引用本文
徐玉兵, 高春芳, 赵琳. 脂血对Sysmex XE-2100D血液分析仪检测指标的影响研究. 2012, 27(11): 1017-1020
XU Yubing, GAO Chunfang, ZHAO Lin. The research on the influence of lipemia on the detection parameters of Sysmex XE-2100D hematology analyzer. Labratory Medicine, 2012, 27(11): 1017-1020  
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脂血对Sysmex XE-2100D血液分析仪检测指标的影响研究
徐玉兵1, 高春芳1, 赵琳2
第二军医大学附属东方肝胆外科医院,上海 200438

作者简介:徐玉兵,男,1984年生,技师,主要从事临床血液学检验工作。

通讯作者:高春芳,联系电话:021-81875131。

摘要
目的

探讨脂血对Sysmex XE-2100D血液分析仪测定血常规主要指标的影响。

方法

取20例无溶血、黄疸、脂血标本设为对照组,将这20例标本去除上层血浆成分,加入同体积的Sysmex XE-2100D血液分析仪原装配套稀释液,测定血常规设为实验组,将其结果与对照组进行比较;取66例无溶血、黄疸、脂血已测定的血常规标本,随机分为3组,用实验组相同的方法去除10、50和100 μL血浆后,加入等体积脂肪乳剂,用日立7600全自动生化分析仪测定甘油三酯(TG),根据TG的含量不同,将脂血的程度进行分级,TG 6.0~10.0 mmol/L 21例,设为轻度脂血组,未加脂肪乳剂测定结果设为对照组A;TG 10.1~14.0 mmol/L 21例,设为中度脂血组,未加脂肪乳剂测定结果设为对照组B;TG﹥14.0 mmol/L 24例,设为重度脂血组,未加脂肪乳剂测定结果设为对照组C,将测定结果分别与其未加脂肪乳剂者的测定结果进行比较。

结果

对照组A与轻度脂血组比较13项参数结果差异均无统计学意义;中度脂血组与对照组B和重度脂血组与对照组C比较, 血红蛋白(Hb)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、白细胞(WBC)均升高,其4项指标差异有统计学意义( P<0.05)。

结论

中、重度脂血对Sysmex XE-2100D血液分析仪检测血液常规Hb、MCH、MCHC、WBC参数影响较大,并随着脂血程度加深而加重。

关键词: 脂血; 血液分析仪; 影响评估
中图分类号:R446.11 文献标志码:A 文章编号:1673-8640(2012)12-1017-04
The research on the influence of lipemia on the detection parameters of Sysmex XE-2100D hematology analyzer
XU Yubing1, GAO Chunfang1, ZHAO Lin2
Eastern Hepatobiliary Surgery Hospital,Second Military Medical University, Shanghai 200438,China
Abstract
Objective

To investigate the influence of lipemia on the main parameters of Sysmex XE-2100D hematology analyzer.

Methods

A total of 20 samples without hemolysis,jaundice and lipemia were set as control group. The upper plasma was removed, and equal volume reagent diluent of Sysmex XE-2100D hematology analyzer was added. These samples were performed as experiment group,and the results were compared with those of the control group. A total of 66 routine blood samples without hemolysis,jaundice and lipemia were randomly classified into 3 groups. These samples were treated by removing 10,50 and 100 μL plasma and adding equal volume of fat emulsion, and then the levels of triglyceride (TG) were determined by Hitachi 7600 automatic biochemistry analyzer. Lipemia level was classified based on TG level. A total of 21 samples (TG 6.0- 10.0 mmol/L) were set as low lipemia group,and original samples without fat emulsion were set as control A. A total of 21 samples (TG 10.1 -14.0 mmol/L) were set as moderate lipemia group,and original samples without fat emulsion were set as control B. A total of 24 samples (TG >14.0 mmol/L) were set as high lipemia group,and original samples without fat emulsion were set as control C. The detection results of different lipemia level groups were compared with the results of control groups.

Results

In the low lipemia group,the main parameters of blood routine test showed no statistical significance comparing to control A. Comparing to control B and C,hemoglobin (Hb),mean cell hemoglobin (MCH),mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and white blood cell (WBC) increased significantly in the moderate and high lipemia groups, respectively ( P<0.05).

Conclusions

The moderate and high lipemia levels of blood can influence significantly the results of blood routine test by Sysmex XE-2100D hematology analyzer. Hb,MCH,MCHC and WBC increase parallelly with the increase of lipemia level.

