by Sysmex-XE2100 hematology analyzer. The 13 samples which mainly existed monocytoid atypical lymphocyte showed abnormally homogeneous scatter diagram described as ellipsoidal or oblong above the scatter diagram of monocyte. Among 27 samples which mainly mixed with plasmacytoid atypical lymphocyte and blast-like atypical lymphocyte, there were 19 samples'scatter diagram turning into greyish white and extended upward in the area of lymphocyte and monocyte on the DIFF channel, and the other 8 samples'scatter diagram showed that lymphocyte, monocyte and neutrophile granulocyte in their respective area, but the scatter increased and overlapped around these areas.Conclusions With the prompt indication of abnormal lymphocyte by the analyzer, the DIFF scatter diagram of hematology analyzer with microscopy on blood smear could reduce the chances of misdiagnosis and misidentified cases.

Keyword: Abnormal lymphocyte; Hematology analyzer; Scatter diagram

全自动血液分析仪在大大减轻了检验人员的工作量的同时, 也减少了血液显微镜涂片检查。Downey于1923年描述了异型淋巴细胞的形态并将其分为3型:浆细胞型、单核细胞型和幼稚型[1]。由于显微镜复查率的减少, 异型淋巴细胞形态的多样性及血液分析仪不能区别出其类型, 使这种散发病例漏诊、误诊概率增加[2]

本研究对异型淋巴细胞> 10%及图像有明显变化而异型淋巴细胞< 10%的标本的散点图进行分析, 寻找这些标本散点图特点。

材料和方法
一、材料

1.标本来源 2009年3月至2009年12月温州医学院附属第二医院确诊有异型淋巴细胞存在的标本40例。其中以单核细胞型为主的13例, 以浆细胞型和幼稚型为主的混合型27例。

2.仪器和试剂 Sysmex XE2100全自动血液分析仪(简称XE2100)和原装配套试剂由日本希森美康公司提供。Olympus CH20双目光学显微镜由日本OLYMPUS公司生产, 用于血涂片显微镜分析。血涂片用瑞特-姬姆萨复合染液进行染色, 染液按《临床检验管理与技术规程》(第2版)的要求[3]配制。

二、检测方法

1.采用美国BD公司生产的乙二胺四乙酸二钾盐真空抗凝管采集肘静脉血2 mL, 应用XE2100进行血液分析, 2 h内检测完毕。

2.异型淋巴细胞确诊 制作血涂片, 瑞特-姬姆萨复合染液染色, 油镜下由2位有经验的检验人员观察20个有核细胞, 根据异型淋巴细胞的形态特点, 结合病情判断细胞并测定百分比。

结 果

一、XE2100正常白细胞分类(DIFF)通道血细胞散点图特征

图1

图1 XE2100正常血细胞DIFF散点图(注:淋巴细胞为“ → ” 所指区域; 单核细胞为“ ↓ ” 所指区域; 中性粒细胞为“ ← ” 所指区域; 嗜酸性粒细胞为“ ↑ ” 所指区域)

二、以单核细胞型为主的异型淋巴细胞标本的散点图特征

13例以单核细胞型为主的异型淋巴细胞标本在单核细胞散点图的上方出现异常均匀分布的呈长椭圆型或近似长方型的散点图(图中“ ↔ ” 所指), 淋巴细胞和单核细胞分界比较清楚, 中性粒细胞和嗜酸性粒细胞所在的区域未出现明显的异常, 见图2

图2 以单核细胞为主的异型淋巴细胞标本DIFF散点图

三、以浆细胞型和幼稚型为主的异型淋巴细胞标本的散点图特征

以浆细胞型和幼稚型为主的异型淋巴细胞标本在DIFF通道上散点图会出现融合的现象。27例以浆细胞型和幼稚型为主的混合型异型淋巴细胞标本中存在浆细胞型、单核细胞型和幼稚型3种型别中的2种或3种。其中有19例标本的异型淋巴细胞比例≥ 15%。这19例标本在DIFF通道上淋巴细胞和单核细胞所在区域融合成灰白色并且向上延升, 中性粒细胞和嗜酸性粒细胞所在区域未见明显异常, 见图3。另外8例标本的异型淋巴细胞比例< 15%。这8例标本提示淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞在各自的分布区域出现, 但其周围散点增多并相互之间有交叉, 分界不清楚, 见图4。但不管异型淋巴细胞的数量及类型如何, 其IMI通道上都是正常的图像, 见图5

