乙型肝炎病毒感染者血清抗核抗体检测分析及临床意义

引用本文

董敏, 周厚清, 吴瑾滨, 陈碧婷. 乙型肝炎病毒感染者血清抗核抗体检测分析及临床意义. 2012, 27(5): 374-375
DONG Min, ZHOU Houqing, WU Jinbin, CHEN Biting. Detection and clinical significance of serum anti-nuclear antibodies in patients with hepatitis B virus infection. Labratory Medicine, 2012, 27(5): 374-375 复制到剪切板

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《检验医学》编辑部

乙型肝炎病毒感染者血清抗核抗体检测分析及临床意义

董敏¹, 周厚清¹, 吴瑾滨¹, 陈碧婷²

1.深圳市第二人民医院检验科,广东深圳 518036

2.广东医学院医学检验系,广东东莞 523808

作者简介：董敏,女,1970年生,学士,副主任技师,主要从事医学检验工作。

摘要

目的检测乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清中抗核抗体(ANA)的阳性率并探讨其临床意义。方法采用间接免疫荧光法( IIF)检测120例HBV感染者、82名正常对照者的ANA。结果 120例HBV感染者中ANA阳性率为30.0%,明显高于正常对照组(4.2%);HBV感染组的ANA以低滴度(1∶100)为主,占58.3%;ANA荧光模式以颗粒型(41.7%)最为常见。结论 HBV感染可诱导以低滴度为主的ANA,其在诊断、鉴别诊断及治疗中有一定的意义,发病机制可能与自身免疫有关。

关键词: 抗核抗体; 乙型肝炎病毒; 间接免疫荧光法

中图分类号:R373.2 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2012)05-0374-02

Detection and clinical significance of serum anti-nuclear antibodies in patients with hepatitis B virus infection

DONG Min¹, ZHOU Houqing¹, WU Jinbin¹, CHEN Biting²

1. Department of Clinical Laboratory, Shenzhen Second People's Hospital, Guangdong Shenzhen 518036, China

2. Medical Laboratory Department, Guangdong Medical School, Guangdong Dongguan 523808, China

Abstract

Objective To detect the serum anti-nuclear antibodies (ANA) and investigate its clinical significance in patients with hepatitis B virus (HBV) infection.Methods A total of 120 patients with HBV infection and 82 healthy subjects were enrolled, and indirect immuno-fluorescent assay (IIF) was used to detect the serum ANA.Results The positive rate of ANA in 120 patients with HBV infection (30.0%) was higher than that of healthy subjects (4.2%). ANA in patients with HBV infection was mainly depended on low titer(1∶100, 58.3%). The ANA granular fluorescence (41.7%) was highest in the patients with HBV infection.Conclusions HBV infection can induce to produce a variety of low titer ANA, and may play a certain role in the diagnosis, differential diagnosis and treatment. The pathogenesis of HBV may have some relationship with autoimmune.

Keyword: Anti-nuclear antibody; Hepatitis B virus infection; Indirect immuno-fluorescent assay

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乙型肝炎病毒(HBV)感染所导致的慢性肝炎往往进展为肝硬化、肝癌或肝衰竭。近年来病毒性肝炎自身免疫现象引起许多研究者的关注, 研究表明几乎所有的嗜肝病毒均可诱发机体的自身免疫^[1]。为了解慢性乙型肝炎患者血清中的自身抗体存在情况, 以及乙型肝炎与自身免疫之间的关系, 我们对120例HBV感染者血清中的抗核抗体(ANA)进行了检测。

材料和方法

一、研究对象

选自2010年6月至2011年2月在深圳市第二人民医院检验科聚合酶链反应(PCR)室检测乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)> 500拷贝/mL的120例HBV感染者, 男72例, 年龄1976岁; 女48例, 年龄2047岁。以72名健康体检者作为正常对照组, 男42名, 女30名, 年龄1646岁。

二、实验方法

间接免疫荧光法(IIF)检测ANA:选择Hep-2细胞和猴肝组织的冰冻切片作为抗原, 以生物薄片技术将带有细胞和组织的2种切片组合成一个反应区。4 ℃保存备用。待检血清自1∶ 100起稀释, 与各种组织细胞共同孵育30 min; 加入异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗体结合30 min; 洗片、封片后荧光显微镜观察结果。组织或细胞内出现特征性的绿色荧光、血清稀释度≥ 1∶ 100为阳性(试剂均购自德国欧蒙公司)。