Keyword: Lipemia; Hematology analyzer; Influence assessment

Sysmex XE-2100D血液分析仪是一台全自动五分类血液分析仪, 检测速度快, 除采用传统的电阻抗法和射频法外, 还应用了流式细胞激光技术, 结合特殊化学试剂及荧光染料作静脉血白细胞(WBC)的分类, 提高了WBC分析的准确性和敏感性。但血液细胞分析结果准确与否, 除了标本分析前患者准备、标本采集及仪器性能等因素外, 还有一个重要因素, 就是血液本身可能存在干扰因素影响血液分析仪检测结果的准确性, 如黄疸、溶血、脂血(包括输注脂肪乳剂)等。尤其是近年来脂肪乳剂在临床上作为肠外营养的使用不断增加。我们针对临床输注脂肪乳剂后导致不同程度的标本脂血, 对Sysmex XE-2100D血液分析仪测定血液常规分析最常用、最具有意义的13项指标进行了统计分析, 并建立了较为规范的纠正措施。13项指标分别为WBC计数、红细胞(RBC)计数、血小板(PLT)计数、血红蛋白(Hb)含量、红细胞比容(HCT)、平均红细胞容积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、中性粒细胞(NEUT)百分比、淋巴细胞(LYMPH)百分比、单核细胞(MONO)百分比、嗜酸性粒细胞(EOS)百分比、嗜碱性粒细胞(BASO)百分比。

材料和方法
一、仪器

Sysmex XE-2100D血液分析仪由日本东亚公司提供; 7600全自动生化分析仪由日本日立公司提供; KUBOTA8420离心机由日本久保田公司提供。

二、试剂

Sysmex XE-2100D血液分析仪原装配套试剂及全血质控品(批号QC-12550811); 苏州贝朗公司提供20%中/长链脂肪乳注射液; 甘油三酯(TG)试剂由罗氏公司提供; 乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)真空采血管由浙江拱东医疗科技有限公司提供。

三、标本来源

标本均来自第二军医大学附属东方肝胆外科医院2011年9月份住院患者, 清晨空腹抽血2 mL置EDTA-K2真空采血管, 室温放置, 排除溶血、黄疸、脂血对检测结果的影响, 所有标本在2 h内测定完毕。

四、方法

先取20例无溶血、黄疸、脂血标本设为对照组, 闭盖模式测定血常规并记录结果。将其20例标本以3 000× g离心10 min后, 去除上层血浆成分, 再加入同体积的Sysmex XE-2100D血液分析仪原装配套稀释液, 混匀后再测定血常规, 设为实验组, 将其结果进行比较。

取66例无溶血、黄疸、脂血并已测定血常规的标本, 随机分为3组, 每组22例, 用实验组相同的方法去除上层血浆后分别加入10、50和100 μ L脂肪乳剂, 用日立7600全自动生化分析仪测定TG, 根据TG的含量不同, 将脂血的程度进行分级, TG 6.0~10.0 mmol/L 21例, 设为轻度脂血组, 其前测定结果设为对照组A; TG 10.1~14.0 mmol/L 21例, 设为中度脂血组, 其前测定结果设为对照组B; TG> 14.0 mmol/L 24例, 设为重度脂血组, 其前测定结果设为对照组C。按闭盖模式测定不同程度脂血标本血常规, 将测定结果分别与其前测定的结果进行比较。

五、统计学方法

运用SPSS 16.0统计软件对组内计量资料进行配对t检验, 结果用 x̅± s表示, Hb、MCHC、PLT 3项指标保留整数, 其他指标保留小数点后2位有效数字, P< 0.05为差异有统计学意义。

结果

对照组(20例)与实验组(20例)血液常规各参数结果比较, 13项指标差异均无统计学意义 (P> 0.05)。

对照组A(21例)与轻度脂血组(21例)血液常规各参数进行统计学分析, 轻度脂血组RBC、Hb、MCH、MCHC、WBC 5项指标差异有统计学意义(P< 0.05), 但结合Sysmex公司规定的精密度要求及上海市临床检验中心2012年质量管理基本要求的仪器校准允许偏差范围, 本研究就对照组和实验组在同一时间内先后检测同一份标本, 故可按仪器精密度规定的允许偏差范围, 结合临床分析比较13项指标差异均无临床意义。见表1。

表1 对照组A与轻度脂血组血常规检测结果比较

对照组B(21例)与中度脂血组(21例)血液常规各参数结果比较, 中度脂血组RBC降低, Hb、MCV、MCH、MCHC、WBC、MONO(%)均升高, 7项指标差异有统计学意义(P< 0.05), 但根据仪器规定的精密度允许偏差范围并结合临床分析, 对照组B与中度脂血组各参数结果比较Hb、MCH、MCHC、WBC 4项指标差异有统计学意义。见表2。