图3 以浆细胞型和幼稚型为主的混合型异型淋巴细胞标本DIFF散点图(异型淋巴细胞≥ 15%)

图4 以浆细胞型和幼稚型为主的混合型异型淋巴细胞标本DIFF散点图(异型淋巴细胞< 15%)

图5 XE2100 IMI散点图

讨 论

XE2100采用半导体激光流式细胞原理结合细胞化学荧光染色技术对血细胞进行检测。DIFF通道根据不同类型及不同成熟度的白细胞对荧光染料着色能力的差异, 检测散射光信号以区分淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞。横坐标是侧向散射光, 反映细胞内容物, 如核和颗粒等; 纵坐标是侧向荧光强度, 反映细胞内DNA和RNA的含量[4]

异型淋巴细胞是常见于传染性单核细胞增多症、病毒性肺炎、病毒性肝炎、肾综合症出血热等病毒性感染时或过敏原刺激下出现的以淋巴细胞增生, 并出现某些形态学变化的一类淋巴细胞。异型淋巴细胞的大量出现对诊断传染性单核细胞增多症有着重要意义, 一般情况下可高达10%以上。

以单核细胞型为主的异型淋巴细胞标本DIFF散点图见图2。其原因可能是因为淋巴细胞在某些病毒性感染或过敏原刺激下, 其染色质细致, 胞质丰富, 较不均匀, 无空泡, 有时似正常单核细胞, 多次甲基染料与其胞质和DNA、RNA结合加强, 染色强度增加, 出现如图2所示的上方区域。

浆细胞型异型淋巴细胞大小不一, 与普通淋巴细胞相似或稍大, 核多形, 染色质粗糙, 呈粗网状或成堆排列。胞质中无颗粒或少有颗粒。在DIFF通道上其侧向散射光会增强。幼稚型异型淋巴细胞的染色质细致均匀, 呈网状排列, 无浓集现象, 胞质呈蓝色, 一般无颗粒, 可有较均匀的小

空泡。在DIFF通道上, 多次甲基染料对其DNA、RNA的染色强度增加, 侧向荧光强度增加。以浆细胞型或幼稚细胞型混合的异型淋巴细胞标本DIFF散点图会出现融合的现象。当异型淋巴细胞比例≥ 15%时, DIFF会出现如图3的图像。因为数量多, 侧向散射光和侧向荧光都明显增强, 在淋巴细胞和单核细胞区域分不出细胞的类型, 出现融合, 呈灰白色区域。异型淋巴细胞比例< 15%时, 这些标本的DIFF散点图上会出现如图4所示的区域。因为数量不多且侧向散射光和侧向荧光强度变化幅度不是很大, 散点散在出现在正常区域周围, 各型细胞已分界不太清楚, 散在融合。无论异型淋巴细胞的数量及类型如何, 其IMI通道上都是正常的图像。在幼稚细胞出现散点的区域, 异型淋巴细胞类型和数量变化都不会在该区域出现异常散点(见图5)。

XE2100提供了大量的警示信息和可供参考的研究参数, 如Flag直方图、DIFF散射图、IMI散射图和IG%。实验室人员可根据这些信息从大量的标本中挑出需要显微镜涂片复检确认的标本。这样便大大降低了手工强度, 提高了工作效率[5]。如果我们能够正确分析散点图提供的信息, 就能帮助我们及时发现一些异常细胞群的存在, 如异型淋巴细胞、浆细胞、淋巴瘤细胞等, 让仪器更好、更科学地起到初筛的作用。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 谭齐贤, 张树平. 临床血液学和血液检验[M]. 第3版. 北京: 人民卫生出版社, 2006: 251-252. [本文引用:1]
[2] 卢文波, 周晓晖, 何娟妃. 重视血液分析仪异常图形标本的镜检复查[J]. 上海医学检验杂志, 2002, 17(6): 373-375. [本文引用:1]
[3] 陆永绥, 张伟民. 临床检验管理与技术规程[M]. 杭州: 浙江大学出版社, 2004: 65-66. [本文引用:1]
[4] 高飞, 张自成, 陈伟. 浅谈全自动血细胞分析仪Sysmex XE-2100在临床中的应用[J]. 激光杂志, 2006, 32(1): 93-94. [本文引用:1]
[5] 姜波, 吴红, 陈世锋, . 全自动血液分析仪异常报警信息的分析及临床应用[J]. 中华检验医学杂志, 2006, 29(11): 1013-1016. [本文引用:1]