三、统计学方法

各项检测结果阳性率以百分率表示, 阳性率间比较采用χ ²检验进行统计学分析。P< 0.05表示差异有统计学意义。

结果

一、自身抗体检测结果

见表1。

表1 HBV感染者血清ANA检测结果

二、ANA阳性滴度分布

见表2。

表2 ANA阳性滴度分布情况

三、ANA阳性荧光模型

ANA的核型特征不显著, 见表3。

表3 ANA阳性荧光模型分布

讨论

我国是乙型肝炎感染的高发地区, 约有10%~20%的急性乙型肝炎将转成慢性肝炎、肝硬化甚至发展成为肝癌, 严重地威胁着人们的健康。有文献报道慢性病毒性肝炎患者存在自身免疫现象, 主要表现为血清中检出各种自身抗体^[2]。故对HBV感染者检测自身抗体有助于了解机体的免疫状况, 指导临床治疗用药, 与自身免疫性肝炎(AIH)作鉴别诊断。

关于慢性病毒性肝炎患者自身抗体的检出率报道很多, 但结果不尽相同。现有的大量文献报道及本研究通过对HBV感染者ANA测定的结果证实, HBV感染者体内存在自身抗体, 引发机体自身免疫紊乱^[3]。本研究HBV感染者血清中ANA的阳性检出率为30%, 显著高于正常对照组(4.2%)。感染者ANA滴度以低滴度(1∶ 100)为主, 高滴度少见; ANA的核型特征不显著, 可以出现数种荧光模式, 其中以颗粒型常见, 所占比例最高, 其次为均质型, 部分感染者可见2种或2种以上荧光模式同时存在。张利方等^[4]研究发现在肝病的发生发展过程中, 自身免疫功能的变化多集中在与细胞增值、分裂有关的核仁成分上, AIH患者的核型主要以核仁型(50.0%)、核膜型(25.0%)为主。故HBV感染者荧光模式的特点可以协助临床对肝炎作出鉴别诊断。

目前, 关于慢性病毒性肝病可诱导自身免疫, 还有很多工作需要进一步研究, 如乙型肝炎伴有自身免疫现象还是存在自身免疫性肝炎, 这部分患者的鉴别诊断是棘手的问题。一般认为, 乙型肝炎伴自身免疫现象, 因为多数低滴度自身抗体仅反映机体出现自身免疫反应或疾病状态, 不直接影响免疫系统功能, 而高滴度(> 1∶ 320)自身抗体的存在与自身免疫性疾病密切相关^{[5, 6]}。但也有学者报道在个别患者血清中, 也可检测到高滴度的自身抗体。在临床治疗上自身免疫性肝病多采用免疫抑制剂治疗, 而乙型肝炎患者只用干扰素抗病毒治疗。若对存在高滴度自身抗体的乙型肝炎患者采用干扰素治疗, 干扰素可能会诱导或增强自身免疫活性细胞, 加重自身免疫性反应, 两者作用相反^[7]。故对慢性乙型肝炎伴有自身免疫现象, 特别是有高滴度的自身抗体存在时, 选择治疗方案要十分慎重, 慢性乙型肝炎干扰素抗病毒治疗前一定要排除自身免疫性肝炎。这也提示我们, 在慢性乙型肝炎的常规诊疗中不仅要检测自身抗体的存在, 同时还要监测自身抗体滴度的高低, 以实施有针对性的个体化治疗。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献

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[2]	林晓梅, 潘钦石, 张文辉, 等. 慢性乙型肝炎患者产生自身免疫的研究[J]. 中华医院感染学杂志, 2009, 19(8): 889-891. [本文引用:1]
[3]	张海萍, 闫惠平, 冯霞, 等. 乙肝病毒感染者血清抗核抗体特征及其临床相关性[J]. 首都医科大学学报, 2007, 28(2): 154-157. [本文引用:1]
[4]	张利方, 李方, 石莉萍. 自身免疫性肝炎和乙型肝炎患者自身抗体检测及对比分析[J]. 微循环学杂志, 2010, 20(1): 40-41. [本文引用:1]
[5]	刘燕敏, 闫惠平, 汪俊韬. 肝功能异常患者中自身抗体及自身免疫性肝病的检测[J]. 中华肝脏病杂志, 2004, 12(6): 360-362. [本文引用:1]
[6]	张海萍, 闫惠平, 冯霞, 等. 乙肝病毒感染者血清抗核抗体特征及临床相关性[J]. 首都医科大学学报, 2007, 28(2): 154-157. [本文引用:1]
[7]	肖征, 周光. 对血清中乙型肝炎表面抗原与表面抗体同时阳性现象的探讨[J]. 中华医院感染学杂志, 2008, 18(11): 1554-1555. [本文引用:1]

2004

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. 2004, 9(4):270-271 DOI:doi:10.3969/j.issn.1008-1704.2004.04.021

病毒性肝炎的肝外自身免疫现象

王江滨

除自身免疫性肝病(包括自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化及硬化性胆管炎)外,病毒性肝炎也可伴有自身免疫现象,而且几乎所有嗜肝病毒包括HAV、HBV、HCV、HDV及EBV都被认为可以诱发自身免疫反应而导致肝脏免疫病理损伤及肝外自身免疫现象.