表2 对照组B与中度脂血组血常规检测结果比较

对照组C(24例)与重度脂血组(24例)血液常规各参数结果比较, 重度脂血组RBC 和LYMPH(%)降低, Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、WBC、NEUT(%)、MONO(%)均升高, 11项指标差异有统计学意义(P< 0.05), 但根据仪器规定的精密度允许偏差范围, 结合临床分析对照组C与重度脂血组各参数结果比较Hb、MCH、MCHC、WBC 4项指标差异有统计学意义。见表3。

表3 对照组C与重度脂血组血常规检测结果比较
讨论

在临床实践工作中, 常会遇见一些高脂血症、肿瘤晚期患者等, 由于自身血脂过高或疾病后期以营养大袋和脂肪乳剂作为肠外营养输注, 而使患者血液标本成明显脂血状态。在临床工作中, 脂血是最常见的干扰血液分析仪检测血常规的因素之一, 干扰所有型号血液分析仪的Hb、MCH、MCHC、WBC、PLT等参数检测[1]。我们就不同程度脂血对Sysmex XE-2100D血液分析仪检测血常规的影响进行研究。结果显示13项指标中轻度脂血有5项、中度脂血有7项、重度脂血有11项指标与相应对照组比较差异有统计学意义(P< 0.05), 但结合临床实践TG 6.0~10.0 mmol/L的轻度脂血对检测结果影响较小, 而TG 10.1~14.0 mmol/L的中度脂血和 TG> 14.0 mmol/L重度脂血对Hb、MCH、MCHC、WBC 4项指标影响较大, 并随着血脂程度不断增加, 对血液常规分析影响增大。究其原因可能有:(1)对WBC检测影响:采用流式细胞技术, 对每个通过检测部位的细胞或颗粒进行逐个分析, 以免重复检测和漏检, 但无论是电阻抗法还是流式细胞技术, 都不可能对每个细胞进行完全识别, 因而干扰结果测定[2]; (2)RBC/PLT检测影响:RBC/PLT检测采用经典电阻抗原理, 双鞘流(前鞘流和后鞘流)使流经检测部位的RBC/PLT保证逐个通过, 避免细胞并列通过、侧向通过带来检测误差, 但脂肪乳颗粒流经检测部位都可能会干扰检测, 对RBC计数影响, 导致MCV、MCH结果偏移; (3)对Hb检测影响:测定原理为亚铁血红素中Fe2+被十二烷基磺酸钠氧化, 形成SLS-Hb衍生物, 在555 nm波长进行比色测定, 而脂肪乳乳白色浑浊可能对比色法测定Hb存在干扰, 导致Hb假性升高, 进而引起MCH和MCHC测定偏差; (4)WBC分类影响:原理采用WBC DIFF检测通道、半导体激光流式细胞原理结合细胞化学荧光染色技术对血细胞进行检测, 当半导体激光照射被检细胞时, 依据每个细胞产生信号来分辨细胞, 其纵坐标(Y)轴表示侧向荧光强度, 反映亚甲蓝对细胞内DNA和RNA的染色强度, 横坐标(X)轴表示侧向散射光强度, 反映细胞内容物, 检测散射光信号和荧光信号共同形成散点图和直方图, 来区分NEUT 、LYMPH、MONO[3, 4]。而对于EOS、BASO分类计数, Sysmex XE-2100D血液分析仪设立了专门EOS/BASO通道, 通过加入特殊的溶血剂溶解其他细胞形成裸核, 只保留EOS/BASO完整性, 再根据细胞体积、大小专门进行检测, 可能是EOS和BASO在轻、中、重度脂血检测过程中没有受到干扰的主要原因。

针对Sysmex XE-2100D我们提出脂血的干扰判断方法:当仪器报警栏出现“ 乳糜/Hb干扰” , 放置后血浆部分出现乳白色浑浊, 或血涂片中发现大小不等的不着色脂肪球, 应高度怀疑为脂血标本, 可通过测定TG值判断脂血程度, 进一步分析可能对哪些血常规指标存在干扰。纠正措施:按照本研究实验组相同的方法, 以3 000× g离心10 min后去除上层血浆成分, 再加入同体积的Sysmex XE-2100D血液分析仪原装配套稀释液, 混匀后再测定血常规, 把纠正前后的结果报告给临床医生, 并在脂血标本化验单的备注栏中注明“ 脂血标本” 。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 曾素根, 余江, 曾婷婷, 等. Sysmex公司血液分析仪的干扰因素分析判断及处理程序[J]. 检验医学, 2010, 25(3): 244-246. [本文引用:1]
[2] 丛玉隆. 当代血液分析技术与临床[M]. 北京: 人民卫生出版社, 1997: 58. [本文引用:1]
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[4] 丛玉隆, 乐家新. 现代血细胞分析技术与临床[M]. 北京: 人民军医出版社, 2005: 99. [本文引用:1]