... 近年来病毒性肝炎自身免疫现象引起许多研究者的关注,研究表明几乎所有的嗜肝病毒均可诱发机体的自身免疫^[1] ...

2009

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. 2009, 19(8):889-891

慢性乙型肝炎患者产生自身免疫的研究

林晓梅, 潘钦石, 张文辉

目的探讨乙型肝炎病毒 (HBV)感染后导致机体产生自身免疫的情况。方法采用日立7600全自动生化分析仪检测166例慢性乙型肝炎患者(CHB)的丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)、白球蛋白比值(A/G)、碱性磷酸酶(ALP)及γ谷氨酰酶(γ-GT);HBV-DNA含量的检测采用实时荧光定量PCR方法;采用间接免疫荧光法、放射免疫法分别检测抗核抗体(ANA)及抗双链DNA抗体 (Ads-DNA)。结果166例CHB患者血清中总自身抗体检出率为36.7%,显著高于正常对照组(P0.01),且分布以低滴度为主。ANA阳性组的ALT、AST显著高于ANA阴性组(P0.05),而A/G比值明显低于ANA阴性组(P0.05)。ANA阳性组的HBV-DNA含量显著高于 ANA阴性组(P0.01),且随着HBV-DNA拷贝数的升高,CHB患者ANA的阳性率亦随之升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论HBV感染可导致自身免疫的发生;HBV感染引发的自身免疫性反应与CHB患者的肝功能损害程度和病毒复制水平有关。

... 有文献报道慢性病毒性肝炎患者存在自身免疫现象, 主要表现为血清中检出各种自身抗体^[2] ...

2007

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. 2007, 28(2):154-157 DOI:doi:10.3969/j.issn.1006-7795.2007.02.005

乙肝病毒感染者血清抗核抗体特征及其临床相关性

张海萍, 闫惠平, 冯霞

Objective To investigate the characteristics of anti-nuclear antibodies and its clinical implication in patients with hepatitis B virus infection. Methods 569 patients with hepatitis B virus infection including 214 with chronic hepatitis B, 283 with liver cirrhosis and 72 with hepatocellular carcinoma were recruited. 30 healthy volunteers were as control. Indirect immune fluorescent assay(IIF) was used to detect the serum anti-nuclear antibody(ANA), anti-mitochondrial antibody(AMA), anti-smooth muscle antibody(SMA) and anti-liver special protein(LSP). Western blot was used to detect ANA profile. Results 1) 245 of the 569 patients with Hepatitis B virus infection(43%) were ANA positive, 90/214(42.1%) in CHB group, 108/283(38.2%) in LC group, 47/72(65.3%) in HCC group. HCC had a significantly higher percentage of ANA than CHB, LC and healthy volunteers(6.7%). 2) Among the 3 groups, low titer (1:100) of anti-nuclear antibodies was more common. Although a rage of fluorescent patterns was observed, the percentage of granular fluorescence was highest in the 3 groups. The percentage of anti-nucleolar antibody in HCC group(19.1%) was higher than CHB(4.4%) and LC(18.5%) (P Conclusion Anti-nuclear antibodies(ANA) were main auto-antibody in patients with hepatitis B virus infection, especially in patients with HCC. The titer of ANA had no significant implication with liver damage.

目的分析乙肝病毒(HBV)感染者血清中抗核抗体(ANA)的特征并探讨其与临床的相关性。方法慢性乙型肝炎(CHB)、乙肝后肝硬化(LC)、原发性肝癌(HCC)患者共569例,采用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA、AMA、SMA、LSP等自身抗体;免疫印迹法检测ANA谱。结果 1)569例中ANA阳性245例(43%),CHB、LC、HCC组ANA检出率分别为42.1%(90/214)、38.2%(108/283)、65.3%(47/72),3组均明显高于正常对照组6.7%(2/30),HCC组ANA阳性率显著高于CHB组和LC组(P 结论 HBV感染者出现的自身抗体以ANA为主,HCC组阳性率最高。ANA荧光模式以颗粒型常见,核仁型在HCC和LC组高于CHB组。70.6%的HBV感染者ANA为低滴度阳性,其滴度的高低与肝细胞损伤未见明显相关性。

... 现有的大量文献报道及本研究通过对HBV感染者ANA测定的结果证实,HBV感染者体内存在自身抗体,引发机体自身免疫紊乱^[3] ...

2010

0.0

. 2010, 20(1):40-41 DOI:doi:10.3969/j.issn.1005-1740.2010.01.014

自身免疫性肝炎和乙型肝炎患者自身抗体检测及对比分析

张利方, 李方, 石莉萍

目的:检测分析自身免疫性肝炎(AIH)与乙型肝炎(HB)患者血清自身抗体特点及诊断应用价值.方法:采用间接免疫荧光法检测AIH组(n＝43)和HB组(n＝100)血清抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗线粒体抗体(AMA)及抗中性粒细胞胞浆抗体(pANCA、cANCA),比较两组自身抗体检出率、ANA滴度、荧光模型及肝功能和免疫球蛋白.结果:AIH组自身抗体以ANA、SMA为主,阳性率分别为93.02和67.44%,两种抗体同时阳性的检出率为55.80%,AMA及pANCA、cANCA的检出率分别为13.95%和6.97%、2.32%;而HB组只检测出16例(16.0%)ANA,无一例SMA阳性.AIH组ANA以高滴度(≥1:320)抗体为主,荧光核型主要以核仁、核膜型为主,丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及IgG含量明显高于HB组.HB组ANA以低滴度(≤1:100)抗体为主,荧光核型以颗粒型所占比例较高.结论:检测AIH和HB患者自身抗体相关指征对提高诊断准确性,制定治疗方案有重要作用.

... 张利方等^[4]研究发现在肝病的发生发展过程中,自身免疫功能的变化多集中在与细胞增值、分裂有关的核仁成分上, AIH患者的核型主要以核仁型(50 ...

2004

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. 2004, 12(6):360-362 DOI:doi:10.3760/j.issn:1007-3418.2004.06.014

肝功能异常患者中自身抗体及自身免疫性肝病的检测

刘燕敏, 闫惠平, 汪俊韬

目的自身免疫性肝病临床流行病学调查,观察在肝功能异常患者中自身抗体检测的阳性率、自身免疫性肝病检出率及临床意义.方法连续收集就诊病例中肝功能异常患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)大于40 U/L血清511份,分别进行相关自身抗体(ANA)检测,并查阅临床资料.结果511份血清检测出ANA阳性率为14.09%,抗平滑肌抗体(SMA)阳性率0.59%,抗线粒体抗体(AMA)阳性率2.94%,抗线粒体抗体亚型-丙酮酸脱氢酶复合物(AMA-M2)阳性率0.98%;ANA谱中的SS-A阳性率0.59%、SSB阳性率0.20%、JO-1阳性率0.20%,dsDNA阳性率0.78%;未检出抗肝肾微粒体抗体(LKM-1)、可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)、抗肝细胞溶质抗原1型抗体(L C-1)及ANA谱中其他抗体.从ALT升高的患者中收集到的511份血清,可查到完整临床资料者共469例.原发性胆汁性肝硬化(PBC)及自身免疫性肝炎(AIH)患者检出率分别为1.0 6%及0.43%,未检出原发性硬化性胆管炎患者.自身抗体阳性患者77.78%诊断为病毒性肝炎及相关疾病.病毒性肝炎及相关疾病中自身抗体阳性率为18.29%.结论高滴度(＞1:320)自身抗体对自身免疫性肝病诊断有意义.PB C及AIH患者检出率近似丙型及戊型肝炎检出率,临床不能忽视,病毒性肝炎及相关疾病中可检测出自身抗体.

... 320)自身抗体的存在与自身免疫性疾病密切相关^[5,6] ...

2007

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. 2007, 28(2):154-157

乙肝病毒感染者血清抗核抗体特征及临床相关性

张海萍, 闫惠平, 冯霞

Central Laboratory, Beijing Youan Hospital, Capital Medical University

... 320)自身抗体的存在与自身免疫性疾病密切相关^[5,6] ...

2008

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. 2008, 18(11):1554-1555 DOI:doi:10.3321/j.issn:1005-4529.2008.11.018

对血清中乙型肝炎表面抗原与表面抗体同时阳性现象的探讨

肖征, 周光

目的探讨血清中乙型肝炎表面抗原和表面抗体同时阳性的现象.方法用电化学发光免疫检测系统E170检测临床标本,对同时阳性标本用另外两种试剂对表面抗原复测.另外3种试剂复测表面抗体.结果 7332份标本中有140份为表面抗原与抗体同时阳性(1.9%);对收集到的其中73份标本复测的结果,表面抗原均为阳性,表面抗体共有24份被3种方法分别复测为阳性,但3种试剂的结果互不相关;E170表面抗体阳性值较高的标本用雅培试剂复测为阳性的可能性更高.结论乙型肝炎表面抗原和抗体同时阳性的情况并不少见,它可能是感染病毒与人体免疫机能相互作用的结果;试剂质量和实验室操作水平也是影响结果的重要因素.

... 若对存在高滴度自身抗体的乙型肝炎患者采用干扰素治疗,干扰素可能会诱导或增强自身免疫活性细胞,加重自身免疫性反应,两者作用相反^[7] ...